专利名称：：竹红菌提取物及其制备方法和应用的制作方法：：本发明涉及一种竹红茵提取物，更具体地说，本发明涉及一种以滇产竹红菌为原料的提取物。同时，本发明还涉及一种所述竹红菌提取物的制备方法及其在制药领域中的新用途。竹红菌(Hypocrellabambusae(B.et.Br.)Sacc.)属子囊菌纲、肉座菌目、肉座菌科，是寄生在竹叶梗部的一种天然菌，产于云南省丽江地区，民间常用它泡酒内服治疗胃痛及关节炎。药材市场上有干燥的竹红菌出售。日常生活中，烧伤、烫伤事故时有发生，由于二、三度烧伤、烫伤愈合后所产生的肥厚性瘢痕或瘢痕挛缩以及在皮肤科所见的瘢痕疙瘩(Keloid)和外科手术后瘢痕过长都是人体皮肤结缔组织修复和增生的结果。一旦瘢痕疙瘩形成后局部可有发痒、发痛症状。甚至以后由于瘢痕挛缩而影响关节的曲伸活动，造成很大的痛苦，所以患者期待治疗的心情十分迫切。现有技术中，采用外科治疗瘢痕是比较有效的措施，可是仍有许多瘢痕疙瘩由于其发生的部位和性质的特殊性，不能获得令人满意的结果。人们对此进行了不断的探索，提出了多种非手术治疗的方法，但迄今为止，仍是一个尚未圆满解决的技术难题，对大面积的瘢痕更是缺少有效方法。妇女外阴白斑系一种外阴白色病变，由于病因尚未明确，比较顽固难治，国内外提出的治疗方法颇多。曾采用手术切除，但复发率高达58.3％；也有用消炎药、可的松类药物治疗；或用中草药煎剂浸泡、涂沫，穴位注射，激光治疗等综合疗法有一定效果，但停止治疗后，部分患者在不同时间后症状又复发。目前尚无一种可以恢复其组织变化的理想药物。白癜风，又称白斑病，中医称白驳风，本病属一种后天性色素代谢失调引起的皮肤色素消失症。色素消失区黑色素细胞破坏，皮肤患区呈白色，分局限型和冷发型，病发年龄不一，呈片状大小不一致，影响美观，给患者带来了很大的精神压力。本发明的目的在于提供一种云南特有的天然产物竹红菌为原料的提取物。本发明的另一个目的在于提供一种竹红菌提取物制备方法。本发明的目的还在于提供一种竹红菌提取物在制备光化学疗法及光敏作用的药物中的应用。本发明的目的可通过以下的技术方案来实现本发明的竹红菌提取物，为竹红菌浸膏，其中含竹红菌甲素不得少于15％，竹红菌甲素的分子式(C30H20O10)，竹红菌甲素的化学结构为本发明的竹红菌提取物的各种剂型可以按照药学领域的常规生产方法制备。例如将提取物与一种或多种载体混合，然后将其制成所需的剂型。本发明优选的形式是竹红菌软膏。竹红茵提取物的制备方法包括下述顺序的步骤1、以市售的竹红菌药材为原料；2、将竹红菌药材粉碎成粗粉；3、称取竹红菌粗粉70～90kg投入多功能提取罐中，加75％～85％乙醇热回流，强制循环，提取两次，第一次7～9倍量2～4小时，第二次5～7倍量1～3小时，合并两次提取滤液于真空浓缩罐内回收乙醇至浓缩液比重为1.10～1.40，加入4～6倍量丙酮趁热搅拌回流8～15分钟后，静置冷却至室温，过滤，回收丙酮；4、放出竹红菌提取物，密闭，避光保存，产品检验合格后入库，备用。发明人发现本发明的竹红菌提取物具有改善病变组织的血循环、营养状况及代谢，促进病变组织恢复，主要用于疤痕疙瘩及外阴白色病变，也可用于外阴骚痒及外阴炎。还发现对白瘢风也有良好的治疗效果。为了更好地理解本发明的实质，下面将用本发明的竹红菌提取物制成的竹红菌软膏的药理试验及结果来说明在制药领域中的用途。根据竹红菌提取物中竹红菌甲素的含量，按含竹红菌甲素不得少于15％计算投料，羊毛脂100克，黄凡士林加至1000克；将混料置于容器内，在水浴上加热，控制温度在70～80℃，不断搅拌热浴解2～3小时，待冷至50℃以下，再搅拌30分钟，即得竹红菌软膏，备用。