一种药食同源性植物提取物抗敏剂的制备方法及应用的制作方法【技术领域】[0001]本发明属于生物【技术领域】，具体涉及一种药食同源性植物提取物抗敏剂的制备方法及应用。[0002]发明背景 芡，睡莲科芡属，一年生大型水生植物，主要生长于沟、塘、湖泊、滩地等淡水源充足的地区。芡的果实通常称为芡实，芡实的种仁不但具有养血安神、益肾固精、去湿健脾、止泻止，改善心脏缺血功能，提高机体抗氧化能力等多种药用功效，而且因含有多种营养成分，口感软糯，食用方便，近年来，休闲文化食品市场对其需求越来越大。芡实不但具有药用、食用价值，芡实种子的外壳皮中也含有功能性活性分子的成分。[0003]马齿苋为马齿苋科一年生草本植物，性寒味酸，具有清热解毒、消肿止痛、利水祛湿、散血消肿、杀虫杀菌的作用。[0004]本发明利用天然产物分离、纯化的常规方法，从芡实种子外壳皮中提取到了具有良好抗过敏作用的物质，并辅以马齿苋提取物和维生素C，制备成一种药食同源性植物提取物抗敏剂。 [0005]该发明不但开发出了芡实种子外壳(芡实加工废弃物)皮的新用途，而且增加了芡实的附加值。该发明具有很好的社会效益、经济效益，具有很好的商品化生产前景。
[0006](一)本发明要解决的技术问题: 本发明主要提供一种药食同源性植物提取物抗敏剂的制备方法及应用，其要解决的技术问题主要包括(I)芡实种子外壳皮细胞中有效成分的释放；(2)芡实种子外壳皮细胞裂解溶液抗过敏活性的确定；(3)马齿苋活性物质的提取。
[0007](二)本发明的技术方案:一种药食同源性植物提取物抗敏剂的制备方法，按照下述步骤进行:
(O芡实种子放入水磨搅拌设备中，加入质量浓度为0.9 %的生理盐水，芡实种子与生理盐水的质量比为2:1-6:1。使芡实种子在水磨搅拌设备中充分进行水磨处理15-30分钟。水磨结束后，通过直径略小于芡种子直径的筛网进行过滤，收集过滤后的液体即为混合物
(2)混合物一静置后，收集上清液得混合物二，并收集静置后的沉淀得沉淀一。沉淀一与质量浓度为0.9%生理盐水以1:8—1:16的质量比进行混悬，得混合物三；
(3)将混合物三溶液在800-1000瓦功率超声波条件下，(TC超声处理60分钟。超声处理后的溶液4°C静，1-2小时后取上清液得混合物四；
(4)合并混合物二和混合物四得到混合物五；
(5)称取新鲜干净的马齿苋剪碎后加入质量浓度为0.9%生理盐水匀浆处理5分钟，马齿苋与生理盐水的质量比为1:8-1:16 ;将匀浆后的马齿苋混合物以10000转/分钟的速度离心，收集离心上清，得到马齿苋提取物。[0008](6)在混合物五加入辅助作用成分维生素C及马齿苋提取物，混合物五与维生素C及马齿苋提取物的质量比为200:1:10-50:1:5,充分溶解后，过滤法除菌处理后即制得“一种药食同源性植物提取物抗敏剂”。
[0009]将一种药食同源性植物提取物抗敏剂应用于不同案例，通过志愿者患者使用本发明制备的抗敏剂，验证本发明制备的抗敏剂的抗过敏效应。
[0010]本发明的有益效果:
芡实种壳是一种芡实生产企业的废弃物，本发明不但研究出药食同源性植物中提取并制备具有明显抗过敏效应物质的方法，而且该发明还具有许多有益效果。具体如下:
