人源化抗cd19抗体制剂制作方法_A·莎赫,M·莎玛专利（人源化,cd,制剂）-早鸽网

人源化抗cd19抗体制剂制作方法

专利名称

人源化抗cd19抗体制剂制作方法
发明者

A·莎赫, M·莎玛
公开日

2012年4月11日
申请日期

2010年3月8日
优先权日

2009年3月6日
申请人

医学免疫有限责任公司
文档编号

A61K39/395GK102413839SQ201080019731
关键字

人源化 cd 制剂抗体
权利要求

1.一种无菌、稳定含水制剂，其包含嵌合、人源化或人抗CD 19抗体2.权利要求1的制剂，其中所述抗体未曾经受冻干3.权利要求1的制剂，其中所述抗体来自选自IgA、IgE、IgM、IgD、IgY和IgG的免疫球蛋白类型4.权利要求1的制剂，其中所述抗体是IgGl、IgG2、IgG3或IgG4人同种型5.权利要求1的制剂，其中所述抗体包含具有N-糖苷-连接的复合糖链的Fc区，其中岩藻糖不结合于所述糖链还原端中的N-乙酰氨基葡萄糖6.权利要求1-5任一项的制剂，其中所述抗体包括包含SEQIDNO 104的序列的重链可变区7.权利要求1-5任一项的制剂，其中所述抗体包括包含SEQIDN0111的序列的轻链的可变区8.权利要求1-5任一项的制剂，其中所述抗体包括包含SEQIDNO 104的序列的重链可变区和包含SEQ ID NO 111的序列的轻链可变区9.权利要求1-5任一项的制剂，其中所述抗体包括包含SEQIDNO 104的序列的重链可变区、包含SEQ ID NO 111的序列的轻链可变区和具有N-糖苷-连接的复合糖链的Fc 区，其中岩藻糖不结合于所述糖链还原端中的N-乙酰氨基葡萄糖10.权利要求1-9任一项的制剂，其中所述抗体的浓度为至少约5mg/ml、至少约IOmg/ ml、至少约15mg/ml、至少约20mg/ml、至少约50mg/ml、至少约100mg/ml、至少约120mg/ml、至少约150mg/ml、至少约160mg/ml、至少约180mg/ml、至少约200mg/ml、至少约250mg/ml 或至少约300mg/ml11.权利要求1-9任一项的制剂，其中所述抗体的浓度为至少约5mg/ml12.权利要求1-9任一项的制剂，其中所述抗体的浓度为至少约10mg/ml13.权利要求1-9任一项的制剂，其中所述抗体的浓度为至少约15mg/ml14.权利要求1-9任一项的制剂，其中所述抗体的浓度为至少约50mg/ml15.权利要求1-9任一项的制剂，其中所述抗体的浓度为至少约100mg/ml16.权利要求1-9任一项的制剂，其中所述抗体的浓度为约5mg/ml至约100mg/ml17.权利要求1-9任一项的制剂，其中所述抗体的浓度为约5mg/ml至约25mg/ml18.权利要求1-17任一项的制剂，其中所述制剂还包含至少约一种缓冲组分19.权利要求1-18任一项的制剂，其中所述制剂还包含至少约一种赋形剂20.权利要求18或19的制剂，其中所述缓冲组分选自组氨酸、柠檬酸盐、磷酸盐、甘氨酸和乙酸盐21.权利要求18或19的制剂，其中所述缓冲组分是组氨酸22.权利要求21的制剂，其中所述组氨酸为约InM至约200nM的浓度23.权利要求21的制剂，其中所述组氨酸为约InM至约50nM的浓度24.权利要求21的制剂，其中所述组氨酸为约5nM至约20nM的浓度25.权利要求21的制剂，其中所述组氨酸为约ΙΟηΜ、约15nM或约20nM的浓度26.权利要求19的制剂，其中所述赋形剂为糖类27.权利要求沈的制剂，其中所述糖类为二糖28.权利要求27的制剂，其中所述二糖为海藻糖或蔗糖29.权利要求27的制剂，其中所述二糖为海藻糖30.权利要求四的制剂，其中所述海藻糖为约至约40%的浓度31.权利要求四的制剂，其中所述海藻糖为约2%至约20%的浓度32.权利要求四的制剂，其中所述海藻糖为约2%至约10%的浓度33.权利要求四的制剂，其中所述海藻糖为约2%、约4%或约8%的浓度34.权利要求19的制剂，其中所述赋形剂为盐35.权利要求34的制剂，其中所述盐为氯化钠36.权利要求35的制剂，其中所述氯化钠为约50mM至约200mM的浓度37.权利要求35的制剂，其中所述氯化钠为约70mM、约75mM、约80mM、约100mM、约 120mM或约150mM的浓度38.权利要求19的制剂，其中所述赋形剂为表面活性剂39.权利要求38的制剂，其中所述表面活性剂为聚山梨醇酯40.权利要求39的制剂，其中所述聚山梨醇酯为聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯8041.权利要求39的制剂，其中所述聚山梨醇酯为聚山梨醇酯8042.权利要求41的制剂，其中所述聚山梨醇酯80为约0.001%至约2%的浓度43.权利要求41的制剂，其中所述聚山梨醇酯80为约0.01%、约0. 02%、约0. 04%或约0. 08%的浓度44.权利要求1-43任一项的制剂，其中所述制剂具有约5.5至约6. 5的pH45.权利要求1-43任一项的制剂，其中所述制剂具有约6.0的pH46.权利要求1-45任一项的制剂，其中所述制剂是等渗的47.权利要求1-46任一项的制剂，其中所述制剂经在40°C储存至少约4周后是稳定的48.权利要求1-46任一项的制剂，其中所述制剂经在5°C储存至少约3个月后是稳定的49.权利要求1-46任一项的制剂，其中所述制剂经在5°C储存至少约12个月后是稳定的50.权利要求1-46任一项的制剂，其中所述抗体在所述制剂在40°C储存至少约4周的期间损失至多20%的其⑶19结合活性51.权利要求1-46任一项的制剂，其中所述抗体在所述制剂在5°C储存至少约3个月的期间损失至多20%的其⑶19结合活性52.权利要求1-46任一项的制剂，其中所述抗体在所述制剂在5°C储存至少约12个月的期间损失至多20%的其⑶19结合活性53.