1、小鼠的急性毒性试验①选用17～23克小鼠，雌雄不拘，随机分组，每组10只，分别以竹红菌甲素纯品口服及竹红菌油剂皮下注射，观察1～2周内的小鼠死亡率，计算LD50，实验在照光及避光两种条件下进行，结果见表1。表1．<tablesid="table1"num="001"><table>项目给药途径照光条件LD50mg/Kg(7天)竹红菌甲素口服400瓦汞灯，照距50cm，每天照射7小时，共7天1506±510避光＞5000油剂皮注400瓦汞灯，照距20cm，给药半小时后，照光1小时，357±50</table></tables>动物中毒症状、抓耳、搔颈、舔尾、打圈、不安、惊跳、惊厥；曝光部位皮肤充血，肿胀、皱折，表皮结痂、脱落。避光组无上述表现。②经皮染毒小鼠10只，放入自制的玻质染毒器中，将鼠尾浸于竹红菌油剂中3小时，取出立即用400瓦汞灯照光1小时。结果在照光中未见到任何全身光敏反应症状，而口服给药即使在给药1星期后仍可能出现光敏反应的症状，说明经皮吸收至全身的药物是很微量的。在动物试验中，采用与临床相似的给药条件并把剂量加以扩大，采用皮肤透性3倍于人的家兔为试验动物，因此，所观察到的反应实际是被扩大的。但是经一个月的亚急性毒性试验中，除观察到可恢复的局部光毒性皮炎反应及轻度的体重下降外，在血红旦白含量、红白血球数，NPT、SGPT等方面均与对照组无明显差异，病理学检查主要脏器无明显器质性改变。联系到较大的口服及皮下注射的半数致死量，综合临床及动物试验两方面的情况，可以认为竹红菌软膏的外用是安全的。2、病理组织学研究①材料取自12例肥厚性瘢痕损害的组织，分别于治疗前、治疗30次和治疗60次，共取材三次。②方法用95％酒精固定、包埋、切片、作H、E、常规染色，部分加作Van-Gibson染色。③结果6例其治疗前后的组织切片有较明显的改变。显示于治疗后增生的瘢痕中胶元纤维变性显著，细胞核深染及变小，胞浆有的呈空泡状或不显，Van-Gibson染色(樊基森染色)呈桔红色，细胞间隙增大，显得疏松，除胶元纤维变性外尚可见治疗后有血管增生。其余6例也有以上改变，只是程度上较轻。④病理组织改变与临床治疗的关系经取材的12例病例是经治疗60次，临床有显著疗效者为10例，有效者为2例，病理组织观察有明显组织学上的6例中，5例为临床上有显著疗效，1例为有效。3、治疗瘢痕疙瘩的临床研究①病例对77例肥厚性瘢痕、瘢痕挛缩、手术后瘢痕和瘢痕疙瘩进行治疗观察一年时间，77例中烧、烫伤瘢痕占54例，手术后瘢痕8例，自发性瘢痕疙瘩15例。②治疗方法将竹红菌甲素素软膏薄涂于患处，加予轻揉3～5分钟，30分钟后用400瓦照明荧光高压汞灯照射30分钟，汞灯距离为15～30厘米，每天治疗一次，星期天休息，30次为一疗程。接受治疗的患者于治疗室内戴光黑眼睛以防强光刺激，也可日光照晒。③疗效统计治疗77例中，显著有效41例，占53％，有效34例，占44％，无效2例占3％，总的有效率为97％。④77例中均无全身不良反应。4、治疗外阴白色病变的临床研究①病例312例患者奶油为4～72岁，病程为半年至25年，平均5.2年，全部患者皆于治疗前在外阴部明显的白色病变部位取活体组织1～2处，由专人作病检。病理诊断分四类，其中32例治愈和显效的患者，在治疗后于前次火箭没组织的邻近部位复检，并与治疗前的活检组织对比观察。②方法活检组织用常规制片，HE染色，部分病例和32例治疗前后的活检组织作连续切片和加用Van-Gieson及Verhoeff弹力纤维染色观察。③临床疗效312例治疗效果，见表2。一般治疗10次左右，搔痒症状逐渐减轻或消失，病变范围于治疗1～2个疗程后逐渐缩小，在大片白色病变区域中，先有点片状色泽恢复。