专利名称:一种发酵生产阿维菌素的方法阿维菌素是ー种农用抗生素,它即可以作为农用杀虫剂,也可用于兽用杀虫剂。在世界范围内已广泛用于农业、林业杀虫和动物驱虫。阿维菌素是由阿弗曼链霉菌avermitills经液体发酵生产,エ业生 产中常使用玉米淀粉作为碳源,在发酵初期,培养基中玉米淀粉含量高,黏度大,但发酵中后期由于碳源消耗,培养基黏度降低,剪切力増大,对阿维菌素发酵产素不利;而且在阿维菌素次级代谢过程中产生的副产物种类繁多,有很多有害有毒物质会对阿维菌素的后期发酵产生抑制作用。
针对现有技术中存在的问题,本发明提供一种发酵生产阿维菌素的方法,具体为 一种发酵生产阿维菌素的方法,发酵培养开始进行140-180小时时开始补加发酵培养基体积的O. 5-5%白地霉培养液至发酵培养基中,发酵培养开始进行270-300小时时放罐。所述的白地霉培养液是指白地霉菌株在培养基中培养后得到的发酵液。优选地,所述发酵培养的条件为将依次经斜面培养和种子培养所得种子液接种至装有培养基的发酵罐,接种量3-10%,培养温度20-30°C,压カO. 04-0. 06MPa, DO控制在30%-100%,转速 200-400rpm,pH 7-8。优选地,所述白地霉培养液的质量百分数为O. 5-2. 5%。更为优选,所述发酵培养条件中的压カ为O. 05MPa。更为优选,所述发酵培养条件中的接种量为5-8%。更为优选,所述发酵培养条件中的DO控制在40-60%。优选地,发酵培养所用的培养基(g/Ι)的组成为玉米淀粉120-160,豆柏粉20-30,酵母粉6-12,钥酸钠O. 02-0. 03,硫酸锰O. 02-0. 03,硫酸铵O. 2-0. 4,氯化钴O.01-0. 03,碳酸钙O. 5-1,淀粉酶O. 01-0. 03^余量为自来水。优选地,发酵培养开始进行140-160小时时开始补加白地霉培养液。优选地,发酵培养开始进行280-295小时时放罐。优选地,所述白地霉培养液所用的白地霉菌种经过阿维菌素发酵废水培养。更为优选,所述白地霉培养液通过以下方法制备 A、阿维菌素发酵废水的获得未添加过白地霉培养液的阿维菌素发酵,发酵结束后,通过板框压滤,获得滤液和滤渣,滤液即为阿维菌素发酵废水;B、将白地霉菌株接种到阿维菌素发酵废水的平板上进行驯化培养,驯化培养后对白地霉菌种进行扩增培养16-20小时,再深层液体培养20-24小时得到白地霉培养液。更为优选,深层液体培养20小时。本发明在发酵培养过程中添加白地霉培养液,可使阿维菌素发酵效价提高的同时降低阿维菌素发酵废液的C0D,其白地霉培养液的主要作用为 I、发酵中后期,玉米淀粉逐渐转化成葡萄糖被利用,培养基的黏度降低了,对菌丝体的剪切力増大了,白地霉在此加入生长后作为支撑物,増加了培养基粘度,但不限制溶氧。2、在发酵140-180小吋,阿维菌素生物合成效率较高,阿维链霉菌次级代谢产物增多,白地霉培养液添加能利用次级代谢产生有害产物并降解有毒有害物质,降低对阿维菌素合成反馈抑制作用。 3、白地霉菌体是高蛋白物质(ー种单细胞蛋白SCP),可以为发酵后期提供氮源,有利于发酵顺利进行。 4、白地霉可以与其他微生物协同作用降解或转化废液中的有机物,可使废液中COD有所降低。
将经斜面培养和种子培养所得种子液接种至装有上述阿维菌素发酵培养基I的发酵罐,接种量3%,培养温度25°C,压カO. 06MPa, DO控制在60%,转速300rpm,pH 8,发酵培养进行180小时开始补加20ml白地霉培养液至发酵培养基中,发酵270小时放罐。实施例2