权利要求1-46任一项的制剂，其中所述抗体在所述制剂在40°C储存至少约4周的期间损失至多10%的其⑶19结合活性54.权利要求1-46任一项的制剂，其中所述抗体在所述制剂在5°C储存至少约3个月的期间损失至多10%的其⑶19结合活性55.权利要求1-46任一项的制剂，其中所述抗体在所述制剂在5°C储存至少约12个月的期间损失至多10%的其⑶19结合活性56.权利要求1-46任一项的制剂，其中所述抗体在所述制剂在40°C储存至少约4周的期间损失至多5%的其⑶19结合活性57.权利要求1-46任一项的制剂，其中所述抗体在所述制剂在5°C储存至少约3个月的期间损失至多5%的其⑶19结合活性58.权利要求1-46任一项的制剂，其中所述抗体在所述制剂在5°C储存至少约12个月的期间损失至多5%的其⑶19结合活性59.权利要求1-46任一项的制剂，其中所述抗体对聚集或片段化敏感60.权利要求1-46任一项的制剂，其中经在约40°C储存至少约4周后，通过HPSEC确定少于约2%的所述抗体形成聚集体61.权利要求1-46任一项的制剂，其中经在约5°C储存至少约3个月后，通过HPSEC确定少于约2%的所述抗体形成聚集体62.权利要求1-46任一项的制剂，其中经在约5°C储存至少约12个月后，通过HPSEC 确定少于约2%的所述抗体形成聚集体63.权利要求1-46任一项的制剂，其中经在约40°C储存至少约4周后，通过SEC确定少于约5%的所述抗体被片段化64.权利要求1-46任一项的制剂，其中经在约5°C储存至少约3个月后，通过SEC确定少于约5%的所述抗体被片段化65.权利要求1-46任一项的制剂，其中经在约5°C储存至少约12个月后，通过SEC确定少于约5%的所述抗体被片段化66.权利要求1-65任一项的制剂，其中所述制剂是注射制剂67.权利要求66的制剂，其中所述制剂适用于静脉内、皮下或肌内施用68.权利要求67的制剂，其中所述制剂适用于皮下施用，且所述抗体或抗体片段浓度是约 5mg/ml 至约 60mg/ml69.权利要求67的制剂，其中所述制剂适用于皮下施用，且所述抗体或抗体片段浓度是约 5mg/ml 至约 250mg/ml70.权利要求1-65任一项的制剂，其中所述制剂适用于适于气溶胶施用71.一种适用于向人胃肠外施用的药物单元剂型，其包含在适当容器中的权利要求 1-65任一项所述的抗体制剂72.权利要求71的药物单元剂型，其中所述抗体制剂被静脉内、皮下或肌内施用73.一种适用于向人气溶胶施用的药物单元剂型，其包含在适当容器中的权利要求 1-65任一项所述的抗体制剂74.权利要求73的药物单元剂型，其中所述抗体制剂被鼻内施用75.—种密封容器，其包含权利要求1-74任一项所述的制剂76.—种药盒，其包含权利要求1-74任一项所述的制剂77.一种治疗人的B细胞疾病或病症的方法，所述方法包括向需要其的人施用治疗有效量的权利要求1-74任一项所述的制剂78.权利要求77的方法，其中所述B细胞疾病或病症选自B细胞恶性肿瘤、自身免疫性疾病、自身免疫性病症、人移植患者的体液排斥、移植物对宿主疾病(GVHD)和人移植物接受者的移植后淋巴增殖性病症79.权利要求77的方法，其中所述B细胞疾病或病症是B细胞恶性肿瘤80.权利要求77的方法，其中所述B细胞疾病或病症是硬皮病81.—种消耗人患者中的表达CD 19的B细胞的方法，包括向需要其的人施用治疗有效量的权利要求1-74任一项所述的制剂82.权利要求81的方法，其中所述消耗持续的时间段选自至少1周、至少2周、至少 3周、至少4周、至少5周、至少6周、至少7周、至少8周、至少3个月、至少4个月、至少5 个月、至少6个月、至少7个月、至少8个月、至少9个月、至少10个月、至少11个月和至少 12个月83.权利要求81的方法，其中所述消耗使B细胞水平下降至少约20%、至少约30%、至少约40%、至少约50%、至少约60%、至少约70%、至少约80%、至少约90%、至少约95% 或约100%84.权利要求81的方法，其中所述表达⑶19的B细胞是循环B细胞、血液B细胞、脾 B细胞、边缘区B细胞、滤泡B细胞、腹膜B细胞、骨髓B细胞或癌干细胞85.一种无菌、稳定含水制剂，其包含嵌合、人源化或人抗⑶19抗体，且还包含组氨酸、氯化钠和海藻糖，其中所述抗体包括包含SEQID NO 104的序列的重链可变区、包含SEQ ID NO=Ill的序列的轻链可变区和具有N-糖苷-连接的复合糖链的Fc区，其中岩藻糖不结合于所述糖链还原端中的N-乙酰氨基葡萄糖86.权利要求85的方法，其中所述制剂包含约5mg/ml至约50mg/ml的所述抗⑶19抗体、约ImM至约50mM组氨酸和约至约10%海藻糖，且其中所述制剂的pH为约5至约787.权利要求85的方法，其中所述制剂包含约5mg/ml至约20mg/ml的所述抗⑶19抗体、约5mM至约20mM组氨酸和约2%至约8%海藻糖，且其中所述制剂的pH为约5. 5至约 6. 5o88.权利要求85的方法，其中所述制剂包含约10mg/ml的所述抗⑶19抗体、约IOmM 组氨酸和约4%海藻糖，且其中所述制剂的pH为约689.权利要求85-88任一项的制剂，其中所述制剂是等渗的90.权利要求85-88任一项的制剂，其中所述制剂经在40°C储存至少约4周后是稳定的91.权利要求85-88任一项的制剂，其中所述制剂经在5°C储存至少约3个月后是稳定的92.权利要求85-88任一项的制剂，其中所述制剂经在5°C储存至少约12个月后是稳定的93.权利要求85-88任一项的制剂，其中所述抗体在所述制剂在40°C储存至少约4周的期间损失至多20%的其⑶19结合活性94.权利要求85-88任一项的制剂，其中所述抗体在所述制剂在5°C储存至少约3个月的期间损失至多20%的其⑶19结合活性95.