专利名称:使用抗微生物光动力疗法除去人类血液和血液制品中的微生物的新方法图I描绘了具有四个LED环单元的四重照射单元的顶视图。图2绘出了具有两个LED环的照射单元和具有接头的照射袋的实施方案。优选实施方案的详细说明血源性的、输血传播的和相关的疾病有许多。本发明提供了抗微生物光动力治疗方法和装置,用于有效消除、减少和/或失活在全血和血液制品中发现的病原微生物。全血内容物包括悬浮在被称为血浆的流体中的红血细胞(RBC)、白血细胞(WBC)和血小板。术语“微生物”、“病原体”、“微生物”、“微生物因子”或“微菌”在本发明中包括在人类和动物中均能引起严重感染的所有类型有害的或污染血液的细菌和它们的耐药种类、朊病毒、真菌、病毒(viri)、原生动物和血液寄生虫。术语“血液制品”和“血液组分”是指人类单供体新鲜冷冻血浆、浓缩血小板、单采血小板、红血细胞(RBC)、白细胞(WBC)、浓缩粒细胞、白蛋白、冷沉淀物、抗硫胺素III、抗血友病因子(AHF)、凝血因子(例如因子V、VII、VII、IX、X和XIII)和它们的组合。术语“生物流体”或“体液”是指全血或血液制品。抗生素耐药性的产生是处理细菌感染时面对的主要问题。尤其是多重耐药菌例如甲氧西林敏感型金黄色葡萄球菌(MSSA)和甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌(MRSA)是美国医院中最经常鉴定到的抗微生物耐药病原体。同时,表面上健康的供体捐献的血液中真正的威胁源于皮肤细菌,如表皮葡萄球菌或疮疱丙酸杆菌、疏螺旋体菌种和在献血过程中传播的其他病原菌。本发明提供了消除生物流体的这种细菌感染的方法和装置。输血传播的病毒是相对新发现的污染血液的病毒。病毒如疱疹病毒、人类免疫缺陷病毒(HIV)、丙型肝炎病毒(HCV)和乙型肝炎病毒(HBV)是在血液中发现的并且常常未能检出。其它较少知道的病毒包括T细胞亲淋巴性病毒、巨细胞病毒和细小病毒。被病毒感染的血液然后造成血源性疾病如AIDS、肝炎等的传播。使用本发明的方法和装置,使得有可能消除生物流体例如血液和血液制品中像这样未被检出的病毒、耐药菌和其它微生物。本发明的目的还在于消除传染性血源性原生动物寄生虫如克氏锥虫(Trypanosoma cruzi),其引起查加斯(Chagas)病;引起非洲昏睡病的锥虫;引起痕疾的痕原虫,尤其是造成恶性和日益耐药的痕疾类型的恶性痕原虫(Plasmodium falciparum)。除了这种威胁之外,还有尚未鉴别的其它未知微生物。总的目的是破坏健康供体捐献的血液中不容易检出的危险。光敏剂和它们的衍生物被有效用作抗微生物剂。本文发现的优选光敏剂是番红0,其有两个互变异构形式并可以在532nm处被光活化。番红0表现出高度抗微生物活性。发现番红0即使在复杂的生物流体如血液、血清等的存在下,仍然非常有效。虽然其它光敏剂也可用作抗微生物剂,但在本发明中,优选的光敏剂选自吩噻嗪、叶啉、二氢卟酚及其他。 在一个实施方案中,提供了抗微生物光动力疗法的治疗装置,其包括照射单元、无菌透光容器袋和持袋器、以及光敏剂-吸收剂单元。本发明的照射单元包括光源,所述光源选自但因此不限于激光器、二极管激光器系统、LED、高功率LED、灯、白光、或具有被选定光敏剂吸收的一种或多种波长的其它光源。所述光源在适当波长包括电磁光谱(EMS)的可见光、近紫外线(UV)和/或近红外线(NIR)区下运行。照射单元利用光源引起单线态氧的产生,同时执行光动力疗法。优选,所述光源包括LED灯。照射单元还包括冷却元件和作为持袋器的盒子。另外,照射单元包含滑动、旋转或起类似作用的构件,确保血液在容器袋内充分混合并暴露于来自照射单元的光下。它还被良好配备以在过程将无菌透光容器袋保持在位。