专利名称：一种酵母培养物及其在促进肠道益生菌增殖中的应用的制作方法随着饲用抗生素的普及甚至滥用，其所带来的耐药性、药物残留等负面效应日益突出。饲用抗生素的限制使用及禁止是畜牧业发展的必然趋势，而开发利用可选择性促进肠道有益菌增殖、改善肠道内环境、提高动物机体免疫力，同时不为肠道内酶所分解、不产生耐药性、无残留的新型绿色饲料添加剂是畜牧业可持续发展的必然选择。酵母培养物(yeast culture, YC)是指由酵母菌在特定工艺条件下经充分发酵后所形成的微生态制品，主要包括酵母细胞代谢产物、经发酵后变异的培养基以及少量已无活性的酵母细胞。作为一种生物活性添加剂，酵母培养物营养丰富、成分复杂，含有维生素、 氨基酸、消化酶、有机酸、多糖以及未知的生长因子等。据相关报道，酵母培养物可有效改善动物胃肠道菌群，促进乳酸菌、纤维素菌等有益菌繁殖。酵母培养物的质量受到菌种、发酵生产工艺以及检测手段等因素的影响。酵母菌在不同的培养环境下，如不同温度、湿度或酸碱环境尤其是底物成分，会产生不同的发酵产物，而这其中又包含大量的未知生长因子。生产酵母培养物时所使用的培养基和发酵工艺控制参数对其终端产品中代谢产物的组成、浓度及其生物利用率的稳定性有着至关重要的影响。即便在使用相同酵母菌种的情况下，不同培养基组成或不同的发酵生产控制工艺会导致酵母培养物产品中代谢产物组成和浓度出现明显的差异。
本发明的目的是提供一种酵母培养物及其在促进肠道益生菌增殖中的应用。本发明提供了一种制备酵母培养物的方法，是将CGMCC编号为2. 1882的酿酒酵母 (Saccharomyces cerevisiae)进行发酵，得到酵母培养物。所述发酵可包括如下步骤(1)将所述酿酒酵母接种至种子培养基，20-50°C (如20- °C或)、 100-200rpm (如 100_150rpm 或 150_200rpm)振摇培养 18_40h (如 18_24h 或 24_40ti)，获得种子液；(2)将步骤(1)的种子液接种至发酵培养基，20-500C (如20_30°C或30_50°C )静置培养 30-60h (30-45h 或 45_60h)。所述发酵培养基的制备方法如下取20-200g碳源、5-300g氮源、0. I-IOg(如 0. I-Ig 或 I-IOg)ΚΗ2Ρ04、0· l-10g(如 0. I-Ig 或 1-lOg)MgSO4 · 7Η20、0· l-4g(如 0. I-Ig 或 l-4g) MnSO4 ·Η20、0· l_4g (如 0. l_lg 或 l_4g) CaCl2、0. l_4g (如 0. l_lg 或 l_4g) CuSO4 ·5Η20、 0. l-4g(如 0. I-Ig 或 l-4g) ZnSO4 · 7H20 和 0. l_4g(如 0. I-Ig 或 l_4g) FeSO4 · 4H20，用水 (如蒸馏水)溶解并定容至1L。所述20-200g碳源具体可由IO-IOOg葡萄糖(如10_50g或50_100g)和IO-IOOg(如10-50g或50-100g)含有蔗糖的糖类组成。所述20_200g碳源具体可为 20-200g (如 20-100g 或 100-200g)葡萄糖或 20_200g (如 20_100g 或 100_200g)含有蔗糖的糖类。所述含有蔗糖的糖类具体为蔗糖或糖蜜。所述5-300g氮源具体可由2-100g (如2_50g或50_100g)酵母膏、2-lOOg (如 2-50g或50-100g)蛋白胨和I-IOOg(如l_50g或50_100g)硫酸铵组成，也可由 2. 5-150g (如 2. 5-70g 或 70_150g)酵母膏和 2. 5_150g (如 2. 5_70g 或 70_150g)蛋白胨组成，也可由 2. 5-150g (如 2. 5-70g 或 70_150g)酵母膏和 2. 5_150g (如 2. 