权利要求85-88任一项的制剂，其中所述抗体在所述制剂在5°C储存至少约12个月的期间损失至多20%的其⑶19结合活性96.权利要求85-88任一项的制剂，其中所述抗体在所述制剂在40°C储存至少约4周的期间损失至多10%的其⑶19结合活性97.权利要求85-88任一项的制剂，其中所述抗体在所述制剂在5°C储存至少约3个月的期间损失至多10%的其⑶19结合活性98.权利要求85-88任一项的制剂，其中所述抗体在所述制剂在5°C储存至少约12个月的期间损失至多10%的其⑶19结合活性99.权利要求85-88任一项的制剂，其中所述抗体在所述制剂在40°C储存至少约4周的期间损失至多5%的其⑶19结合活性100.权利要求85-88任一项的制剂，其中所述抗体在所述制剂在5°C储存至少约3个月的期间损失至多5%的其⑶19结合活性101.权利要求85-88任一项的制剂，其中所述抗体在所述制剂在5°C储存至少约12个月的期间损失至多5%的其⑶19结合活性102.权利要求85-88任一项的制剂，其中所述抗体对聚集或片段化敏感103.权利要求85-88任一项的制剂，其中经在约40°C储存至少约4周后，通过HPSEC 确定少于约2%的所述抗体形成聚集体104.权利要求85-88任一项的制剂，其中经在约5°C储存至少约3个月后，通过HPSEC 确定少于约2%的所述抗体形成聚集体105.权利要求85-88任一项的制剂，其中经在约5°C储存至少约12个月后，通过HPSEC 确定少于约2%的所述抗体形成聚集体106.权利要求85-88任一项的制剂，其中经在约40°C储存至少约4周后，通过SEC确定少于约5%的所述抗体被片段化107.权利要求85-88任一项的制剂，其中经在约5°C储存至少约3个月后，通过SEC确定少于约5%的所述抗体被片段化108.权利要求85-88任一项的制剂，其中经在约5°C储存至少约12个月后，通过SEC 确定少于约5%的所述抗体被片段化109.权利要求85-88任一项的制剂，其中所述制剂经在约5°C储存至少约3个月后，通过肉眼检查确定是澄清的和无色的110.权利要求85-88任一项的制剂，其中所述制剂经在约5°C储存至少约12个月后，通过肉眼检查确定是澄清的和无色的111.权利要求85-110任一项的制剂，其中所述制剂是注射制剂112.权利要求111的制剂，其中所述制剂适用于静脉内、皮下或肌内施用113.权利要求112的制剂，其中所述制剂适用于静脉内施用114.权利要求112的制剂，其中所述制剂适用于皮下施用115.权利要求85-110任一项的制剂，其中所述制剂适用于气溶胶施用116.一种用于制备根据权利要求85-110任一项的制剂的方法，其包括将抗-人CD 19抗体溶液浓缩至约5mg/ml至约50mg/ml ；和用包含组氨酸的溶液渗滤所述浓缩的抗体117.权利要求116的方法，其还包括将所述浓缩的抗体溶液与包含至少约一种赋形剂的至少约一种溶液混合118.—种适用于向人胃肠外施用的药物单元剂型，其包含在适当容器中的权利要求 85-115任一项所述的抗体制剂119.权利要求118的药物单元剂型，其中所述抗体制剂被静脉内、皮下或肌内施用120.一种适用于向人气溶胶施用的药物单元剂型，其包含在适当容器中的权利要求 85-115任一项所述的抗体制剂121.—种密封容器，其包含权利要求85-115任一项所述的制剂122.—种药盒，其包含权利要求85-115任一项所述的制剂123.—种治疗人的B细胞疾病或病症的方法，所述方法包括向需要其的人施用治疗有效量的权利要求85-115任一项所述的制剂124.权利要求123的方法，其中所述B细胞疾病或病症选自B细胞恶性肿瘤、自身免疫性疾病、自身免疫性病症、人移植患者的体液排斥、移植物对宿主疾病(GVHD)和人移植物接受者的移植后淋巴增殖性病症125.权利要求123的方法，其中所述B细胞疾病或病症是B细胞恶性肿瘤126.权利要求123的方法，其中所述B细胞疾病或病症是硬皮病127.—种消耗人患者中的表达CD 19的B细胞的方法，包括向需要其的人施用治疗有效量的权利要求85-115任一项所述的制剂128.权利要求127的方法，其中所述消耗持续的时间段选自至少1周、至少2周、至少3周、至少4周、至少5周、至少6周、至少7周、至少8周、至少3个月、至少4个月、至少 5个月、至少6个月、至少7个月、至少8个月、至少9个月、至少10个月、至少11个月和至少12个月129.权利要求127的方法，其中所述消耗使B细胞水平下降至少约20%、至少约30%、至少约40%、至少约50%、至少约60%、至少约70%、至少约80%、至少约90%、至少约 95% 或约 100%130.权利要求127的方法，其中所述表达⑶19的B细胞是循环B细胞、血液B细胞、脾B细胞、边缘区B细胞、滤泡B细胞、腹膜B细胞、骨髓B细胞或癌干细胞131.一种无菌、稳定含水制剂，其包含10mg/ml人源化抗⑶19抗体、约IOmM组氨酸和约4%海藻糖，其中所述制剂的pH为约6，且其中所述人源化抗⑶19抗体包含具有SEQ ID NO 104的序列的重链可变区、具有SEQ ID NO 111的序列的轻链可变区和具有N-糖苷-连接的复合糖链的Fc区，其中岩藻糖不结合于所述糖链还原端中的N-乙酰氨基葡萄糖132.权利要求131的制剂，其中所述制剂是等渗的133.权利要求131-132任一项的制剂，其中所述制剂经在40°C储存至少约4周后是稳定的134.权利要求131-133任一项的制剂，其中所述制剂经在5°C储存至少约3个月后是稳定的135.权利要求131-134任一项的制剂，其中所述制剂经在5°C储存至少约12个月后是稳定的136.权利要求131-135任一项的制剂，其中所述抗体在所述制剂在40°C储存至少约4 周的期间损失至多20%的其⑶19结合活性137.权利要求131-136任一项的制剂，其中所述抗体在所述制剂在5°C储存至少约3 个月的期间损失至多20%的其⑶19结合活性138.