海藻酸酯胶束包载阿霉素的快速释放方法[0002]海藻酸盐是一种天然阴离子多聚糖，具有无毒、生物相容性好和生物可降解等特点，在食品、医药等众多领域都有应用。海藻酸盐经疏水改性成两亲性的海藻酸酯，在水溶液中能形成胶束，可作为药物的载体加以应用。[0003]阿霉素作为抗癌药物被广泛用于化疗中，但其在水溶液中具有较低的溶解性，通常需要选择合适的药物载体来增溶以充分发挥其药效。[0004]P-环糊精作为一种天然寡糖，具有外壁亲水内腔疏水，但其内部空腔的尺寸为6-7Α,不能包合阿霉素，而能与海藻酸酯的疏水链发生较强的包合作用。[0005]要缓解病痛通常需要药物快速释放，便于吸收而快速起效，有关药物释放速度的研究一直是本【技术领域】的热点课题。
[0006]本发明的目的是提供一种快速释放抗癌药物阿霉素的方法。 [0007]本发明技术方案是:将海藻酸十六酯包载的阿霉素胶束与环糊精水溶液混合，在混合体系温度为20~50°C、/7H值为4.5~10的条件下阿霉素得到快速释放。[0008]本发明由海藻酸十六酯经乳化相转移手段包载阿霉素形成胶束剂，将β -环糊精溶液添加到胶束剂中，即导致药物快速释放。该药物释放过程，无须改变环境的酸碱度、温度、电磁场等，β -环糊精与海藻酸酯发生疏水包合作用，而迅速将原包裹在海藻酸酯中的药物释放出来。该发明将为靶向给药提供一种安全、高效的快速释放的方法。
[0009]由于海藻酸十六酯包载的阿霉素纯品为固态物，为了快速地与P-环糊精水溶液混合，先将海藻酸十六酯包载的阿霉素与去离子水混合形成胶束液后，再与质量百分数为0.5%的卢-环糊精水溶液混合。
[0010]所述环糊精水溶液中环糊精和海藻酸十六酯包载的阿霉素胶束中海藻酸十六酯的质量比为10~20: I。当β-环糊精添加量低于该质量比时，阿霉素释放不完全；而β_环糊精添加量高于该质量比时，阿霉素释放量和释放速率没有明显提高。
[0011]所述海藻酸十六酯的接枝率为5~20%。海藻酸十六酯的接枝率太低，无法在水溶液中形成胶束；而接枝率过高，则在水中无法溶解。



[0012]图1为加入P-环糊精前后的海藻酸十六酯包载阿霉素溶液的对比照片。

[0014]海藻酸十六酯(Alg-C16),合成方法见文献【I】Ji Sheng Yang, Biao Jiang, WenHe, Yong Mei Xia.Hydrophobically modified alginate for emulsion of oil inwater.Carbohydrate Polymers, 2012,87 (2): 1503-1506。【2】Ji Sheng Yang, Wen He.Synthesis of lauryl grafted sodium alginate and optimization of the reactionconditions.1nternational Journal of Biological Macromolecules, 2012, 50:428-431。
[0015]实施例1
1、海藻酸十六酯包载阿霉素的制备:
称取10.0mg的盐酸阿霉素(D0X-HC1)置于西林瓶中，加入10.0mL的氯仿和三乙胺，三乙胺和盐酸阿霉素的投料摩尔比为3: 1，搅拌至完全溶解，作为油相。
[0016]称取50.0mg的接枝率为9.97%的海藻酸十六酯(Alg-C16)溶于15.0mL去离子水中，形成水相。
[0017]在快速搅拌下将上述油相和水相混合，形成水包油混合液，并搅拌6h，随后将混合溶液旋蒸以除去氯仿，再将其装进透析袋置于蒸馏水中进行透析，去除游离(即未被包裹)的DOX及杂质，并冷冻干燥可得到海藻酸十六酯包载阿霉素(DOX/ Alg -C16)的固态纯品。经光谱分析，海藻酸十六酯包载的阿霉素中阿霉素含量为6.8% (质量百分数)。
[0018]2、释放试验:
