专利名称：一种喜马拉雅大黄提取物及其应用的制作方法 喜马拉雅大黄(Himalayan Rhubarb，Rheum delavayi)系蓼科大黄属植物，文献(天然染料——实在的替换品国外纺织技术2003 11，云南省维西县塔城镇土地利用/地表覆盖及其空间格局变化研究生态学杂志2005 06)介绍可以作为天然染料用于织布印染。喜马拉雅大黄叶柄酸甜可口，多年来一直作为当地经常食用的水果之一，深受人们的青睐。采集喜马拉雅大黄根茎会对当地植被造成破坏。每年7-9月，喜马拉雅大黄的根茎上都会长出叶柄，10月左右自然枯萎，第二年还会再次长出。喜马拉雅大黄叶柄酸甜可口，多年来一直作为当地经常食用的水果之一，深受人们的青睐。
本发明所要解决的问题是提供一种喜马拉雅大黄提取物及其应用。本发明提供的喜马拉雅大黄提取液，它的有效成分为总黄酮0.61-7.36×10mg/100g，芦丁0.18-3.60mg/100g，槲皮素0.04-0.84mg/100g，SOD酶2.06×10-4.12×102U/g。本发明所提供的喜马拉雅大黄提取物固体粉末，含有8.5×10-3.32×102mg/100g的总黄酮，4.5-16.2mg/100g的芦丁，0.99-3.78mg/100g的槲皮素、SOD酶4.5×102-1.86×103U/g。所述喜马拉雅大黄提取物可由下述方法制成1)将喜马拉雅大黄叶柄打浆后，与是所述大黄叶柄质量的0.5-10倍的水混和，制成浆粒细度为0.1-0.5mm的混和液；2)粗率将混和液进行滤径为0.2-0.4mm的过滤；3)精滤将步骤2)得到的滤液以1000-3000rpm的转速、8-15cm的离心半径离心5-30min，得到的上清液即为喜马拉雅大黄提取液。所述喜马拉雅大黄提取液经过干燥得到喜马拉雅大黄提取物固体粉末。含有上述喜马拉雅大黄提取物的饮品或饮料也属于本发明的保护范围。
所述含有喜马拉雅大黄提取物饮料可为将上述喜马拉雅大黄提取液与水以1∶0-5的体积比混和，添加甜味剂，使所述甜味剂的质量百分含量为1％～20％，pH值调至2.5-3.8。
所述甜味剂可为阿巴甜、蛋白糖、砂糖、甜味素等，其中优选为白砂糖。
所述甜味剂的添加质量百分含量优选为7.0％～7.2％。
所述pH值优选为3.4。
所述pH值可用柠檬酸、苹果酸或乳酸调节，其中优选为用柠檬酸调节。
所述饮品或饮料可以液体形式或经过干燥以固体形式存在。
为了方便保存，所述饮品或饮料可用巴氏杀菌、超高温灭菌、瞬时灭菌等方法灭菌后保存。
本发明的含有喜马拉雅大黄提取物饮料的蛋白质含量0.06-1.26％，碳水化合物含量0.36-8.8％，可溶性膳食纤维0.42-10.6％。
小鼠喂养实验表明，本发明的喜马拉雅大黄提取液及含有该喜马拉雅大黄提取液的饮料可明显提高动物的耐缺氧能力和运动能力。本发明首次以喜马拉雅大黄叶柄为原料，开发了一种新型的饮料。粗滤可以将大部分的果胶类物质、大部分纤维以及部分蛋白质和淀粉除去，精滤离心将其余部分纤维、蛋白质和淀粉。经过以上处理，有效解决了饮料的沉淀问题。该饮料常温放置1年，色泽风味无改变，酸甜适口，清香爽口，而且液体仍澄清如初，无沉淀物或其他絮状物析出，所含的各种有效成分含量只降低1-2％，保持了喜马拉雅大黄叶柄的天然色泽和香气。该产品不含防腐剂和色素，常温放置，保质期1年。

下述实施例中的实验方法，如无特别说明，均为常规方法。
下述实施例中的百分含量如无特别说明，均为质量百分含量。
实施例1、喜马拉雅大黄提取物及含有喜马拉雅大黄提取物的饮料的制备1、喜马拉雅大黄提取物的制备1)取喜马拉雅大黄叶柄10kg清洗，切块，打浆，浆粒细度为0.1mm，加入大黄叶柄质量的5倍的水，混匀；2)粗滤用孔径为0.2mm的板框压滤，弃去滤渣，得到粗滤液；3)精滤将粗滤液以3000rpm的转速、8cm的离心半径离心15min，得到9.7kg上清液，即为喜马拉雅大黄提取液。经检测，该喜马拉雅大黄提取液，含有总黄酮0.61mg/100g，芦丁0.3mg/100g，槲皮素0.07mg/100g，SOD酶3.6×10U/g。将该喜马拉雅大黄提取液经减压干燥，得到120g固体粉末，经检测，该固体喜马拉雅大黄提取物含有1.66×102mg/100g的总黄酮，8.1mg/100g的芦丁，1.88mg/100g的槲皮素、SOD酶9.3×102U/g。
2、饮料的制备1)甜味剂的选择取步骤1中制备的喜马拉雅大黄提取液，分为四份，分别加入8％的阿巴甜、蛋白糖50型、白砂糖、甜味素。然后品尝味道，结果如表1所示，从表1可以确定最佳甜味剂为白砂糖。
表1.最佳甜味剂选择