病变范围小者见效快。硬化性萎缩性苔藓所需疗程较长，最长达120次以上方显效。表2.<tablesid="table2"num="002"><table>诊断痊愈显效好转有效无效硬化性萎缩性苔藓15.63％(10例)53.13％(34例)28.13％(18例)96.88％(62例)3.12％(2例)局限性神经性皮炎21.21％(7例)48.48％(16例)27.27％(9例)96.97％(32例)3.03％(1例)慢性非特异性外阴炎17.76％(38例)52.80％(113例)36.64％(57例)97.20％(208例)2.80％(6例)扁平苔藓1例1例0</table></tables>经观察用竹红菌软膏加光疗治疗外阴白色病变312例，有效率97.12％。获得痊愈和显效的32例。治疗前后的组织，在病变组织中缺乏或减少的小血管有不同程度的再生或新生，使病变组织的血循环得以改善，同时改善了细胞的营养状况、代谢过程和真皮组织内的纤维母细胞功能，从而使硬化萎缩的组织软化，细胞逐渐增长而恢复正常状态，也使巳增生的上皮组织恢复正常，如慢性非特异性外阴炎和神经性皮炎伸长的上皮脚，经治疗后逐渐缩短，排列拥挤的细胞恢复正常的排列状态。这种可复性变化，同样见于竹红菌软膏加光疗治疗瘢痕疙瘩，由于有小血管增生，瘢痕中胶原纤维变性，使硬化的瘢痕软化，从而改善或恢复了活动功能。从以上结果，可以得出本发明的优点在于1、所作的有关化学成分，光敏活性、毒性试验、临床观察和病理组织观察等研究说明，竹红菌软膏加光疗局部应用是比较安全而有效的。本发明的竹红菌提取物是一种新的光敏药物。这种疗法对局部组织细胞有改善和恢复正常组织形态的作用，为治疗瘢痕疙瘩、外阴白色病变以及白癜风等疑难病症提示了一种治疗的新途径，带来了意想不到的突出效果。2、以云南特有的天然产物为原料，来源丰富、成本低廉、制备工艺简单，适于推广应用，具有良好的药用前景。3、本发明对竹红菌的提取物发掘了新的医疗用途，开拓了一个新的应用领域。本发明的实施无疑对发展边疆经济，帮助云南山区群众脱贫致富具有积极作用。下面描述本发明的几个实施例，但本发明的内容完全不局限于此。实施例1以市售的竹红菌药材为原料，将其粉碎成粗粉；称取竹红菌粗粉80kg投入多功能提取罐中，加80％乙醇热回流，竹红菌与乙醇的重量比为1∶14；强制循环，提取两次，第一次8倍量3小时，第二次6倍量2小时，合并两次提取滤液于真空浓缩罐内回收乙醇至浓缩液比重为1.20，加入5倍量的丙酮趁热搅拌回流10分钟后，静置冷却至室温，过滤，回收丙酮后即得到本发明的竹红菌提取物，其中竹红菌甲素的含量为15％，。实施例2取用实施例1的方法得到的竹红菌提取物100克，羊毛脂100克，凡士林800克，置于清洁干燥的配料桶内备用，在水浴上加热，控制温度为70～80℃，不断搅拌热溶解3个小时，待冷至40℃，搅拌30分钟，即制得竹红菌素软膏，含竹红菌甲素≥2.0％。取样送检，检验合格后进行灌封，即得成品。实施例3取用实施例1的方法得到的竹红菌提取物10kg，二甲亚砜10kg，羊毛脂20kg，凡士林60kg，用实施例2的方法竹红菌软膏，软膏中含竹红茵甲素3.1％。实施例4取用实施例1的方法得到的竹红菌提取物10g，二甲亚砜3g，菜子油87g，搅拌均匀，密封消毒，制得竹红菌油剂，油剂中含竹红菌甲素1.8％。应用实施例1某男，22岁，铜矿工人，由于抢险救火烧伤面部、颈部、双手背及手掌，经在当地医院住院治疗三个月出院，以后被烧伤部位均发生肥厚性瘢痕，尤以口周、颈前、双手背及手指为甚。右手腕外侧瘢痕疙瘩厚约1.5公分。右手腕关节屈曲受限制。双手指背部瘢痕亦较厚而坚实，手指不能屈曲持物，依靠他人喂饭。