专利名称：包含益生菌组分和5-ht4受体激动剂的口服复合制剂及其制备方法功能性消化不良是一种以上腹疼痛不适为特征的消化系统临床综合征，病人进食后感觉腹部饱胀、恶心、呕吐，然而通过包括内窥镜在内的常规诊断仪器都显示不出任何可 查明的器官病迹象。这种综合征原因复杂，遍及整个消化器官，并且在临床治疗中已经使用了各种药物疗法。然而，功能性消化不良具有很多综合征，这些综合症很难客观估计与分析，因而想要验证用于治疗功能性消化不良药物的疗效并不容易。用于选择性地促进肠道蠕动的药物在临床上非常有效，其中血清素就是一个典型实例。已经发现，胃(90%)和中枢神经系统(4-5%)含有血清素(5-羟色胺，5-HT)，14个血清素受体亚型中，5-HT3和5-HT4受体激动剂主要开发用于胃肠道。莫沙必利(4-氨基-5-氯-2-乙氧基-N- ((4- (4-氟苯基)_2_吗啉基)甲基)苯酰胺)被认为是一种选择性的血清素5-HT4受体激动剂，被公认为对增强消化道蠕动和胃排空蠕动做出了贡献。莫沙必利能够通过促进肠肌层神经丛的5-HT4受体释放乙酰胆碱以增强胃排空蠕动，从而改善了慢性胃炎的上腹部症状，并且不会阻塞多巴胺D2受体。益生菌是一种能够维持包括人在内的动物宿主的胃肠道内肠微生物平衡的活微生物。益生菌在维持肠微生物平衡、改善轮状病毒引起的腹泻，缓解抗生素相关的腹泻，乳糖不耐症和婴儿食物过敏症状，以及调整肠道方面具有有益效果。乳酸菌是用作益生菌的一种最常见的微生物，它能够抑制肠上皮细胞和排泄中的乳酸、脂肪酸、抗生素和过氧化氢从而抑制病原体的生长。肠乳酸菌能够阻止病原体在消化道的上皮细胞上附着以预防病原体诱发的疾病，并产生抗生素杀死引起腹泻的病原体或者抑制其生长。同样，乳酸菌产生乳酸和醋酸来提高胃肠道的整体功能，比如，促进消化道蠕动。因此，用此类益生菌制备的益生菌制剂可用于有效治疗隐源性功能性消化不良。然而，考虑到其功效，5-HT4受体激动剂和益生菌组分应该在肠道内不同地点释放。也就是说，5-HT4受体激动剂应该在胃里快速释放使其快速生效，但由于益生菌在胃中接触到胃液很容易溶解，所以应该在小肠或大肠内缓慢释放。本发明人通过开发一种包含益生菌组分和5-HT4受体激动剂的口服复合制剂提出了本发明，从而实现了活性成分在胃肠道中的快速稳定释放。
相应地，本发明的一个目的在于提供一种用于治疗功能性消化不良或者肠胃失调的口服复合制剂，包含益生菌组分和5-HT4受体激动剂。本发明的另一个目的在于提供一种制备该口服复合制剂的方法。根据本发明的一个方面，提供了一种口服复合制剂，所述复合制剂包括胶囊，该胶囊包含含有益生菌和可药用的赋形剂的核；包覆在胶囊上的肠溶衣层；以及包含5-HT4受体激动剂的5-HT4受体激动剂层，其中该5-HT4受体激动剂层形成在该肠溶衣层的表面。根据本发明的另一方面，提供了一种制备该口服复合制剂的方法，包括如下步骤I)混合益生菌和可药用的赋形剂以得到核；2)将该核填充到胶囊中；3)包覆该胶囊以在其上形成肠溶衣层；4)包覆该肠溶衣层以在其上形成5-HT4受体激动剂层。 结合附图，本发明的上述以及其他目的和特征将从以下对本发明的描述中得以体现。附图分别为图I :例I和例2的复合制剂以及加斯清(Gasmotin)的溶解曲线；图2 :例2的经过高温条件老化后的复合制剂的溶解曲线。
分离层可以以小于15% (重量)的量包覆在肠溶衣组分的表面，优选为O. 1% -10% (重量)，更优选为1%-5% (重量)，基于核的总重量。〈5-HT4受体激动剂层>如果被肠溶衣层包围，5-HT4受体激动剂可能在小肠或大肠内释放，因而不会诱导胃肠道的快速蠕动。所以，5-HT4受体激动剂不应该被肠溶衣层包覆，而应该单独地包覆在肠溶衣层的表面。在本发明中，所述5-HT4受体激动剂层可以通过以下方式形成，将5-HT4受体激动剂(如西沙比利、莫沙必利或伊托必利)分散或溶解于含有聚合物的水溶液中，该聚合物选自由聚乙烯吡咯烷酮、聚乙烯醇、聚乙烯醋酸盐、羟丙基纤维素、甲基纤维素、乙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羟甲基纤维素钠及其混合物组成的群组，并且该聚合物溶于水或能够在水中快速分解；将获得的混合物层叠于肠溶衣层的表面。5-HT4受体激动剂层可进一步包含添加剂，比如增塑剂、染色剂和抗静电剂。5-HT4受体激动剂层的数量受期望溶解曲线的限制，然而，5-HT4受体激动剂层可以以0.1%-50% (重量)的量包覆在肠溶衣组分的表面，优选为I %-30% (重量)，更优选为5%-15% (重量)，基于核的总重量。在本发明优选的实施例中，5-HT4受体激动剂层进一步包含碱化剂以提高本发明复合制剂的老化稳定性。本发明中使用的碱化剂可以选自由葡甲胺、组氨酸、精氨酸、氧化镁、磷酸钠、磷酸氢二钠、磷酸钾、磷酸氢二钾、娃酸招镁(magnesium methasilicate aluminate)、碳酸镁和苯甲酸钠组成的群组，其中优选为葡甲胺、组氨酸和精氨酸。使用的碱化剂的重量百分比可以在1% -500%的范围内，优选为10% -250%，更优选为50% -150%，基于5-HT4受体激动剂的总重量。本发明还提供了一种制备本发明的口服复合制剂的方法，包括以下步骤1.混合益生菌与可药用的赋形剂以获得核；2.填充该核在胶囊中；3.包覆该胶囊以在其上形成肠溶衣层；4.包覆该肠溶衣层以在其上形成5-HT4受体激动剂层。用以下例子进一步说明本发明，但并不限制本发明的范围。例子〈制备口服复合制剂〉例I