(I)经济效益:使芡实加工废物(芡实壳)变废为宝，增加了芡实的附加值，提高了芡实生产企业的经济效益。
[0011](2)社会效益:本发明研究出一种新的药食同源性植物提取物抗敏剂的方法，该物质来自食物，因此副作用相对较小，可用于广泛的人群(婴幼儿，青少年，中老年人)。这为下一步开发新型绿色抗皮肤过敏制剂奠定了基础。这在给皮肤过敏性疾病患者带来福音，造福百姓的同时，必将产生广泛的社会效益。



[0012]图1 一种药食同源性植物提取物抗敏剂的制备流程图
图2:—种药食同源性植物提取物抗敏剂抗破伤风抗毒素过敏实例图(详见实施例1)。
[0013]A:注射破伤风抗毒素0.5小时的小臂(过敏红斑面积约8 cm2)；
B:注射破伤风抗毒素I小时的小臂(瘙痒挠抓后出现肿胀，过敏红斑面积约8.5 cm2)；C:注射破伤风抗毒素I小时的小臂(瘙痒挠抓后出现肿胀，过敏红斑面积约8.5cm2),开始涂抹本发明制备的抗敏剂，此后每2小时涂一次；
D:注射破伤风抗毒素13小时的小臂(肿胀减轻，过敏红斑面积约5 cm2)，涂抹本发明中制备的抗敏剂，10小时(晚上睡觉)后再涂一次；
E:注射破伤风抗毒素23小时的小臂(轻微肿胀，过敏红斑面积约4 cm2)，涂抹本发明制备的抗敏剂，此后每2小时涂一次；
F:注射破伤风抗毒素33小时的小臂(无肿胀，过敏红斑面积约I cm2)。
[0014]图3:—种药食同源性植物提取物抗敏剂涂抹破伤风抗毒素局部过敏区不同时间段后的红肿面积示意图(横坐标为过敏红斑涂药后的时间，纵坐标为过敏红斑的面积)
A:过敏红斑涂药后O小时，红斑面积约8.5 cm2 ；
B:过敏红斑涂药后12小时，红斑面积约5.0 cm2 ；
C:过敏红斑涂药后22小时，红斑面积约4.0 cm2 ；
D:过敏红斑涂药后32小时,红斑面积约1.0 cm2 ；

[0015]实施例1 一种药食同源性植物提取物抗敏剂抗破伤风抗毒素过敏实例 I一种药食同源性植物提取物抗敏剂的制备
(I)称取6公斤芡实种子放入大波轮洗衣机中，加入3公斤的0.9 %生理盐水。
[0016]使芡实种子在洗衣机中充分水磨处理15分钟。水磨结束后，通过直径略小于芡种子直径的筛网进行过滤，收集过滤后的液体即为混合物一；
(2)混合物一静置后，收集上清液得混合物二，并收集静置后的沉淀得沉淀一。
将I克沉淀一与8克0.9%生理盐水进行混悬，得混合物三；
(3)将混合物三溶液在800瓦功率超声波条件下，(TC超声处理60分钟。超声处理后的溶液4°C静，I小时后取上清液得混合物四；
(4)合并混合物二和混合物四得到混合物五；
(5)称取10克新鲜、干净的马齿苋剪碎，加入80克0.9%生理盐水匀浆处理5分钟。
[0017]将匀浆后的马齿苋混合物以10000转/分钟的速度离心，收集离心上清，得到马齿觅提取物；
(6)在20克混合物五100毫克维生素C及I克马齿苋提取物，充分溶解后，过滤法除菌处理，即制得“一种药食同源性植物提取物抗敏剂”。(制备流程见图1)
2—种药食同源性植物提取物抗敏剂抗破伤风抗毒素过敏实验(I)在有破伤风抗毒素过敏史的志愿者小臂内侧，皮下注射含15U的破伤风抗毒素(TAT)溶液0.1mKTAT皮试)。0.5小时后，发现志愿者小臂皮试注射部位有面积约8.0 cm2的红色过敏区域(以有红色斑点区域为过敏红斑区域)，没有明显肿胀，也无瘙痒感。