权利要求131-137任一项的制剂，其中所述抗体在所述制剂在5°C储存至少约12 个月的期间损失至多20%的其⑶19结合活性139.权利要求131-138任一项的制剂，其中所述抗体在所述制剂在40°C储存至少约4 周的期间损失至多10%的其⑶19结合活性140.权利要求131-139任一项的制剂，其中所述抗体在所述制剂在5°C储存至少约3 个月的期间损失至多10%的其⑶19结合活性141.权利要求131-140任一项的制剂，其中所述抗体在所述制剂在5°C储存至少约12 个月的期间损失至多10%的其⑶19结合活性142.权利要求131-141任一项的制剂，其中所述抗体在所述制剂在40°C储存至少约4 周的期间损失至多5%的其⑶19结合活性143.权利要求131-142任一项的制剂，其中所述抗体在所述制剂在5°C储存至少约3 个月的期间损失至多5%的其⑶19结合活性144.权利要求131-143任一项的制剂其中所述抗体在所述制剂在5°C储存至少约12 个月的期间损失至多5%的其⑶19结合活性145.权利要求131-144任一项的制剂，其中所述抗体对聚集或片段化敏感146.权利要求131-145任一项的制剂，其中经在约40°C储存至少约4周后，通过HPSEC 确定少于约2%的所述抗体形成聚集体147.权利要求131-146任一项的制剂，其中经在约5°C储存至少约3个月后，通过 HPSEC确定少于约2%的所述抗体形成聚集体148.权利要求131-147任一项的制剂，其中经在约5°C储存至少约12个月后，通过 HPSEC确定少于约2%的所述抗体形成聚集体149.权利要求131-148任一项的制剂，其中经在约40°C储存至少约4周后，通过SEC 确定少于约5%的所述抗体被片段化150.权利要求131-149任一项的制剂，其中经在约5°C储存至少约3个月后，通过SEC 确定少于约5%的所述抗体被片段化151.权利要求131-150任一项的制剂，其中经在约5°C储存至少约12个月后，通过SEC 确定少于约5%的所述抗体被片段化152.权利要求131-151任一项的制剂，其中所述制剂经在约5°C储存至少3个月后，通过肉眼检查确定是澄清的和无色的153.权利要求131-152任一项的制剂，其中所述制剂经在约5°C储存至少12个月后，通过肉眼检查确定是澄清的和无色的154.权利要求131-153任一项的制剂，其中所述制剂是注射制剂155.权利要求154的制剂，其中所述制剂适用于静脉内、皮下或肌内施用156.权利要求154的制剂，其中所述制剂适用于静脉内施用157.权利要求155的制剂，其中所述制剂适用于皮下施用.158.权利要求131的制剂，其中所述制剂适用于气溶胶施用159.—种适用于向人胃肠外施用的药物单元剂型，其包含在适当容器中的权利要求 131所述的抗体制剂160.权利要求159的药物单元剂型，其中所述抗体制剂被静脉内、皮下或肌内施用161.一种适用于向人气溶胶施用的药物单元剂型，其包含在适当容器中的权利要求 131所述的抗体制剂162.一种密封容器，其包含权利要求131所述的制剂163.—种药盒，其包含权利要求131所述的制剂164.一种治疗人的B细胞疾病或病症的方法，所述方法包括向需要其的人施用治疗有效量的权利要求131所述的制剂165.权利要求164的方法，其中所述B细胞疾病或病症选自B细胞恶性肿瘤、自身免疫性疾病、自身免疫性病症、人移植患者的体液排斥、移植物对宿主疾病(GVHD)和人移植物接受者的移植后淋巴增殖性病症166.权利要求165的方法，其中所述B细胞疾病或病症是B细胞恶性肿瘤167.权利要求164的方法，其中所述B细胞疾病或病症是硬皮病168.一种消耗人患者中的表达CD 19的B细胞的方法，包括向需要其的人施用治疗有效量的权利要求131所述的制剂169.权利要求168的方法，其中所述消耗持续的时间段选自至少1周、至少2周、至少3周、至少4周、至少5周、至少6周、至少7周、至少8周、至少3个月、至少4个月、至少 5个月、至少6个月、至少7个月、至少8个月、至少9个月、至少10个月、至少11个月或至少12个月170.权利要求168的方法，其中所述消耗使B细胞水平下降至少约20%、至少约30%、至少约40%、至少约50%、至少约60%、至少约70%、至少约80%、至少约90%、至少约 95% 或约 100%171.权利要求168的方法，其中所述表达⑶19的B细胞是循环B细胞、血液B细胞、脾B细胞、边缘区B细胞、滤泡B细胞、腹膜B细胞、骨髓B细胞或癌干细胞172.权利要求1-70、85-115或131-158任一项的制剂，其中所述制剂是药学上可接受的制剂173.—种无菌、稳定含水制剂，其包含嵌合、人源化或人抗⑶19抗体，其中所述抗体包含(a)包含VH CDRl (SEQ ID NO 22)、VH CDR2 (SEQ ID NO 115)和 VH CDR3 (SEQ ID NO 121)的重链可变区；(b)包含VK CDRl (SEQ ID NO 28)、VK CDR2 (SEQ ID NO 125)和 VK CDR3 (SEQ ID NO 32)的轻链可变区；(c)具有N-糖苷-连接的复合糖链的Fc区，其中岩藻糖不结合于所述糖链还原端中的 N-乙酰氨基葡萄糖；和(d)缓冲剂、盐、糖类赋形剂和表面活性剂174.权利要求173的制剂，其中所述缓冲剂是组氨酸175.权利要求174的制剂，其中所述组氨酸以约ImM至约200mM的浓度存在176.权利要求174的制剂，其中所述组氨酸以约IOmM至约50mM的浓度存在177.权利要求174的制剂，其中所述组氨酸以约IOmM至约30mM的浓度存在178.权利要求174的制剂，其中所述组氨酸以约IOmM的浓度存在179.权利要求174的制剂，其中所述组氨酸以约20mM的浓度存在180.