鱼骨有机酸钙多肽粉的制备方法

杨宁

2012年7月11日

2012年3月8日

天津工业大学

A23L1/327GK102551111SQ201210056808

鱼骨 多肽 有机酸

1.一种鱼骨有机酸钙多肽粉的制备方法，所述方法包括以下步骤第一、将干净的鱼骨充分冷冻至-20°C，然后进行切碎处理至30 50mm大小；第二、将大小为30 50mm的冷冻鱼骨和冰水混合物按照质量比为1 2 4的比例加入胶体磨进料口，进行二次细磨，使出料鱼骨水泥粒度大小在10 30 μ m之间，通过物理手段充分破坏鱼骨胶原和羟基磷灰石构成的坚硬结构，使蛋白充分溶解出来；第三、按照复合蛋白酶与鱼骨水泥之间1 100 200的质量比向鱼骨水泥中加入复合蛋白酶，低速搅拌，在37 50°C、pH为6. 5 7. 4条件下进行酶解反应3 4h，再在85 90°C下保温5min，进行酶的灭活处理；然后在4°C、3000 5000g条件下离心5 lOmin，分别收集上清液和沉淀；第四、将步骤三所得上清液进行超滤，经过分子量为3000 5000的过滤膜，收集上清蛋白多肽液；第五、将步骤三所得沉淀物进行青洗，加入质量百分浓度为1 2%的有机酸，在室温下搅拌反应4 6h，离心收集上清有机酸钙水溶液；第六、将步骤四所得蛋白多肽液和步骤五所得水溶性有机酸钙液混合，蒸发浓缩至原体积的30 35%，在130 140°C下喷雾干燥，得到鱼骨有机酸钙多肽粉末2.根据权利要求1所述的鱼骨有机酸钙多肽粉的制备方法，其特征在于上述的鱼骨是指草鱼、鲮鱼、金线鱼、龙头鱼、金枪鱼、罗非鱼等的任一种或多种鱼混合的鱼骨3.根据权利要求1所述的鱼骨有机酸钙多肽粉的制备方法，其中，所述物理手段是采用胶体磨设备在低温下对冷冻鱼骨进行研磨处理4.根据权利要求1所述的鱼骨有机酸钙多肽粉的制备方法，其特征在于上述有机酸为乳酸、果酸、柠檬酸、醋酸其中之一

本发明属于水产品加工技术领域，具体涉及各种经济鱼类的精深加工，特别是胶体磨设备在鱼骨深加工中的应用背景技术草鱼、鲮鱼、金线鱼、龙头鱼、金枪鱼和罗非鱼为我国典型的经济鱼类，主要用于加工水产品、冷冻干制品、各种鱼糜制品、水产罐头及腌制品等加工过程产生大量的废弃物，如鱼骨、鱼皮、鱼鳍及一些边角料，约占鱼体重量的30% 50%，其中废弃鱼骨在总废弃物中所占比例最高，约30 % 60 %鱼骨主要由细胞基质物和矿物质组成，80%细胞基质物为胶原蛋白及蛋白多糖或糖蛋白，其氨基酸组成和蛋白质结构与人体胶原相近，免疫原性低，生物相容性好，与人体的细胞增殖、分化、伤口修复、关节润滑等密切相关，具有一定的生理活性鱼骨中所含矿物质含量也显著高于其他食品，钙磷比例接近于利于人体吸收的最佳钙磷比鱼骨中所含胶原蛋白和矿物质，无论是从骨的生理代谢，还是作为食品、药品、保健品及医用制品，其营养价值和生理活性受到广泛关注但是，由于鱼骨中含有的胶原纤维和羟基磷灰石构成了坚硬的结构，使得包含其中的蛋白难以分离提取，导致鱼骨难以得到综合利用近年来有许多从各种鱼皮、鱼鳞中提取胶原蛋白肽、医用胶原蛋白及骨钙的专利，例如从鲨鱼皮分离纯化生物医药用胶原蛋白的方法 (200710040590. 0)、一种用鲤鱼鱼皮制备胶原蛋白肽的方法Q00910114887. 6)、一种鱼胶原蛋白的制备方法O01010282354. 1)、消毒脱色鱼鳞骨有机酸钙、无变性胶原蛋白的制备方法Q01010121325. 7)，但是对鱼骨的深加工利用研究报导较少发明内容本发明目的是提供一种生产成本低、效率高，可一次性获得鱼骨有机酸钙多肽粉的制备方法，解决鱼骨难以加工利用的现状本发明提供的鱼骨有机酸钙多肽粉的制备方法，包括以下步骤第一、将干净的鱼骨充分冷冻至_20°C，然后进行切碎处理至30 50mm大小；第二、将大小为30 50mm的冷冻鱼骨和冰水混合物按照质量比为1 2 4的比例加入胶体磨进料口，进行二次细磨，使出料鱼骨水泥粒度的大小在10 30 μ m之间通过物理手段充分破坏鱼骨胶原和羟基磷灰石构成的坚硬结构，使蛋白充分溶解出来；第三、按照复合蛋白酶与鱼骨水泥之间1 100 200的质量比向鱼骨水泥中加入复合蛋白酶，低速搅拌，在37 50°C、pH为6. 5 7. 4条件下进行酶解反应3 4h，再在85 90°C下保温5min，进行酶的灭活处理；然后在4°C、3000 5000g条件下离心5 lOmin，分别收集上清液和沉淀；第四、将步骤三所得上清液进行超滤，经过分子量为3000 5000的过滤膜，收集上清蛋白多肽液；第五、将步骤三所得沉淀物进行清洗，加入质量百分浓度为1 2%的有机酸，在室温下搅拌反应4 6h，离心收集上清有机酸钙水溶液；第六、将步骤四所得蛋白多肽液和步骤五所得水溶性有机酸钙液混合，蒸发浓缩至原体积的30 35%，在130 140°C下喷雾干燥，得到白色的鱼骨有机酸钙多肽粉末其中的复合蛋白酶为天津市诺奥科技发展有限公司生产的牌号为骨胶原蛋白水解专用酶的酶其中的有机酸为乳酸、果酸、柠檬酸、醋酸本发明的优点和积极效果胶体磨由高速旋转的动磨片和定磨片组成，动磨片和定磨片之间的间隙可通过微调系统根据所需的细度指标任意调节被加工物料进入膜片之间的工作间隙，在离心力的作用下进入相对运动的动磨片和定磨片之间，经高速旋转膜片产生的强大离心力、涡流磨片的剪切、研磨，达到对物料细化的目的本发明从胶体磨的作用原理出发，反复研究、考证，创造性地将胶体磨技术应用到鱼骨深加工的工艺中首先利用胶体磨可将骨水泥的粒度超细化(10 30 μ m)，一方面通过物理手段破坏骨胶原和羟基磷灰石所构成的坚硬结构，使其中的胶原溶出；另一方面，使酶解反应更加充分，大大提高鱼骨多肽的分离提取率对鱼骨进行预处理的整个过程是在低温下进行，较好地保持了鱼骨中各类物质的生物活性本发明对鱼骨中蛋白采用复合酶技术制备多肽液，反应条件温和，所得蛋白多肽生物活性高，同时使用食品级蛋白酶，安全性好，无毒副作用本发明将多肽分离后，再对鱼骨中的钙进行有机酸(乳酸、果酸、柠檬酸、醋酸其中之一)活化制备可溶性钙，使其易于被人体吸收利用，提高了钙的生物利用率本发明制备方法简便易行，科学合理，是一种适合工业化生产的方法