2)取步骤1中制备的喜马拉雅大黄提取液，分成12份，按照表2中的白砂糖量和柠檬酸量添加，品尝口味，从表2可以确定最佳口感为pH3.4，白砂糖7.0％-7.2％。
表2.最佳口感调配

3)含有喜马拉雅大黄提取物的饮料的制备将上述得到的喜马拉雅大黄提取液取10kg用水稀释3倍，添加甜味剂白砂糖使其质量百分含量为7.2％，用柠檬酸调节溶液pH值至pH3.4，经超高温灭菌，得到含有喜马拉雅大黄提取物的饮料。该饮料色泽为浅粉色，酸甜适口、香味清爽，液体澄清稳定。通过GB/T12295方法对该饮料的理化指标进行检测，用GB4789.2方法对微生物指标检测，结果表明，理化指标蛋白质含量0.14％，碳水化合物含量1.08％，可溶性膳食纤维1.4％。微生物含量细菌总数≤100个/ml，大肠菌群≤3个/ml，致病菌未检出。
实施例2、喜马拉雅大黄提取物及含有喜马拉雅大黄提取物的饮料的制备1、喜马拉雅大黄提取物的制备1)取喜马拉雅大黄叶柄10kg清洗，切块，打浆，浆粒细度为0.3mm，加入大黄叶柄质量的10倍的水，混匀；2)粗滤用孔径为0.3mm的板框压滤，弃去滤渣，得到粗滤液；3)精滤将粗滤液以3000rpm的转速、8cm的离心半径离心30min，得到96kg上清液，即为喜马拉雅大黄提取液。经检测，该喜马拉雅大黄提取液，含有总黄酮3.68mg/100g，芦丁0.18mg/100g，槲皮素0.04mg/100g，SOD酶2.06×10U/g。将该喜马拉雅大黄提取液经减压干燥，得到120g固体粉末，经检测，该固体喜马拉雅大黄提取物含有1.86×102mg/100g的总黄酮，10.1mg/100g的芦丁，2.88mg/100g的槲皮素、SOD酶8.3×102U/g。
2、含有喜马拉雅大黄提取物的饮料的制备将上述得到的喜马拉雅大黄提取液取10kg用水稀释5倍，添加甜味剂白砂糖使其质量百分含量为9.3％，用柠檬酸调节溶液pH值至pH2.5，经超高温灭菌，得到含有喜马拉雅大黄提取物的饮料。该饮料色泽为浅粉色，酸甜适口、香味清爽，液体澄清稳定。通过GB/T12295方法对该饮料的理化指标进行检测，用GB4789.2方法对微生物指标检测，结果表明，理化指标蛋白质含量0.08％，碳水化合物含量0.72％，可溶性膳食纤维0.84％。微生物含量细菌总数≤100个/ml，大肠菌群≤3个/ml，致病菌未检出。
实施例3、喜马拉雅大黄提取物及含有喜马拉雅大黄提取物的饮料的制备1、喜马拉雅大黄提取物的制备1)取喜马拉雅大黄叶柄10kg清洗，切块，打浆，浆粒细度为0.1mm，加入大黄叶柄质量的0.5倍的水，混匀；2)粗滤用孔径为0.2mm的板框压滤，弃去滤渣，得到粗滤液；3)精滤将粗滤液以3000rpm的转速、15cm的离心半径离心25min，得到7.8kg上清液，即为喜马拉雅大黄提取液。经检测，该喜马拉雅大黄提取液，含有总黄酮2.48×10mg/100g，芦丁1.80mg/100g，槲皮素0.28mg/100g，SOD酶1.36×102U/g。将该喜马拉雅大黄提取液经减压干燥，得到120g固体粉末，经检测，该固体喜马拉雅大黄提取物含有2.66×102mg/100g的总黄酮，9.1mg/100g的芦丁，2.88mg/100g的槲皮素、SOD酶9.3×102U/g。
2、含有喜马拉雅大黄提取物的饮料的制备将上述得到的喜马拉雅大黄提取液取10kg用水稀释1倍，添加甜味剂白砂糖使其质量百分含量为7.2％，用柠檬酸调节溶液pH值至pH3.8，经超高温灭菌，得到含有喜马拉雅大黄提取物的饮料。该饮料色泽为浅粉色，酸甜适口、香味清爽，液体澄清稳定。通过GB/T12295方法对该饮料的理化指标进行检测，用GB4789.2方法对微生物指标检测，结果表明，理化指标蛋白质含量0.5％，碳水化合物含量4.32％，可溶性膳食纤维5.06％。微生物含量细菌总数≤100个/ml，大肠菌群≤3个/ml，致病菌未检出。
实施例4、含有喜马拉雅大黄提取物的饮料的产品质量及小鼠喂养实验1、稳定性测定将实施例1、实施例2和实施例3中制备的饮料密封，在常温下放置1年，然后观察其色泽、混浊度，品尝味道，并进行理化指标和微生物含量进行检测。结果表明饮料经过一年的常温密封保存，色泽风味无改变，酸甜适口，清香爽口，而且液体扔澄清如初，无沉淀物或其他絮状物析出。理化指标实施例1中制备的饮料pH值为3.4，蛋白质含量0.14％，碳水化合物含量1.08％，可溶性膳食纤维1.4％。实施例2中制备的饮料pH值为2.6，蛋白质含量0.08％，碳水化合物含量0.72％，可溶性膳食纤维0.84％。实施例3中制备的饮料pH值为3.7，蛋白质含量0.5％，碳水化合物含量4.32％，可溶性膳食纤维5.06％。上述实施例1、实施例2和实施例3制备的饮料微生物含量细菌总数≤100个/ml，大肠菌群≤3个/ml，致病菌未检出。
2、小鼠喂养实验(1)缺氧耐力实验将小鼠随机分为对照组，实施例1制备的喜马拉雅大黄提取液实验组，实施例1制备的喜马拉雅大黄提取物饮料实验组，实施例2制备的喜马拉雅大黄提取液实验组，实施例2制备的喜马拉雅大黄提取物饮料实验组，实施例3制备的喜马拉雅大黄提取液实验组，实施例3制备的喜马拉雅大黄提取物饮料实验组，每组20只，均为雄性。各实验组饲养的环境一致，温度为27℃，相对湿度为60％，自然光照，都喂养标准基础饲料，同时分别灌胃实施例1、实施例2或实施例3制备的喜马拉雅大黄提取液、喜马拉雅大黄提取物饮料或生理盐水，其剂量如下喜马拉雅大黄提取液实验组给实施例1步骤1、实施例2步骤1和实施例3步骤1制备的喜马拉雅大黄提取液，每只每天0.1ml喜马拉雅大黄提取液，饲喂21d；喜马拉雅大黄提取物饮料实验组给实施例1步骤2、实施例2步骤2和实施例3步骤2制备的饮料，每只每天喜马拉雅大黄提取物饮料(含0.1ml喜马拉雅大黄提取液)，饲喂21d；对照组给等量生理盐水。末次喂食后30min，将三组小鼠分别装在500ml广口瓶内，立即封口，观察小鼠因缺氧而窒息死亡时间。以小鼠呼吸停止为判断死亡标准。结果表明对照组小鼠平均耐受时间为29.9±3.6min，实施例1步骤1、实施例2步骤1和实施例3步骤1制备的喜马拉雅大黄提取液实验组小鼠平均耐受时间分别为31.2±2.8，30.3±3.0min和38.2±3.6min；实施例1步骤2、实施例2步骤2和实施例3步骤2制备的喜马拉雅大黄提取物饮料实验组小鼠平均耐受时间为30.8±3.1，29.9±3.7min 35.8±3.9min。上述实施例3的喜马拉雅大黄提取液实验组、喜马拉雅大黄提取物饮料实验组与对照组均差异显著(P＜0.05)，实施例1和实施例2的喜马拉雅大黄提取液实验组、喜马拉雅大黄提取物饮料实验组没有显著差异(表3)。说明本发明的喜马拉雅大黄提取液及饮料可明显提高动物的耐缺氧能力。
表3 喜马拉雅大黄饮料对小鼠耐缺氧能力的影响