权利要求174的制剂，其中所述组氨酸以至少约IOmM的浓度存在181.权利要求173的制剂，其中所述盐为氯化钠182.权判要求181的制刑，其中所述氯化钠以约IOmM全约300mM的浓度存在183.权利要求181的制剂，其中所述氯化钠以约60mM至约175mM的浓度存在184.权利要求181的制剂，其中所述氯化钠以约50mM的浓度存在185.权利要求181的制剂，其中所述氯化钠以约75mM的浓度存在186.权利要求181的制剂，其中所述氯化钠以至少50mM的浓度存在187.权利要求173的制剂，其中所述糖类赋形剂是海藻糖188.权利要求187的制剂，其中所述海藻糖以约至约10%的浓度存在189.权利要求187的制剂，其中所述海藻糖以约2%至约8%的浓度存在190.权利要求187的制剂，其中所述海藻糖以约3%mM的浓度存在191.权利要求187的制剂，其中所述海藻糖以约4%的浓度存在192.权利要求187的制剂，其中所述海藻糖以至少约3%的浓度存在193.权利要求173的制剂，其中所述表面活性剂是聚山梨醇酯80194.权利要求193的制剂，其中所述聚山梨醇酯80以约0.001 %至约2%的浓度存在195.权利要求193的制剂，其中所述聚山梨醇酯80以约0.01%的浓度存在196.权利要求193的制剂，其中所述聚山梨醇酯80以约0.02%的浓度存在197.权利要求193的制剂，其中所述聚山梨醇酯80以约0.04%的浓度存在198.权利要求193的制剂，其中所述聚山梨醇酯80以约0.05%的浓度存在199.权利要求193的制剂，其中所述聚山梨醇酯80以约0.08%的浓度存在200.权利要求193的制剂，其中所述聚山梨醇酯80以约0.01%至约0. 2%的浓度存在201.权利要求173的制剂，其具有约5.5至约6. 5的pH202.权利要求173的制剂，其具有约6.0的pH203.权利要求173的制剂，其中所述制剂存在于无钨注射器中204.权利要求173的制剂，其中所述制剂被过滤205.权利要求173的制剂，其中所述制剂通过22μ m滤器被过滤206.权利要求205的制剂，其中所述制剂在添加表面活性剂之前和之后被过滤207.权利要求173的制剂，其中所述抗体的浓度为至少约10mg/ml208.权利要求173的制剂，其中所述抗体的浓度为至少约15mg/ml209.权利要求173的制剂，其中所述抗体的浓度为至少约50mg/ml210.权利要求173的制剂，其中所述抗体的浓度为至少约100mg/ml211.权利要求173的制剂，其中所述抗体的浓度为至少约120mg/ml212.权利要求173的制剂，其中所述抗体的浓度为至少约150mg/ml213.权利要求173的制剂，其中所述抗体的浓度为约5mg/ml214.权利要求173的制剂，其中所述抗体的浓度为约10mg/ml215.权利要求173的制剂，其中所述抗体的浓度为约20mg/ml216.权利要求173的制剂，其中所述抗体的浓度为约25mg/ml217.权利要求173的制剂，其中所述抗体的浓度为约30mg/ml218.权利要求173的制剂，其中所述抗体的浓度为约40mg/ml219.权利要求173的制剂，其中所述抗体的浓度为约50mg/ml220.权利要求173的制剂，其中所述抗体的浓度为约60mg/ml221.权利要求173的制剂，其中所述抗体的浓度为约70mg/ml222.权利要求173的制剂，其中所述抗体的浓度为至少约80mg/ml223.权利要求173的制剂，其中所述抗体的浓度为至少约90mg/ml224.权利要求173的制剂，其中所述抗体的浓度为至少约110mg/ml225.权利要求173的制剂，其中所述抗体的浓度为至少约120mg/ml226.权利要求173的制剂，其中所述抗体的浓度为至少约130mg/ml227.权利要求173的制剂，其中所述抗体的浓度为至少约140mg/ml228.权利要求173的制剂，其中所述抗体的浓度为约5mg/ml至约100mg/ml229.权利要求173的制剂，其中所述制剂在_20°C储存230.权利要求173的制剂，其中所述制剂在_40°C储存231.权利要求173的制剂，其中所述制剂在_70°C储存232.权利要求173的制剂，其中所述制剂在_80°C储存233.—种增强含水制剂的贮存稳定性的方法，其中所述制剂包含嵌合、人源化或人抗 ⑶19抗体，所述抗⑶19抗体包含a.包含SEQID NO 104的序列的重链可变区；b.包含SEQID NO 111的序列的轻链可变区；c.和具有N-糖苷-连接的复合糖链的Fc区，其中岩藻糖不结合于所述糖链还原端中的N-乙酰氨基葡萄糖；并且其中所述方法包括向所述制剂添加有效增强制剂贮存稳定性的量的表面活性剂234.权利要求232的方法，其中所述表面活性剂是聚山梨醇酯80235.权利要求233的方法，其中所述聚山梨醇酯80以约0.001 %至约2%的浓度存在236.权利要求233的方法，其中所述聚山梨醇酯80以约0.01 %的浓度存在237.权利要求233的方法，其中所述聚山梨醇酯80以约0.02%的浓度存在238.权利要求233的方法，其中所述聚山梨醇酯80以约0.04%的浓度存在239.权利要求233的方法，其中所述聚山梨醇酯80以约0.05%的浓度存在240.权利要求233的方法，其中所述聚山梨醇酯80以约0.08%的浓度存在241.权利要求233的方法，其中所述聚山梨醇酯80以约0.01 %至约0. 2%的浓度存在242.权利要求233的方法，还包括在添加表面活性剂之前过滤组合物的步骤243.权利要求233的方法，还包括在添加表面活性剂之后过滤组合物的步骤244.权利要求233的方法，还包括在添加表面活性剂之前和之后过滤组合物的步骤245.权利要求233的方法，其中所述抗CD19抗体保留其活性246.权利要求233的方法，其中所述抗CD19抗体保留其纯度

