专利名称：一种具有抗肿瘤活性的单四氢呋喃型番荔枝内酯化合物及其应用的制作方法恶性肿瘤是严重危害人类健康和生命的多发病和常见病，早在2000 3000年前 埃及和我国已有关于肿瘤的记载。包括中国在内的很多国家，尤其是中等发达国家，恶性肿 瘤所致死亡在所有死亡原因中占首位或第二位，且发病率在世界范围内仍呈上升趋势，在 肿瘤的术疗、放疗、化疗、生物治疗四大疗法中，化疗仍是主要的治疗方法，但众所周知，现 有的化疗药物抗肿瘤活性有限，且毒副作用较大，病人耐受能力差，且价格昂贵。因此，通过 研究天然植物中的化学抗癌物质预防癌症的发生和发展，已成为癌症化学预防研究的一个 重要领域，并受到世界各国科学界的普遍关注及研究热点。番荔枝内酯是一类从番荔枝科植物中提取分离得到的天然化合物，番荔枝内酯类 化合物具有广泛的生物活性，最典型的是杀虫和抗肿瘤细胞活性，研究显示番荔枝内酯在 体内外具有强大的肿瘤细胞毒性，而且对多种肿瘤细胞都显示较好的生物活性，研究表明 番荔枝内酯抗肿瘤活性的作用机理是通过阻断线立体NADH氧化还原酶，从而阻止呼吸链 电子的传递，抑制肿瘤细胞ATP的生成，使肿瘤细胞因饥饿而死亡，其作用机制独特，不同 于一般抗肿瘤药物的作用机制，被喻为“明日抗癌之星”。番荔枝种子为番荔枝果肉食用后丢弃的废弃物，其中番荔枝内酯类化合物含量较 高，为了充分的利用这种废弃物，使其变废为宝，本发明对番荔枝种子化学成分进行系统深 入研究，从番荔枝种子中分离得到一个新的单四氢呋喃型番荔枝内酯化合物。
发明目的本发明的目的是为了克服现有技术的不足，提供一种具有强抗肿瘤活 性的新单四氢呋喃型番荔枝内酯化合物及其在预防和治疗肿瘤疾病中的用途技术方案为了实现以上目的，本发明采取的技术方案为具有抗肿瘤活性的单四氢呋喃型番荔枝内酯类化合物，其结构式如下分子式为C35H64O5，结构末端有α，β-Y不饱和内酯环，分子链中有一个单四氢呋喃 环，并将其命名为安诺史可莫敏丙。 本发明提供的具有抗肿瘤活性的单四氢呋喃型番荔枝内酯化合物的提取分离方法包括以下步骤a、取番荔枝种子粉碎后用溶剂提取，回收提取液，得到浓缩液；b、将浓缩液经过正相色谱层析分离，得到目标化合物安诺史可莫敏丙。以上制备方法中，步骤a所用的提取溶剂可以是石油醚、氯仿、乙酸乙酯等其中之 一或它们的混合溶剂，优选氯仿；提取方法可以是冷浸、渗漉、微波提取或超声提取，优选渗 漉和超声提取。以上制备方法中，步骤b提取液浓缩后可以通过色谱层析，所用的色谱层析分离 材料可以是硅胶、氧化铝、含有氰基或氨基的硅烷键合硅胶，其中优选硅胶，所用的洗脱溶 剂为石油醚和乙酸乙酯，收集分别含有目标化合物的洗脱液浓缩，浓缩后的精制液分别可 在硅胶、氧化铝、含有氰基或氨基的硅烷键合硅胶等材料中进行色谱分离，石油醚和乙酸乙 酯梯度洗脱，收集洗脱液，洗脱液重结晶分别得到新单四氢呋喃型番荔枝内酯安诺史可莫 敏丙。本发明提供的具有抗肿瘤活性的单四氢呋喃型番荔枝内酯化合物，将单四氢呋喃 型番荔枝内酯类化合物(安诺史可莫敏丙)和药学上可接受的载体制备成片剂、胶囊剂、注 射剂、粉针剂、颗粒剂、脂肪乳剂、微囊、滴丸、软膏剂或透皮控释贴剂等剂型。将本发明提供的单四氢呋喃型番荔枝内酯制成片剂时，把单四氢呋喃型番荔枝内 酯和乳糖或玉米淀粉，需要时加入润滑剂硬脂酸镁，混合均勻，整粒，然后压片制成片剂。本发明提供的单四氢呋喃型番荔枝内酯制成胶囊剂时把单四氢呋喃型番荔枝内 酯和载体乳糖或玉米淀粉混合均勻，整粒，然后装胶囊制成胶囊剂。本发明提供的单四氢呋喃型番荔枝内酯制成颗粒剂时，把单四氢呋喃型番荔枝内 酯和稀释剂乳糖或玉米淀粉、混合均勻，整粒，干燥，制成颗粒剂。本发明提供的单四氢呋喃型番荔枝内酯制成粉针剂时，把单四氢呋喃型番荔枝内 酯冷冻干燥，杀菌，制成粉针剂。本发明提供的单四氢呋喃型番荔枝内酯制成注射液时，取单四氢呋喃型番荔枝内 酯加入生理盐水溶解然后加入活性碳，搅拌均勻，80°C加热30分钟，过滤，调节pH值，用垂 熔玻璃漏斗或其它滤器过滤至澄明，灌装，在100至115°C灭菌30分钟制成注射液。本发明提供的单四氢呋喃型番荔枝内酯制成脂肪乳剂、软膏剂或透皮控释贴剂等 剂型时加入载体按药学常规方法制备得到。本发明提供的的具有抗肿瘤活性的单四氢呋喃型番荔枝内酯类化合物(安诺史可 莫敏丙)在制备抗肿瘤药物中的应用。作为优选方案，本发明提供的具有抗肿瘤活性的单四氢呋喃型番荔枝内酯类化合 物在制备抗肿瘤药物中的应用，所述的肿瘤为肺癌、乳腺癌，肝癌，宫颈癌和胃癌。有益效果本发明提供的具有抗肿瘤活性的单四氢呋喃型番荔枝内酯类化合物和 现有技术相比具有以下优点
本发明通过对番荔枝种子化学成分进行系统深入研究，经过波谱和质谱数据分析表明 从番荔枝种子中分离得到一个单四氢呋喃型番荔枝内酯类化合物(安诺史可莫敏丙)，为新 化合物。且经过体内和体外抗肿瘤活性研究表明，本发明提供的单四氢呋喃型番荔枝内酯 对多种肿瘤细胞，包括肺癌、乳腺癌，肝癌，宫颈癌和胃癌均具有很强的抗肿瘤活性，且 经过毒性实验研究表明，本发明提供的具有抗肿瘤活性的单四氢呋喃型番荔枝内酯类化合
4物毒性较低，是一种优良的抗肿瘤新化合物。