(2)劳动能力实验按照步骤(1)的方法分组饲喂，末次喂食30min后，将小鼠分别负重体重的10％体重的铅皮，放于37℃水温的游泳槽中游泳，记录小鼠自开始游泳至呛第一口水的时间。结果表明对照组平均游泳时间为1.36±0.23min，喂食实施例1步骤1、实施例2步骤1和实施例3步骤1制备的喜马拉雅大黄提取液组平均游泳时间分别为1.89±0.34min，1.38±0.31min和3.78±0.33min。喂食实施例1步骤2、实施例2步骤2和实施例3步骤2喜马拉雅大黄提取物饮料组平均游泳时间分别为1.78±0.29min，1.37±0.21min和3.56±0.53min。实施例3的喜马拉雅大黄提取液实验组、喜马拉雅大黄提取物饮料实验组与对照组均差异显著(P＜0.05)，实施例1、实施例2的喜马拉雅大黄提取液实验组、喜马拉雅大黄提取物饮料实验组没有显著差异。说明本发明的喜马拉雅大黄提取液及饮料可显著提高小鼠的运动能力。


本发明公开了一种喜马拉雅大黄提取物及其应用。该喜马拉雅大黄提取液，含有总黄酮0.61－7.36×10mg/100g，芦丁0.18－3.60mg/100g，槲皮素0.04－0.84mg/100g，SOD酶2.06×10－4.12×10