实施例1 第一、取冷冻的罗非鱼鱼骨1000克，经解冻、去除表面残留的鱼肉、清洗、浙干，共得到960克干净的鱼骨，然后冻结至_20°C，再进行切碎处理至30 50mm大小；第二、将960克大小为30 50mm的冷冻鱼骨加入胶体磨进料口，同时一共加入 2000克的冰水混合物进行二次细磨，使出料鱼骨水泥粒度在20 μ m左右第三、在均质细腻的骨水泥中加入15克复合蛋白酶，低速搅拌，在45°C、pH为7.4 条件下进行酶解反应4h，再在90°C下保温5min，进行酶的灭活处理；然后在4°C、4000g条件下离心7min，分别收集上清液和沉淀；第四、将步骤三所得上清液进行超滤两次，经过分子量为5000的过滤膜，收集上清蛋白多肽液；第五、将步骤三所得沉淀物进行清洗，加入15mL纯乳酸，在室温下搅拌反应证，离心收集上清乳酸钙水溶液；第六、将步骤四所得蛋白多肽液和步骤五所得水溶性乳酸钙液混合，蒸发浓缩至 750mL，在140°C下喷雾干燥，得到白色的鱼骨有机酸钙多肽粉末181g实施例2 第一、取冷冻的草鱼鱼骨1000克，经解冻、去除表面残留的鱼肉、清洗、浙干，共得到950克干净的鱼骨，然后冻结至_20°C，再进行切碎处理至30 50mm大小；第二、将950克大小为30 50mm的冷冻鱼骨加入胶体磨进料口，同时一共加入 1900克的冰水混合物进行二次细磨，使出料鱼骨水泥粒度在20 μ m左右第三、在均质细腻的骨水泥中加入15克复合蛋白酶，低速搅拌，在45°C、pH为7.4 条件下进行酶解反应4h，再在90°C下保温5min，进行酶的灭活处理；然后在4°C、4000g条件下离心7min，分别收集上清液和沉淀；第四、将步骤三所得上清液进行超滤两次，经过分子量为5000的过滤膜，收集上清蛋白多肽液；第五、将步骤三所得沉淀物进行清洗，加入15mL纯乳酸，在室温下搅拌反应证，离心收集上清乳酸钙水溶液；第六、将步骤四所得蛋白多肽液和步骤五所得水溶性乳酸钙液混合，蒸发浓缩至 750mL，在140°C下喷雾干燥，得到白色的鱼骨有机酸钙多肽粉末176g上述实施例是对本发明的上述内容作进一步的说明，但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于上述实施例凡基于上述内容所实现的技术均属于本发明的范围