[0018](2)皮试约I小时的时候，志愿者皮试部位有瘙痒感，抓挠后，瘙痒感减弱，但皮试部位出现明显发硬、肿胀， 过敏红斑面积增大了一些，约8.5 cm2。此时，用无菌棉签充分沾取本发明中制备的抗敏剂对皮试部位进行涂抹，此后每2小时涂一次。
[0019](3)涂药12小时后，志愿者皮试部位的过敏红斑面积逐渐变小，红色过敏区域约5.0 cm2。此时已经是晚上九点多，志愿者皮试部位涂抹本发明中制备的抗敏剂后，开始上床休息。
[0020](4)第二天早晨七点左右，志愿者起床，此时红色过敏区域面积约4 cm2，再次涂抹本发明中的抗敏剂，此后每隔2小时涂抹一次该抗敏剂。下午五点的时候，志愿者皮试部位的过敏红斑面积只有约I cm2左右，且过敏红斑有许多地方是点状的，并没有形成一整块的过敏红斑。此时志愿者感觉皮试部位无明显异常。
[0021](5)实施例1经5次破伤风抗毒素过敏志愿者的实验，实验结果均证实本发明中的本发明中制备的抗敏剂对破伤风抗毒素皮试部位的过敏症状有明显的减轻和抑制作用。(见图2)
实施例2 —种药食同源性植物提取物抗敏剂抗过敏性鼻炎实例 I一种药食同源性植物提取物抗敏剂的制备
(1)称取18公斤芡实种子放入大波轮洗衣机中，加入3公斤的0.9 %生理盐水。
[0022]使芡实种子在洗衣机中充分水磨处理30分钟。水磨结束后，通过直径略小于芡种子直径的筛网进行过滤，收集过滤后的液体即为混合物一；
(2)混合物一静置后，收集上清液得混合物二，并收集静置后的沉淀得沉淀一。
将I克沉淀一与16克0.9%生理盐水进行混悬，得混合物三；
(3)将混合物三溶液在1000瓦功率超声波条件下，(TC超声处理60分钟。超声处理后的溶液4°C静，2小时后取上清液得混合物四；
(4)合并混合物二和混合物四得到混合物五；
(5)称取10克新鲜、干净的马齿苋剪碎，加入160克0.9%生理盐水匀浆处理5分钟。将匀浆后的马齿苋混合物以10000转/分钟的速度离心，收集离心上清，得到马齿苋提取物；
(6)在50克混合物五I克维生素C及5克马齿苋提取物，充分溶解后，过滤法除菌处理，即制得“一种药食同源性植物提取物抗敏剂”。
[0023]—种药食同源性植物提取物抗敏剂抗过敏性鼻炎实例
(I)医院确诊为“过敏性鼻炎”的志愿者，其有频繁的打喷嚏、流清鼻涕和严重的鼻塞症状。志愿者鼻塞无法正常呼吸，需要借助嘴巴呼吸，非常痛苦。
[0024]( 2 )用无菌棉签充分沾取本发明中的制备的抗敏剂涂抹于志愿者鼻腔内侧的所有地方，尽可能地向鼻腔里侧涂抹。每隔3小时涂抹一次该抗敏剂(夜晚休息时除外)。
[0025](3)第一次涂抹抗敏剂当时，鼻塞感依旧严重，打喷嚏次数仍比较频繁。涂抹2次本发明中的抗敏剂后，志愿者感觉鼻腔可以吸入一点点空气，打喷嚏次数减少一些，依旧有
清鼻涕。
[0026](4)涂药3-7次的时候，虽然鼻腔呼吸状态没有完全通畅，但是能感觉到鼻腔吸气、呼气状态明显改善，志愿者可以闭上嘴巴，用鼻子呼吸。打喷嚏次数明显减少，流清鼻涕的症状得到明显改善 。(见图3)。