将经斜面培养和种子培养所得种子液接种至装有上述阿维菌素发酵培养基I的发酵罐,接种量8%,培养温度30°C,压カO. 04MPa, DO控制在30%,转速400rpm,pH7,发酵培养进行150小时开始补加5ml白地霉培养液至发酵培养基中,发酵300小时放罐。
实施例3
将经斜面培养和种子培养所得种子液接种至装有上述阿维菌素发酵培养基I的发酵罐,接种量10%,培养温度20 0C,压カO. 05MPa,D0控制在70%,转速200rpm,pH 7. 50,发酵培养进行140小时开始补加50ml白地霉培养液至发酵培养基中,发酵280小时放罐。实施例4
将经斜面培养和种子培养所得种子液接种至装有上述阿维菌素发酵培养基2的发酵罐,接种量3%,培养温度25°C,压カO. 06MPa, DO控制在30%,转速300rpm,pH 8,发酵培养进行160小时开始补加30ml白地霉培养液至发酵培养基中,发酵290小时放罐。实施例5 将经斜面培养和种子培养所得种子液接种至装有上述阿维菌素发酵培养基2的发酵罐,接种量5%,培养温度30°C,压カO. 04MPa, DO控制在100%,转速400rpm,pH7,发酵培养进行170小时开始补加40ml白地霉培养液至发酵培养基中,发酵280小时放罐。实施例6
将经斜面培养和种子培养所得种子液接种至装有上述阿维菌素发酵培养基2的发酵罐,接种量8%,培养温度20°C,压カO. 05MPa, DO控制在50%,转速200rpm,pH 7. 50,发酵培养进行150小时开始补加35ml白地霉培养液至发酵培养基中,发酵295小时放罐。实施例7
将经斜面培养和种子培养所得种子液接种至装有上述阿维菌素发酵培养基3的发酵罐,接种量3%,培养温度25°C,压カO. 06MPa, DO控制在40%,转速300rpm,pH 8,发酵培养进行150小时开始补加15ml白地霉培养液至发酵培养基中,发酵275小时放罐。实施例8
将经斜面培养和种子培养所得种子液接种至装有上述阿维菌素发酵培养基3的发酵罐,接种量6%,培养温度30°C,压カO. 04MPa, DO控制在60%,转速400rpm,pH7,发酵培养进行155小时开始补加45ml白地霉培养液至发酵培养基中,发酵295小时放罐。实施例9
将经斜面培养和种子培养所得种子液接种至装有上述阿维菌素发酵培养基3的发酵罐,接种量5%,培养温度20°C,压カO. 05MPa, DO控制在80%,转速200rpm,pH 7. 50,发酵培养进行145小时开始补加25ml白地霉培养液至发酵培养基中,发酵270小时放罐。对比实施例I
同实施例1,不同的是发酵培养时不添加白地霉培养液。对比实施例2
同实施例2,不同的是发酵培养时不添加白地霉培养液。对比实施例3
同实施例3,不同的是发酵培养时不添加白地霉培养液。对比实施例4
同实施例4,不同的是发酵培养时不添加白地霉培养液。对比实施例5
同实施例5,不同的是发酵培养时不添加白地霉培养液。对比实施例6同实施例6,不同的是发酵培养时不添加白地霉培养液。对比实施例7
同实施例7,不同的是发酵培养时不添加白地霉培养液。对比实施例8
同实施例8,不同的是发酵培养时不添加白地霉培养液。对比实施例9
同实施例9,不同的是发酵培养时不添加白地霉培养液。
表I
本发明公开了一种发酵生产阿维菌素的方法,即在发酵培养进行140-180小时开始补加0.5-5%白地霉培养液至发酵培养基中,可使阿维菌素发酵效价提高并降低阿维菌素发酵废液中的COD。
一种发酵生产阿维菌素的方法
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