图1为安诺史可莫敏丙的结构示意图； 图2为安诺史可莫敏丙的高分辨质谱图； 图3为安诺史可莫敏丙的 NMR图4为安诺史可莫敏丙的13C NMR图。

取干燥番荔枝种子10公斤，粉碎后用氯仿渗漉，回收合并渗漉液，过滤，滤液减压回收 得到浓缩液1公斤，浓缩液用正相硅胶进行柱层析分离，用石油醚-乙酸乙酯-甲醇梯度洗 脱，共收集馏分400份，根据薄层层析情况合并成五个部分(Ff F5)，取F2 (63克)经正相 硅胶进行柱层析分离，用石油醚-乙酸乙酯(20 :Γ0 :1)梯度洗脱，根据薄层层析情况分成 8个部分(F6>13)，取F9合并液析出物经石油醚-乙酸乙酯重结晶，得到化合物安诺史可 莫敏丙，结构式如图1所示，经高效液相检测，纯度为99. 1%。安诺史可莫敏丙的结构解析白色粉末，分子式C35H64O5;熔点64-65 ° C ；旋 光度[a]25D + 12.8 {c 0. 10, MeOH)；紫外(MeOH) ^max (log ε) 218 (3. 71) nm ；红 外IR (KBr) Kmax 3424, 2918，2852，1743 和 1070 cnT1 ；咕 NMR 和 13C NMR 数据见表 1， 图3和4 ；如图2的高分辨电喷雾质谱(HRESIMS)准分子离子峰 /^ 565. 4808 [M + H] + (计算值585. 4832)和 /^ 587.4665 [M + Na]+ (计算值587. 4651)。结合元素分析确 定相对分子量为580，确定分子式为C35H64O5,化合物UV Amax = 215 nm且keed试剂反应 呈紫红色，说明有α，β-Υ不饱和内酯环的存在。其1H-NMR中δΗ 6.97 (Η_33)，4.99 (Η-34), 1. 39(Η-35)和 13C-WR 中 δ c 173. 54 (C-I) ,134. 02 (C_2)、148.49 (C_33)、77.05 (C-34)、18. 88 (C-;35)，这些是α、β - γ不饱和内酯环的特征信号；1H-NMR中δ Η 2. 26处 的三重峰表明C-4位没有含氧基团取代，1H-NMR中δ 3.38 (H-Il), δ 3. 89 (H-16), 3. 83 (Η-12, 15)和 13C-NMR δ 74. 01 (C-Il) ,82. 90 (C-12/15)，81. 83 (C-12/15)，71. 24 (C-16)的峰表明结构中有单四氢呋喃环的存在且THF的两侧各有一个羟基相邻，因为其 5C74. 01 (C-11), 71.24 (C-16) ； δΗ 3. 38 (H-Il), δ 3. 89 (H-16)故分别为赤式和苏 式。根据 ESI-MS/MS 数据(m/z = 209, 221，289，303，317，307，237)推断 THF 的取代 位置为C-Il与C-16之间。结合化合物Annonacin A及Reticulatain-I的NMR数据，推断 其相对构型为th/t/er，即为Armonacin A亚型。综上所述，结合各种理化和波谱数据，鉴 定为一个新的单四氢呋喃环型番荔枝枝内酯类化合物，命名为安诺史可莫敏丙，系统化学 名为(S)-3-((R)-9-羟基-9-( QR，5R)-5-((S)-I-羟基十七烷基)_2_四氢呋喃基)壬 基)-5-甲基呋喃-2(5H)_酮。表1.安诺史可莫敏丙化合物的NMR数据(溶剂为⑶Cl3,测试为300MHz)


本发明公开了一种具有抗肿瘤活性的新单四氢呋喃型番荔枝内酯化合物，本发明通过对番荔枝种子化学成分进行系统深入研究，经过波谱和质谱数据分析表明从番荔枝种子中分离得到一个新的单四氢呋喃型番荔枝内酯类化合物(安诺史可莫敏丙)，且经过体内和体外抗肿瘤活性研究表明，本发明提供的单四氢呋喃型番荔枝内酯对多种肿瘤细胞，包括肺癌、乳腺癌,肝癌,宫颈癌和胃癌均具有很强的抗肿瘤活性，且经过毒性实验研究表明，本发明提供的具有抗肿瘤活性的单四氢呋喃型番荔枝内酯类化合物毒性较低，有望开发成为新的抗肿瘤药物。