专利详情
全文pdf
权力要求
说明书
法律状态

专利名称：人源化抗cd19抗体制剂的制作方法人源化抗CD19抗体制剂序列表本申请包含已通过EFS-Web提交的并且在此通过引用整体并入本文的序列表。于 2010年3月5日创建的所述ASCII拷贝被命名为00058000. txt，并且大小为79，932字节。1.优先权资料本申请要求于2009年3月6日提交的美国专利申请No. 61/158，153的优先权，其通过引用整体并入本文。2.序言本发明涉及特异性结合人CD 19抗原并且可介导下述中的一种或多种的人、人源化或嵌合的抗体的液体制剂补体依赖性细胞介导的细胞毒作用(CDC)、抗原依赖性细胞介导的细胞毒作用(ADCC)和程序性细胞死亡(凋亡)。所述制剂表现出稳定性、低至不可检测水平的抗体片段化、低至不可检测水平的聚集以及抗体生物学活性损失很少至不损失，即使经长时间储存。本发明还涉及利用包含结合人CD 19抗原的治疗性人、人源化或嵌合的抗CD 19 抗体的液体制剂治疗人受治疗者的B细胞病症或疾病(包括B细胞恶性肿瘤)的方法。本发明涉及利用包含结合人CD 19抗原的治疗性人、人源化或嵌合的抗CD 19抗体的液体制剂治疗和预防自身免疫性疾病，以及治疗和预防人移植物接受者的移植物抗宿主病(GVHD)、移植排斥和移植后淋巴增殖性病症的方法。3.背景B细胞在其分化和增殖期间表达各种细胞表面分子。例子包括⑶W、⑶19、⑶20、 CD21、CD22、CD23、CD24、CD37、CD53、CD72、CD74、CD75、CD77、CD79a、CD79b、CD80、CD81、 ⑶82、⑶83、⑶84、⑶85和⑶86白细胞表面标记物。这些标记物通常被认为是治疗B细胞病症或疾病例如B细胞恶性肿瘤、自身免疫性疾病和移植排斥的治疗靶点。已开发了特异性结合它们的抗体，并且一些抗体经测试成为治疗疾病和病症的治疗剂。例如，针对对成熟B细胞及其恶性对应物特异的CD20细胞表面分子的基于嵌合或放射标记的单克隆抗体(HiAb)的疗法已显示能在体内治疗非霍奇金淋巴瘤(Tedder 等，Immunol. Todayl5 :450-454(1994) ；Press 等，Hematology :221-240(2001) ；Kaminski 等，N. Engl. J. Med. 329 :459-465 (1993) ；Weiner, Semin. Oncol. 26 :43-51 (1999) ；Onrust 等，Drugs 58 :79-88(1999) ；McLaughlin 等，Oncology 12 :1763-1769(1998) ；Reff 等， Blood 83 :435-445(1994) ；Maloney 等，Blood 90:2188-2195(1997) ；Malone 等，J.Clin· Oncol. 15 :3266-3274(1997) ；Anderson 等，Biochem. Soc. Transac. 25 :705-708 (1997))。也已发现，抗CD20单克隆抗体疗法在减轻类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、特发性血小板减少性紫癜和溶血性贫血以及其它免疫介导性疾病表现的方面部分有效(Silverman等， Arthritis Rheum. 48 :1484-1492(2002) ；Edwards φ, Rheumatology 40 :1-7(2001) ；De Vita 等，Arthritis Rheumatism 46 :2029-2033(2002) ；Leandro 等，Ann. Rheum. Dis. 61 883-888(2002) ；Leandro 等，ArthritisRheum. 46 :2673-2677 (2001))。抗 CD20(IgGl)抗体利妥昔单抗(RITUXAN)已成功用于治疗某些疾病例如成人免疫血小板减少性紫癜、类风湿性关节炎和自身免疫溶血性贫血(Cured等，WO 00/67796)。尽管这些疗法有效，但在B细胞不表达⑶20或低水平表达⑶20 (例如，前B细胞或未成熟B细胞)或经过⑶20免疫疗法后表达缺失(Smith等，Oncogene 22 :7359-7368(2003))的情况下，B细胞消耗的有效性降低。本领域已经描述了鼠单克隆抗CD 19抗体，例如HD37 (IgGl, κ ) (DAK0 North America 公司，Carpinteria, CA)、BU12 (Callard 等，J. Immunology, 148(10) 2983-7 (1992)) ,4G7(IgGl) (Meeker 等,Hybridoma, 3 (4) :305-20 (1984ffinter)), J4. 