准备放入照射单元中的容纳血液的容器袋是透光的,允许光穿透以活化光敏剂。因此,在执行照射之前,包含血液的容器袋被恰当覆盖以避免光敏剂过早活化。优选,无菌透光容器袋联合串联或并联管的帮助,向所处理的生物流体提供适当照射剂量。光敏剂-吸收剂单元用来除去存在于所处理的生物流体中过量、未反应或未活化的光敏剂。在一个实施方案中,光敏剂-吸收剂单元包含填充了多孔珠子和海绵的外壳,所述多孔珠子和海绵从处理的血液和血液制品中提取和/或吸收过量的或未活化的光敏剂。处理和清洁过的血液和血液制品可以储存,供进一步应用。在另一种实施方案中,用于从血液和血液制品中消除、根除和/或失活病原体而不会不利地影响它们生物活性的必要元素的抗微生物光动力治疗(TOT)方法包括以下步骤1)收集血液;2)如有必要,将全血分离成血液组分;3)将光敏剂与包含血液或血液组分的处理流体混合;4)照射所述处理流体;5)除去过量和/或未活化的光敏剂和残留片段;和6)以无菌方式收集和存储经处理和清洁的血液或血液组分,直到进一步应用。为了防止凝血,向收集袋添加抗凝血物质如肝素或柠檬酸盐。优选,从健康供体收集血液和血液组分。可以使用离心来促进分离步骤。分离的血液组分然后被放在无菌袋中并储存,准备后续的抗微生物PDT处理。优选的光敏剂是BLC 2003 (番红-0)。步骤3)之后或期间存在停留期,以确保光敏剂与待处理的血液或血液组分的充分混合。另外,处理装置提供的滑动、旋转或类似的运动允许进一步混合光敏剂和血液或血液组分,并彻底照射生物流体和/或它的组分。用处理装置的光源针对所采用的选定光敏剂编码的波长执行照射步骤。当使用的光敏剂是BLC 2003时,光源优选在532nm下运行/包含。将活性的无微生物的处理流体通过光敏剂-吸收剂单元,所述单元也可以吸附或吸收残留片段例如灭活的微生物等,从而可以完成除去过量和/或未活化的光敏剂和残留片段的步骤。经处理的血液或血液组分可以调节所有必要的参数例如温度、密度组成及其他后,被重新混合并重新输入人类或动物液流。本发明的抗微生物PDT方法不会不利地影响经处理的血液或血液制品的生物活性的必要元素,也没有显示出它们在处理之后功能性能力受损。本发明由以下实施例进一步说明,但不限于此。实施例I 从血液和血液制品中消除微生物的一般处理过程消除、根除和/或失活血液和血液制品中病原体的一般步骤包括步骤I :包括从健康供体收集血液。向收集袋添加抗凝剂如肝素或柠檬酸盐以防止凝血。 步骤2 :分离血液组分。血液组分包括红血细胞、血浆、血小板和(冷沉淀的)抗血友病因子(AHF)。在处理血液防止凝血并容许置于容器中的情况下,重量超过其它组分的红血细胞将沉降到底部;血浆将留在顶部;白血细胞和血小板将在血浆和红血细胞之间保持悬浮。离心可以用于促进这种分离过程。然后移出富血小板的血浆并放置在无菌袋子中,可用于制备血小板和血浆或冷沉淀AHF。为了获得血小板,将富血小板的血浆离心,引起血小板沉降到底部。然后分离血浆和血小板并准备用于输血。血浆也可以与来自其它供体的血浆合并和进一步处理、或分级,以提供纯化的血浆蛋白例如白蛋白、静脉内用免疫球蛋白(IVIG)和凝血因子。步骤3 :包含血液和血液制品的无菌透光容器袋被注入光敏剂,优选BLC 2003 (番红-0)。步骤4 :确保光敏剂与血液和血液制品充分混合,然后是短的停留期。步骤5 :将装有与光敏剂混合的血液或血液制品的无菌透光容器袋放置在具有持袋器的处理装置中,持袋器可以通过滑动运动移动。一旦袋子固定于持袋器,就将持袋器设置成滑动运动。这确保了在无菌透光容器袋内彻底辐照血液和它的组分。步骤6 :在针对选定的光敏剂编码的波长(当使用BLC 2003时是532nm)下辐照。步骤7 :然后将无微生物的流体经过光敏剂-吸收剂。该吸收剂单元除去存在于经处理的生物流体中的过量和未活化的光敏剂。