5_70g 或 70_150g) 硫酸铵组成，也可由2. 5-150g (如2. 5-70g或70-150g)蛋白胨和2. 5_150g (如2. 5_70g或 70-150g)硫酸铵组成。所述5-300g氮源具体可为5-300g酵母膏或5_300g蛋白胨或5_300g 硫酸铵。所述种子培养基的制备方法具体如下取10_40g(如10_20g或20_40g)葡萄糖、 5-40g (如 5-10g 或 10-40g)酵母粉、10_40g(如 10_20g 或 20_40g)蛋白胨和 0. l_4g (如 0. l-2g或2- )MnSO4 · H2O,用水(如蒸馏水)溶解并定容至IL0所述种子培养基的pH值具体可为自然pH。所述种子液的接种量为-30% (如-15%或15% -30% )。本专利中的接种量特制种子液与发酵培养基的体积比。所述种子液接种至所述发酵培养基的初始时刻，所述酿酒酵母的浓度为 1 X 105-3 X 106cfu/ml (如 1 X IO5-L 5 X 106cfu/ml 或 1. 5 X 106_3 X 106cfu/ml)。所述方法还包括如下步骤将完成发酵的总体系4000rpm离心5min，收集上清液。所述方法还包括将所述发酵上清用细菌过滤器(0. 22 μ m)过滤的步骤。以上任一所述方法制备得到的酵母培养物均属于本发明的保护范围。所述酵母培养物可用于促进肠道益生菌增殖。所述肠道益生菌具体可为动物双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌、嗜热链球菌或德氏乳杆菌保加利亚亚种。所述酵母培养物可用于制备促进肠道益生菌增殖的制剂。所述肠道益生菌具体可为动物双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌、嗜热链球菌或德氏乳杆菌保加利亚亚种。本发明还保护一种培养肠道益生菌的方法，是在用于培养所述肠道益生菌的培养基中加入肠道益生菌(益生菌种子液)和所述酵母培养物，得到初始培养体系，然后进行培养。所述肠道益生菌具体可为动物双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌、嗜热链球菌或德氏乳杆菌保加利亚亚种。所述初始培养体系中，所述酵母培养物的加入量可为0.体积比(如0. -10%体积比或10% -20%体积比)。所述初始培养体系中，所述益生菌菌液的加入量可为0. 1% -20%体积比(如0. -10%体积比或10% -20%体积比)。所述初始培养体系中，所述酵母培养物和所述益生菌菌液具体可为1 1的体积比。所述益生菌菌液具体可为浓度为107CfU/ml的菌液。所述动物双歧杆菌具体可为CGMCC编号为1. 2268的菌株。所述嗜酸乳杆菌具体可为CGMCC编号为1. 1878的菌株。所述植物乳杆菌具体可为CGMCC编号为1. 557的菌株。 所述嗜热链球菌具体可为CGMCC编号为1. 2471的菌株。所述德氏乳杆菌保加利亚亚种具体可为CGMCC编号为1. 1480的菌株。本发明提供了一种酵母培养物的制备工艺，并得到了性能优良的酵母培养物。本发明提供的酵母培养物中含有多种营养素，能为肠道益生菌生长提供营养底物和营养活性物，从而促进肠道益生菌增殖。本发明对于食品领域或饲料领域具有重大价值。 本发明公开了一种酵母培养物及其在促进肠道益生菌增殖中的应用。本发明提供了一种制备酵母培养物的方法，是将CGMCC编号为2.1882的酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)进行发酵，得到酵母培养物。本发明提供了一种酵母培养物的制备工艺，并得到了性能优良的酵母培养物。本发明提供的酵母培养物中含有多种营养素，能为肠道益生菌生长提供营养底物和营养活性物，从而促进肠道益生菌增殖。本发明对于食品领域或饲料领域具有重大价值。