119 (Beckman Coulter, Krefeld, Germany) > B43 (PharMingen, San Diego, CA)、 SJ25C1 (BDPharMingen, San Diego, CA) , FMC63(IgG2a) (Zola 等,Immunol. Cell. Biol. 69(PT6) :411-22(1991) ；Nicholson 等，MoI. Immunol.，34 :1157—1165 (1997)； PieterszCancer Immunol. Immunotherapy,41 :53-60(1995))、89B(B4)(IgGl)(Beckman Coulter, Miami, FL ；Nadler 等，J. Immunol.，131 :244-250(1983))和 / 或 HD237(IgG2b) (Fourth International Workshop on human LeukocyteDifferentiation Antigens, Vienna, Austria, 1989 ；禾口 ezzutto 等，J. Immunol.，138(9) :2793-2799(1987))。在 B 细胞病症和疾病的各种动物模型中，抗CD 19抗体或其偶联物也显示出治疗潜能(Falvell 等，Br. J. Hematol. 134(2) :157-70(2006) ；Vallera 等，Clin. Cancer Res. 11 (21) 7920-8(2005) ；Yazawa 等，Proc. Natl. Acad. ki. USA 102(42) :15178-83 (2005))。具体来说，已经描述过人源化⑶19抗体在治疗B细胞疾病例如淋巴瘤、白血病或自身免疫性疾病中的应用(参见，Hansen美国专利申请公布No. US2005/0070693)。尽管近年来癌症治疗取得很多进展，但B细胞恶性肿瘤，例如非霍奇金淋巴瘤的B 细胞亚型和慢性淋巴细胞性白血病仍然是主要的癌症相关死亡原因。因此，非常需要进一步改进的治疗方案来治疗B细胞恶性肿瘤。目前已知细胞(T细胞介导的)和体液(抗体，B细胞介导的)免疫在移植物排斥中起到重要的作用。虽然已经充分了解移植物排斥中T细胞介导的免疫的重要性，但是最近才逐步了解急性和慢性排斥中体液免疫的重要作用。因此，治疗和预防移植物排斥中的大部分进展是从靶向T细胞活化的治疗剂开始的。FDA批准用于治疗移植物排斥的第一种治疗性单克隆抗体是鼠单克隆抗体0RTH0CL0NE-0KT3 (莫罗单抗CD3)，其针对T细胞的CD3受体。0KT3与许多其它抗淋巴细胞导向抗体相连接，这些抗淋巴细胞导向抗体包括单克隆抗 CD52CAMPATH 抗体、CAMPATH-IG, CAMPATH-1H(阿仑单抗)和 CAMPATH-IM) 以及多克隆抗-胸腺细胞抗体制备(称为抗-胸腺细胞球蛋白，或“ATG”，也称为“即复宁 (thymoglobin) ”或“兔抗胸腺细胞球蛋白(thymoglobulin) ”)。批准用于预防移植排斥的其它T细胞抗体包括嵌合单克隆抗体SIMULECT (巴利昔单抗)和人源化单克隆抗体^NAP AX (达利珠单抗)，它们均靶向活化T细胞的高亲和IL-2受体。最初认为，移植物排斥中体液免疫的重要性仅限于超急性排斥，其中移植物接受者在移植前具有抗-供体HLA抗体，导致在没有给予有效的抗体抑制治疗方案时移植物被快速破坏。近年来，越来越多的证据表明体液免疫也是介导急性和慢性排斥的重要因素。例如，临床观察证明，能够产生I类或II类抗-HLA同种抗体(也称为“抗-MHC同种抗体”) 的患者中的移植物存活率比无法产生这类抗体的患者中的移植物存活率低。临床和实验数据也表明，其它供体特异性的同种抗体和自身抗体是重要的排斥介导物。最近支持供体特异性抗体在同种移植物排斥中的作用的综述可参见Rifle等，Transplantation, 79 S14-S18(2005)。因此，由于近年来对体液免疫在急性和慢性移植物排斥中的作用的理解，与靶向细胞免疫的治疗剂和方案相比，目前对靶向体液免疫的治疗剂和方案的开发不足。因此，本领域需要治疗和预防人移植物接受者的移植物排斥，即移植物抗宿主病(GVHD)、体液排斥和移植后淋巴增殖性疾病的改进的试剂和方法。自身免疫性疾病整体而言发病率和残疾率都很高。根据1965至1995收集的发病率数据，估计在接下来的五年中约有120万新生自身免疫疾病患者。Jacobsen等(Clin Immunol. Immunopatho 1. 84 :223(1997))对超过130篇发表的研究作出评价并估计，在1996 年美国有850万人(占人群的3. 2% )患有这些研究中检测的M种自身免疫性疾病中的至少一种。鉴于自身免疫性疾病对公众健康的显著影响，需要安全有效的治疗来解决这些疾病的负担。因此，本领域需要治疗自身免疫性疾病的改进的试剂和方法。