步骤8 :收集和储存经清洁和处理的血液/血液组分,直到进一步应用。这样处理的血液既没有显示凝血因子活性减少,也没有影响血浆的功能性能力。本发明可以用于在血库、医院或实验室灭活病原体。实施例I :处理血液和血液制品的处理装置和抗微牛物PDT方法图I描绘了在矩形立方体形状的照射单元四边带有四个LED环单元101的四重照射单元100。所述四个LED单元位于中心的冷却元件103上,并具有相应的盒子105容纳无菌透光容器袋。所述无菌透光容器袋另有管子,为了获得流经所有四个袋子和四重照射LED单元的流。无菌透光容器袋的每个流入口位于底部。图2显示了四重照射单元100的每侧上每个照射单元与相应的无菌透光容器袋如何排列。图2显示了照射单元200每侧内的LED单元以及盒子与准备被照射的无菌透光容器袋的布置。每个LED单元具有被布置成两个同心环201的高功率LED阵列(当使用优选的光敏剂时,具有总共18个LED单元Luxeon 环,LED波长为530nm)。LED可以被布置成一个或多个环和许多不同的方式。照射单元具有相应的盒子,其中放置具有管接头205的袋子203。箭头指出细菌悬液的流向。抽取健康供体的被感染的全血并收集在无菌柠檬酸盐或肝素无菌透光容器袋中。本发明中无菌透光容器袋是被专门设计用于抗微生物光动力治疗处理期间使用的照射单元的。通过现有技术中和本领域专业人员已经知道的方法分离这样收集的血液的各个组分,或者全血本身就可以接受本处理方法。光敏剂被添加到透光无菌袋中。所添加的光敏剂利用定轨振荡器与血液和/或血液组分混合,以确保微生物完全暴露于光敏剂下。现在将这样准备的血液袋放入设在照射单元内的持袋器中。一旦所述袋子被固定在持袋器中,就将其设置为滑动运动。接通照射单元并且滑动运动中的无菌透光容器袋暴露于与所添加的光敏剂的吸收光谱匹配的特定波长下,暴露时间通常长得足以消除细菌和寄生虫粒子。光敏剂在微生物细胞上和内蓄积,所述细胞随后通过光细胞毒作用被破坏。使处理的流体通过光敏剂-吸收剂单元,该单元由装有微小的多孔珠子和较大的海绵的塑料壳构成。这些珠子/海绵从处理的流体中提取/吸收过量 或未活化的光敏剂。经处理的血液中过量或未反应的光敏剂最后被除去。清洁的血液和血液制品可以被储存供进一步应用。这样处理后的血液及其制品它们的生物功能仍然完整和它们的治疗作用没有降低。本发明中使用的所述方法和装置有效用于消除微生物病原体。这种方法可以用于消除生物流体中的病原体,所述生物流体包括但不限于全血、血液制品和血液组分;术语血液组分进一步包括个别或组合的人类单供体新鲜冷冻血浆、浓缩血小板、红血细胞(RBC)、凝血因子(例如因子V、VII、VII、IX、X和XIII)。实施例3 从捐献的血液中净化和消除未被检出的病毒输血在一些情况中、例如创伤导致的大量失血中可以挽救生命,或者可用于补充手术期间损失的血液。输血也可以用来治疗血液病引起的严重贫血或血小板减少症。患有血友病或镰刀细胞病的人可能需要经常输血。早期输血使用全血,而现代的医疗实践只使用血液组分。捐献的血液在它被收集后通常进行处理,使他适合用于特定的患者群体。在许多传染病例如HIV、梅毒、肝炎等中,未被检出的微生物可以通过输血从看起来健康的献血者传到接受者。本发明帮助消除未被检出的或不容易检出的病毒,并提供没有病原微生物的生物流体供安全使用。从患者收集的全血与很少量的无毒光敏剂、优选番红0混合。使用定轨振荡器将含有全血和番红0的无菌透光容器袋彻底混合,并放到照射单元中的持袋器中,设置成滑动运动。照射单元装备有波长532nm的光源。使用的光源可以包括激光或高功率LED光。根据选定的光敏剂的吸收特性,照射单元可使用发射可见区、近UV和/或近IR的光的光源。因此含有经处理的血液的袋子应该储存在空调室中直到最终用于血液透析/或用于其它目的。