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专利名称
一种生产纳他霉素的方法及其发酵培养基制作方法
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发明者
王军
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公开日
2013年7月3日
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申请日期
2011年12月29日
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优先权日
2011年12月29日
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申请人
上海汇博生物科技有限公司
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文档编号
C12R1/465GK103184259SQ20111045303
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关键字
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权利要求
1.一种生产纳他霉素的方法，包括发酵纳塔尔链霉菌(Streptomyces natalensis),其特征在于，在发酵过程中向发酵培养基中添加纳他霉素前体和生物诱导子，所述的纳他霉素前体选自丝氨基酸、丙酮酸和乙酸钾，所述的生物诱导子为灰色链霉菌(Streptomycesgriseus)的发酵液2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的纳他霉素前体为5 15mg/l丝氨基酸，I 10mg/l丙酮酸和I 10mg/l乙酸钾；其添加量是0.05 0.5% (V/V)3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的生物诱导子为灰色链霉菌在发酵培养基中26 32°C培养2 5天的发酵液,所述的发酵培养基为每1000毫升中包括葡萄糖5 15g,玉米面I 5g,豆禮1 5g,豆柏I 5g, K2HPO40.1 Ig和硫酸镁0.1 Ig ;生物诱导子的添加量是0.1 2% (V/V)4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的发酵培养基为每1000毫升中包括马铃薯淀粉4 8g,葡萄糖10 20g,花生饼粉I 5g,大豆蛋白胨I 5g,玉米衆I 5g,牛肉膏 2 8g，CaCl20.5 2g 和 MgSO4.7Η200.5 2g5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，纳塔尔链霉菌的发酵温度26 30°C，发酵时间4 10天；发酵中纳塔尔链霉菌的接种量是1% 5% (V/V)6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的生物诱导子由包括以下步骤的方法制备而得 (1)微生物的培养将固体斜面培养基上的灰色链霉菌(Streptomycesgriseus)AS4.1095接种于液体种子培养基中，26 32°C、100 200r/min培养2 5天； 所述的固体斜面 培养基每1000毫升中包括马铃薯淀粉20 80g,豌豆汁50 100毫升，葡萄糖10 30g和琼脂15 20g ； 所述的液体种子培养基每1000毫升中包括葡萄糖5 15g，玉米面I 5g，豆渣I 5g，豆柏 I 5g，K2HPO40.1 lg，硫酸镁 0.1 lg，pH 7.0 7.2 ; (2)将步骤(I)培养好的培养液，5000 IOOOOrpm离心去菌体，留上清液，然后用微孔滤膜过滤，即得生物诱导子7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，发酵所采用纳塔尔链霉菌种子由包括以下步骤制备将纳塔尔链霉菌接种于在固体斜面培养基上，26 30°C培养6 10天后，接种于液体种子培养基中，26 30°C培养2 5天；所述的固体斜面培养基为每1000毫升中包括葡萄糖5 15g，蛋白胨I 10g，牛肉膏I 5g，新鲜麦芽汁50 200ml和琼脂15 20g ;所述的液体种子培养基为每1000毫升中包括葡萄糖10 20g，大豆蛋白胨I 5g，玉米衆I 5g和氯化钠5 15g8.一种发酵纳塔尔链霉菌生产纳他霉素的发酵培养基，其特征在于，所述的发酵培养基为每1000毫升中包括马铃薯淀粉4 8g，葡萄糖10 20g，花生饼粉I 5g，大豆蛋白胨I 5g，玉米浆I 5g，牛肉膏2 8g，CaCl20.5 2g和MgSO4.7H20 0.5 2g9.如权利要求8所述的发酵培养基，其特征在于，所述的发酵培养基的pH为6.8 7.110.如权利要求8或9所述的发酵培养基，其特征在于，所述的发酵培养基为每1000毫升中包括马铃薯淀粉5g,葡萄糖15g,花生饼粉2g,大豆蛋白胨2g,玉米楽；2g,牛肉膏5g,CaCl2Ig 和 MgSO4.7H20 lg,灭菌后 pH 7.0
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技术领域
本发明属于生物工程领域，特别涉及一种生产纳他霉素的方法及其发酵培养基
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背景技术
专利名称：一种生产纳他霉素的方法及其发酵培养基的制作方法纳他霉素(natamycin)是由纳塔尔链霉菌、恰塔努加链霉菌和褐黄孢链霉菌等菌产生的一种能有效的抑制霉菌和酵母菌的生长，同时能阻止丝状真菌中真菌毒的产生的抗真菌抗生素，具有低剂量高效率、无嗅无味、适用PH范围广、专一性好和安全性高等特点。纳他霉素相对分子量为665.75，其分子式为C33H47O13,结构如式I所示。由于纳他霉素对酵母菌、霉菌等真菌的广谱抗性及无毒、高效、不致畸、不致敏、对人体无害无残留等特性，1982年，FDA正式批准纳他霉素可以用作食品防腐剂。我国卫生部于1997年批准可以在我国食品中使用纳他霉素作为防腐剂。到目前为止它已被全球三十多个国家作为食品防腐剂批准使用，纳他霉素，是目前国际上批准使用的仅有的一种生物食品防腐剂。本发明公开了一种生产纳他霉素的方法，包括发酵纳塔尔链霉菌(Streptomyces natalensis)，其特征在于，在发酵过程中向发酵培养基中添加纳他霉素前体和生物诱导子，所述的纳他霉素前体选自丝氨基酸、丙酮酸和乙酸钾，所述的生物诱导子为灰色链霉菌(Streptomyces griseus)的发酵液。本方法可以提高纳塔尔链霉菌发酵生产纳他霉素的产量。本发明也提供一种改良的纳塔尔链霉菌发酵生产纳他霉素的发酵培养基。本发明使纳他霉素的产量提高到5.32g/l，比不添加诱导子和前体物的产量相比提高了410％。