现有液体抗体制剂具有短的半衰期并且可能因为储存期间化学和物理不稳定性而损失抗体的生物学活性。化学不稳定性可能因为脱酰胺、外消旋、水解、氧化、β消除或二硫键交换造成，物理不稳定性可能因为抗体变性、聚集、沉淀或吸附造成。其中，已知聚集、脱酰胺和氧化是抗体降解的最常见原因(Wang等，1988，J. of ParenteralScience & Technology 42 (Suppl) :S4_S26 ;Cleland 等，1993, CriticalReviews in Therapeutic Drug Carrier Systems 10(4) :307-377)。因此，对抗体的稳定液体制剂，尤其是稳定的液体抗-人CD 19抗体存在需求。4.概述本发明提供了包含特异性结合人CD 19抗原的嵌合、人或人源化抗体的无菌、稳定含水制剂。在一个实施方案中，本发明提供了包含嵌合和人源化形式的抗CD 19小鼠单克隆抗体HB 12A和HB 12B的制剂。在另一个实施方案中，本发明提供了包含于2007年9月 7日提交的美国专利申请11/852，106中描述的抗CD 19抗体的制剂，该公开内容为了所有目的整体并入本文。在又一个实施方案中，本发明提供了包含可以介导下述中的一种或多种补体依赖性细胞介导的细胞毒作用(CDC)、抗原依赖性细胞介导的细胞毒作用(ADCC) 和程序性细胞死亡(凋亡)并且具有增强的效应功能的本发明抗CD 19抗体的制剂。在另一个实施方案中，本发明的制剂包含的本发明的抗CD 19抗体包含具有N-糖苷-连接的复合糖链的Fc区，其中岩藻糖不与所述糖链还原端中的N-乙酰氨基葡萄糖结合。在特定的实施方案中，本发明的制剂包含的抗⑶19抗体包含SEQ ID NO :104的重链可变区、SEQ IDNO=Ill的轻链可变区和具有N-糖苷-连接的复合糖链的Fc区，其中岩藻糖不与所述糖链还原端中的N-乙酰氨基葡萄糖结合。本发明提供了稳定嵌合、人或人源化本发明的抗CD 19抗体的方法。本发明还涉及制备包含特异性结合人CD 19抗原的本发明的嵌合、人或人源化抗体的无菌、稳定含水制剂的方法。本发明还涉及利用液体制剂治疗人受治疗者的B细胞病症或疾病(包括B细胞恶性肿瘤)的方法，所述方法包括结合人CD 19抗原的本发明的治疗性人、人源化或嵌合的抗 CD 19抗体。本发明涉及利用液体制剂治疗和预防自身免疫性疾病以及治疗和预防人移植物接受者的移植物抗宿主病(GVHD)、移植排斥和移植后淋巴增殖性病症的方法，所述方法包括结合人CD 19抗原的本发明的治疗性人、人源化或嵌合的抗CD 19抗体。本发明涉及结合人⑶19抗原的人、人源化或嵌合的抗⑶19抗体，以及包含那些抗体的组合物。在一个实施方案中，本发明提供了嵌合和人源化形式的抗CD 19小鼠单克隆抗体HBl 2A和HB12B。在另一个实施方案中，本发明的抗CD 19抗体包含HB12A (克隆B410F12-2-A6-C2 于2005年2月11日保藏于美国典型培养物保藏中心(“ATCC”)，ATCC保利保藏号 PTA-6580)或HB12B (克隆B43H12-3-B2-B6于2005年2月11日保藏于美国典型培养物保藏中心(“ATCC”)，ATCC保利保藏号PTA-6581)的⑶R中的一个、两个、三个、四个、五个或所有六个。根据Kabat确定的HB12A重链可变区的⑶R1、⑶R2和⑶R3的氨基酸序列(参见， Kabat 等，Sequences of Proteins ofImmunological Interest,第 5 版 Public Health Service, NationalInstitutes of Health, Bethesda, MD (1991)分别被鉴定为 SEQ ID NO: 6、SEQ ID NO :8 禾口 SEQ ID N0:10。根据 Kabat 定义的 HB12A 的轻链可变区的 CDR1、CDR2 和CDR3的氨基酸序列分别被鉴定为SEQ IDNO :12、SEQ ID NO 14和SEQ ID NO :16。根据Kabat确定的HB12B重链可变区的⑶R1、⑶R2和⑶R3的氨基酸序列分别被鉴定为 SEQ ID NO 22,SEQ ID N0:24 和 SEQ IDNO 26。根据 Kabat 定义的 HB12B 的轻链可变区的CDR1、CDR2和CDR3的氨基酸序列分别被鉴定为SEQ ID NO 28、SEQ ID NO :30和 SEQ ID NO :32。在一个实施方案中，本发明的抗CD 19抗体包含具有表1(见下)所列的CDR的氨基酸序列的一个、两个、三个、四个、五个或六个⑶R。本发明提供了包含嵌合和人源化形式的抗CD 19小鼠单克隆抗体的稳定液体制剂，所述抗CD 19小鼠单克隆抗体可介导ADCC、CDC和/或凋亡以用于治疗B细胞疾病和病症。

查看更多专利详情

下载专利文献

下载专利