这种通常延长的时间应该足以消除病毒粒子。使用由装有微小的多孔珠子和较大的海绵的塑性壳构成的光敏剂-吸收剂单元/机构,除去经处理的血液和血液制品过量或未活化的光敏剂。这些珠子从处理后的生物流体中提取/吸收过量或未活化的光敏剂分子。实施例4 从捐献的血液中净化和消除寄牛虫一般认为,健康人的血液也可能被在储存条件下生长的病原微生物污染,特别是在37°C储存的浓缩血小板中。血液具有营养物、糖、氧,提供了供微生物生长的完美环境和温度。如果免疫系统健康的话,寄生虫被遏制。最常见于血液中的原生动物寄生虫包括体内寄生虫,例如疟原虫和锥虫,它们在宿主血液中具有感染阶段。通常知道的原生动物是引起疟疾的疟原虫、引起查加斯病或美国人昏睡病的另一种原生动物克氏锥虫、和引起刚果锥虫病的布氏锥虫(Trypanosoma brucei)。发现这些寄生虫在供血中数量越来越多。所述寄生虫进入脂肪和肌细胞并开始繁衍,最终释放到血液中并由此分布到整个身体。他们最终变得在血液中相当少,但是在器官中持续生存和繁衍。传染性的活寄生虫在血液和器官中持续无止境地感染。寄生虫可以在再次被虫咬时传出,这时寄生虫与虫的食物一起摄入,并随后被传到下一个被它咬的人中。寄生虫还可以通过输血或器官捐赠来传播。本发明有效用于从血液和血液制品中消除这样的寄生虫,使它们安全地供医院和血库进一步应用。从健康供体收集的血液与番红0 —起输注,番红0是可以靶向并在照射之后灭活血液流体中的寄生虫的光敏剂。包含光敏剂和血液的无菌透光容器袋现在放入照射舱中。持袋器设成滑动运动,以确保将具有血液和光敏剂的袋子彻底暴露于光下。血液和它的组分没有受到损害。除去血液中未反应的和任何过量的光敏剂,现在血液可以安全地供进一步用于患者。 可以使用本发明的处理方法和装置,如实施例I的一般程序所述个别处理全血或分离的血液组分。在参考附图描述了本发明的优选实施方案的情况下,要了解,本发明不局限于精确的实施方案,本技术领域的技术人员可以实施改变和修改而不背离权利要求书中限定的本发明的范围。本发明提供了创造性的处理方法和装置,用于减弱/灭活在生物流体例如包括人类单供体新鲜冷冻血浆、浓缩血小板、红血细胞(RBC)、凝血因子(例如因子V、VII、VII、IX、X和XIII)在内的血液和血液制品中发现的病原微生物。抗微生物光动力疗法用来消除血液和血液制品中多种(耐药)细菌、病毒、真菌、寄生虫和其它未被检出或不容易检出的病原微生物或粒子,但不影响血液和血液制品的生物学性质。所述耐药菌难以被消除。这在金黄色葡萄球菌和相关菌株、表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis)或疮疱丙酸杆菌(Propionibacterium acnes)、疏螺旋体(Borrelia)和在皮肤上发现的其它细菌情况下尤其如此。本发明的其它实施方案消除了污染血液和血液制品的未被检出或不容易检出的病毒,它们造成肝炎、获得性免疫缺陷综合征(AIDS)和其它血源性病毒疾病的传播。人类免疫缺陷(HIV)、乙型肝炎和丙型肝炎病毒近来已经成为主要的血源性传染。通过血液和衍生制品传播的许多寄生虫也被这些新颖的方法和装置消除。
使用抗微生物光动力疗法除去人类血液和血液制品中的微生物的新方法
- 专利详情
- 全文pdf
- 权力要求
- 说明书
- 法律状态
查看更多专利详情
下载专利文献
下载专利
同类推荐
-
伊里斯·米科诺斯, 贝雷斯·约瑟夫李峰, 王延红D·M·安德森威尔逊·卡帕罗斯·万德雷K·布朗特
您可能感兴趣的专利
-
A·B·沃尔杜于春光G.沃尔凯尔特黄赫鹰黄赫鹰
专利相关信息
-
张海荣张凯, 朱振旗张凯, 朱振旗张凯, 朱振旗周赞虎, 方成俊韩小梅, 马延生