称取5.0mg上述DOX/ Alg -C16溶于10.0mL去离子水中，形成无色透明的胶束液，见图1中左侧照片，说明无游离的D`0X。
[0019]再向上述无色透明的胶束液中加入10.0 mL质量百分比为0.5%的卢-环糊精水溶液，水浴控制混合体系的温度在35°C，此时混合体系的pH值为7.5，缓慢搅拌，溶液出现浑浊，并呈现红色，见图1中右侧照片，可见体系中出现了游离态的D0X。经5min后光谱分析该混合体系，DOX已达完全释放。
[0020]以上试验说明:药物释放前为海藻酸十六酯包载阿霉素(DOX/ Alg - C16)的胶束溶液，因无游离的D0X，故无色透明；加入卢-⑶后，卢-⑶与Alg -C16发生疏水包合作用，而迅速将原包裹在海藻酸酯中的DOX释放出来，游离的DOX使溶液呈现红色。
[0021]实施例2
1、海藻酸十六酯包载阿霉素的制备:
称取10.0mg的盐酸阿霉素(D0X-HC1)置于西林瓶中，加入10.0mL的氯仿和三乙胺，三乙胺和盐酸阿霉素的投料摩尔比为3: 1，搅拌至完全溶解，作为油相。
[0022]称取50.0mg的接枝率为19.58%的海藻酸十六酯(Alg-C16)溶于15.0mL去离子水中，形成水相。
[0023]在快速搅拌下将上述油相与水相混合，形成水包油混合液并搅拌6h，随后将上述溶液旋蒸以除去氯仿，再将其装进透析袋置于蒸馏水中进行透析，并冷冻干燥可得到海藻酸十六酯包载的阿霉素(DOX/ Alg -C16)的固态纯品。经光谱分析，海藻酸十六酯包载的阿霉素中阿霉素含量为7.5% (质量百分数)。
[0024]2、释放试验:
称取5.0mg上述DOX/ Alg -C16溶于10.0mLpH值为4.5的50mM磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲溶液中，形成无色透明的胶束液。
[0025]以pH为4.5的磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲溶液配制质量百分数为0.5%的β -⑶水溶液，再取配制成的0.5%的β -⑶水溶液18.0 mL与胶束液混合，水浴控制混合体系的温度在50°C，缓慢搅拌，溶液由DOX/ Alg -C16的无色胶束液变为游离阿霉素(DOX)存在的红色溶液，Smin后经光谱分析阿霉素已达完全释放。
[0026]加入β -⑶水溶液前后的混合体系照片也如图1所示。
[0027]实施例3
1、海藻酸十六酯包载阿霉素的制备:
称取10.0mg的盐酸阿霉素(DOX-HCl)置于西林瓶中，加入10.0mL的氯仿和，三乙胺和盐酸阿霉素的投料摩尔比为3: 1，搅拌至完全溶解，作为油相。
[0028]称取50.0mg的接枝率为5.83%的海藻酸十六酯(Alg -C16)溶于15.0mL去离子水中，形成水相。
[0029]在快速搅拌下将上述油相和水相混合，形成水包油混合液并搅拌6h，随后将上述溶液旋蒸以除去氯仿，再将其装进透析袋置于蒸馏水中进行透析，并冷冻干燥可得到海藻酸十六酯包载阿霉素(DOX/ Alg -C16)的固态纯品。经光谱分析，海藻酸十六酯包载的阿霉素中阿霉素含量为5.8% (质量百分数)。
[0030]2、释放试验:
称取5.0mg上述D0X/SA-C16溶于10.0mLpH值为10.0的50mM甘氨酸-氢氧化钠缓冲溶液中，形成无色透明的胶束液。
[0031]以pH为10.0的甘氨酸-氢氧化钠缓冲溶液配制质量百分数为0.5%的β -⑶水溶液，再取配制成的0.5%的β -⑶水溶液12.0 mL与胶束液混合，控制混合体系的温度在200C，缓慢搅拌，溶液由DOX/ Alg -C16的无色胶束液变为游离阿霉素(DOX)存在的红色溶液，IOmin后经光谱分析阿霉素已达完全释放。
[0032]加入β -⑶水溶液前后的混合体系照片也如图1所示。