步骤I :制备核将2500克枯草芽孢杆菌和屎链球菌菌株培养(Institut Rosell Inc.，加拿大)、48克乳糖、26克滑石粉和26克硬脂酸镁放在一个双椎混合机中以IOrpm的速度混合30分钟，然后将得到的混合物填充于胶囊中(大约10000个胶囊)。步骤2:制备肠溶衣层将500克羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯、30克单甘油酯、83克羟丙基纤维素和30克浓缩甘油溶解于1500克乙醇和3750克丙酮中，然后将得到的混合物喷涂于步骤I所得的胶囊(大约3250克)上以制备大约10000个肠溶衣胶囊。步骤3 :制备5-HT4受体激动剂层将52. 9克脱水枸橼酸莫沙必利、260克羟丙基甲基纤维素、24克聚乙二醇和40克 聚乙烯吡咯烷酮溶解于1000克蒸馏水和2500克乙醇的混合物中，然后将得到的混合物喷涂于步骤2中制备的肠溶衣胶囊上，从而获得10000个本发明的复合制剂的胶囊。例2步骤I :制备核将2500克枯草芽孢杆菌和屎链球菌菌株培养(Institut Rosell Inc.，加拿大)、48克乳糖、26克滑石粉和26克硬脂酸镁放在一个双椎混合机中以IOrpm的速度混合30分钟，然后将得到的混合物填充于胶囊中(大约10000个胶囊)。步骤2:制备肠溶衣层将500克羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯、30克单甘油酯、83克羟丙基纤维素和30克浓缩甘油溶解于1500克乙醇和3750克丙酮中，然后将得到的混合物喷涂于步骤I所得的胶囊(大约3250克)上以制备大约10000个肠溶衣胶囊。步骤3:制备分离层将650克羟丙基甲基纤维素和6克聚乙二醇溶解于240克蒸馏水和560克乙醇中，然后将得到的混合物喷涂于步骤2所得的肠溶衣胶囊上。步骤4 :制备5-HT4受体激动剂层将52. 9克脱水枸橼酸莫沙必利、260克羟丙基甲基纤维素、24克聚乙二醇和40克聚乙烯吡咯烷酮溶解于1000克蒸馏水和2500克乙醇的混合物中，然后将得到的混合物喷涂于步骤3中所得的肠溶衣胶囊上，从而获得10000个本发明的复合制剂的胶囊。例3除了步骤4中进一步使用52. 9克精氨酸以外，重复例2的过程以制备本发明的复合制剂。例4除了步骤4中进一步使用52. 9克组氨酸以外，重复例2的过程以制备本发明的复合制剂。例5除了步骤4中进一步使用52. 9克葡甲胺以外，重复例2的过程以制备本发明的复合制剂。测试例I :溶解曲线试验分别使用人工胃液(pH I. 2)通过溶解试验将例I和例2制备的复合制剂与加斯清药片(Daewoong Co. Ltd.,枸橼酸莫沙必利)进行对比，结果如图I所示。溶解试验采用桨板法，将900毫升人工胃液在50rpm的转速下加热到37±0. 5°C。如果是胶囊，则使用铅垂。如图I所示，例I和例2制备的复合制剂的释放形式与加斯清药片的释放形式相似，因此得出结论，活性成分的从本发明的复合制剂中的释放速率没有因为喷涂包覆而降低。测试例2 :高温条件下的稳定性将例2制备的复合制剂装在高密度聚乙烯瓶中，并在60±2°C的高温条件下在恒温容器中进行老化。将1、2、4周之后的样品用于测试例I公开的溶解试验，其结果如图2所示。 测试例3 :稳定性 将例1-5所制备的复合制剂装于一个高密度聚乙烯瓶中，每个样品都在60±5°C的高温条件下在恒温容器中进行老化。确定保持了 1、2、4周以后的每种样品中的5-HT4受体激动剂相对于初始量的数量，其结果如表I所示。〈表1>
初始量一周后数两周后数三周后数四周后数 量量量量
100% 98.3% 96.5% 95.9% 95.5%~100% 97.6% 96.2% 95.5% 95.1%— Im 100% 99.2% 98.8% 98.7% 98.5%~ Im 100% 99.8% 99.6% 99.3% 99.2%~
100% 99.9% 99.6% 99.6% 99.5%如表I所示，即使包含碱化剂，本发明的复合制剂稳定地保持了 5-HT4受体激动剂的含量。尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的技术人员应该理解其仍然可以对前述实施例进行修改和改变，而这些修改和变化仍然属于所附权利要求定义的本发明的范围之内。


本发明公开了一种包含益生菌组分和5-HT4受体激动剂的口服复合制剂及其制备方法。