于一个月后开始接受竹红茵光化疗，即用竹红菌软膏薄涂于患处，轻揉5分钟，30分钟后，用400瓦照明荧光高压汞灯照射30分钟，汞灯距离为20公分。经治疗三次后，瘢痕疙瘩开始变软，治疗七次后，痒痛症状减轻，30次后颈部、手部、手指部位瘢痕疙瘩逐渐缩小、变软、变平一半。腕关节和指关节能作屈曲动作。50次后手指可以握紧，可持针绣花，并且经过治疗的瘢痕疙瘩有部分恢复出汗，现已恢复正常工作。应用实施例2某女，34岁，技术员，外阴奇痒钻心6年，用白斑擦剂治疗200次左右，痒止一年多又复发，检查外阴阴蒂部灰白约3×1厘米，有1平方厘米特别粗糙，病检为慢性非特异性外阴炎，用竹红茵软膏加高压汞灯光照34次痊愈，停治三月后复查，自觉无不适，外阴皮肤正常。应用实施例3按照白癜风的临床诊断标准为①通常为面部对称分布的淡褐色至深褐色边界清楚的斑片，无炎症表现及鳞屑；②无明显自觉症状；③主要发生在青春期的男女，多见女性；④无明显内分泌等疾病可查出，排除其它疾病引起的色素沉着；⑤色素沉着平均光密度值大干自身面部平均光密度值的20％以上。治疗判断标准如下痊愈--白斑全部消退；显效--恢复正常肤色的面积占皮损面积＞70％；有效恢复正常面积占皮损面积＞10％；无效恢复正常面积占皮损面积＜10％。本发明对自癜风作了相应的动物试验，疗程两个月，已取得阶段性的试验结果，证明竹红菌的提取物可制备成治疗白癜风的有效药物。权利要求1.一种竹红菌提取物，该提取物可由下述方法制备获得以竹红菌药材为原料，将竹红菌药材粉碎成粗粉；称取竹红菌粗粉70～90kg投入多功能提取罐中，加75％～85％乙醇热回流，强制循环，提取两次，第一次7～9倍量2～4小时，第二次5～7倍量1～3小时，合并两次提取滤液于真空浓缩罐内回收乙醇至浓缩液比重为1.10～1.40，加入4～6倍量的丙酮趁热搅拌回流8～15分钟后，静置冷却至室温，过滤，回收丙酮后即得到竹红菌提取物。2.按照权利要求1的竹红菌提取物，其中所述的竹红菌药材为经干燥的云南特有的天然产物竹红茵。3.一种竹红菌提取物的制备方法，该方法包括下述顺序的步骤①以竹红茵药材为原料；②将竹红菌药材粉碎成粗粉；③称取竹红茵粗粉70～90kg投入多功能提取罐中，加75％～85％乙醇热回流，强制循环，提取两次，第一次7～9倍量2～4小时，第二次5～7倍量1～3小时，合并两次提取滤液于真空浓缩罐内回收乙醇至浓缩液比重为1.10～1.40，加入4～6倍量的丙酮趁热搅拌回流8～15分钟后，静置冷却至室温，过滤，回收丙酮后即得竹红菌的提取物。④放出，密闭，避光保存，产品检验合格后入库，备用。4.按照权利要求3的制备方法，进一步包括将步骤③所得的竹红菌提取物，入辅料，搅拌均匀制成竹红菌软膏或竹红菌油剂。5.权利要求1所述的竹红菌提取物在制备光化学疗法及光敏作用的药物中的应用。6.权利要求1所述的竹红菌提取物在制备治疗疤痕疙瘩的药物中的应用。7.权利要求1所述的竹红菌提取物在制备治疗外阴白色病变的药物中的应用。8.权利要求1所述的竹红菌提取物在制备治疗白癜风的药物中的应用。全文摘要本发明提供了一种竹红菌提取物及其制备方法和应用。是以竹红菌粗粉为原料,投入多功能提取罐中,加乙醇热回流,强制循环提取,滤液经真空浓缩,并采用丙酮热提、分离得到的。竹红菌提取物可加入辅料,搅拌均匀制成竹红菌软膏或竹红菌油剂。可作为光化学疗法及光敏作用的药物,应用于制备治疗疤痕疙瘩或外阴白色病变或白癜风的药物。文档编号A61P41/00GK1284494SQ0011312公开日2001年2月21日申请日期2000年8月22日优先权日2000年8月22日发明者张巧云,乔昆,邱明鸿,徐小珂,厉明申请人:云南医药工业股份有限公司