专利名称：呋喃二烯的用途的制作方法中药有效成分是其发挥药效作用的物质基础，有效物质的清晰与系统全面的质量 控制是中药现代化的关键和核心，将中药的疗效物质药效研究清楚，从而代替中药有效部 位或提取物，才能保障其质量均一、疗效稳定、安全可控，成为标准有效成分，作为原料药制 备成药物，因此，对中药有效成分中进行深入的研究，具有深远的意义，有助于中药现代化、 有助于中药走向世界，更加有利于人类的身体健康。呋喃二烯是中药莪术中有效成分之一，中国专利(申请号为200710169718. 3)公 开呋喃二烯用来治疗喉癌、白血病、脑胶质瘤、腹水癌等。呋喃二烯能够治疗宫颈癌。宫颈癌的致病因素现今未研究清楚，现研究较多的认为其发病机制主要包括人乳 头瘤病毒、疱疹病毒、人类免疫缺陷病毒(病毒致宫颈癌发病机制的研究进展；杨丽丽、佟 秀琴；内蒙古医学杂志hner Mongolia Med J 2009年第41卷第8期)，衣原体、细菌性感 染、滴虫等(生殖道感染与宫颈癌前病变及宫颈癌的相关性分析；杨洁；中国实用医药2010 年9月第5卷第27期)，因此，在众多导致宫颈癌因素中，证明呋喃二烯对什么原因导致宫 颈癌具有治疗作用至关重要，而这种深入的研究，可以很好的确证呋喃二烯能够很好的治 疗宫颈癌这种疾病，为呋喃二烯药效机理的揭示，为呋喃二烯在新药研发过程中，提供了确 切的、深入的理论基础。
基于上述原因，本公司的科研人员通过实验研究，从众多宫颈癌的致病因素中，研 究并证明了呋喃二烯对HPV感染具有很好的治疗作用，说明呋喃二烯对HPV感染导致的宫 颈癌具有很好的治疗作用；特别是含量大于等于50 %的呋喃二烯，与市售莪术油比较，具 有更好的药理作用；与含量小于50%呋喃二烯比较，也具有更好的药理作用。本发明通过下述技术方案实现的。呋喃二烯在制备治疗HPV感染药物中的应用。呋喃二烯在制备治疗HPV感染的宫颈疾病药物中的应用呋喃二烯在制备治疗HPV感染的宫颈癌药物中的应用呋喃二烯含量大于等于50%小于100%。其中HPV为高危型人乳头瘤病毒亚型或低危型人乳头瘤病毒亚型。其中HPV 类型为 16、18、26、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、66、59、68、73 和 82 型中的一种或几种。其中HPV 类型为 6、11、40、42、43、44、54、61、70、72、81、83 和 89 型一种或几种。其中呋喃二烯作用部位包括但不限于HPV中E6和E7蛋白。其中呋喃二烯为活性成分的药物制剂。其中药物制剂为口服制剂、注射制剂、阴道制剂或直肠制剂。其中口服制剂为片剂、颗粒剂、胶囊剂、滴丸剂或口服液；其中注射制剂为注射乳 剂或冻干粉针剂；其中阴道制剂为栓剂、软胶囊、泡腾片、凝胶剂、软膏剂、阴道片、膜剂或泡 沫剂；其中直肠制剂为栓剂或软胶囊。本发明所述HPV是指人乳头瘤病毒。药理学试验试验1抗人乳头瘤病毒的作用试验试剂HPV核酸扩增(PCR)荧光检测试剂盒(包括DNA提取液1、DNA提取液 2、PCR反应液、Taq酶、UNG)。其他试剂均为分析纯。试验药物试验1组市售莪术油。试验2组含量为49. 3%呋喃二烯。试验3组含量为90. 呋喃二烯。试验方法样品制备将上述试验1组配置成500 μ g/ml溶液；试验2组配置成0. 8 μ g/ml溶 液；将试验3配置成10 μ g/ml溶液；试验3组配置成5 μ g/ml ；试验3组配置成1 μ g/ml ； 试验3组配置成0. 8 μ g/ml ；试验3组配置成0. 4 μ g/ml ；HPV感染标本制备从医院门诊确诊为HPV感染采取的离体标本(HPV类型为16、 52,58混合型)，集中到1只离心管中，称重30mg，用玻璃勻浆器勻浆，再加入5mL生理盐水， 配成6mg/mL的离体混悬液，备用。样品处理的方法用移液枪吸取25 μ L样品液和25 μ L标本混悬液至15mL离心管 中，振摇均勻，使样品与标本能充分作用，置37°C水浴箱培养，在样品处理标本ld、3d、5d、 7d后，各取1组进行以下试验。HPV-DNA的提取从温浴箱中取出经样品处理的标本混悬液，按试剂盒步骤提取 DNA 加入50 μ L生理盐水，混勻后再加入100 μ LDNA提取液，振摇均勻，1200r/min离心 lOmin，弃去上清液，再加入25 μ LDNA提取液2，充分混勻，100°C沸水煮lOmin，1200r/min离 心lOmin，上清液即为HPV-DNA模板。DNA扩增取检测试剂盒中的PCR反应液37.6yL，Taq DNA聚合酶0.4yL， UNGO. 03 μ L于PCR反应管中，再加入HPV-DNA模板2 μ L，扣严管盖，置于定量PCR仪上循环 扩增。HPV-DNA经高温变性、低温退火及延伸进行循环扩增，循环程序设置为37°C，5min; 94°C，Imin ；95°C，5sec ；60°C，30sec，循环 40 次。量标准曲线用荧光探针检测定量，按照检测试剂盒要求，设立4个系列浓度的 HPV-DNA 定量阳性标准品，依次为 5X 107/mL，5X 106/mL，5X 105/mL，5X 104/mL，经 PCR 检测 (其检测灵敏度为1乂107!^，结果小于该浓度者判定为阴性)。以起始拷贝数的自然对数 为横坐标，循环阈值为纵坐标，得到的回归直线为标准曲线，据此对样品的扩增倍数进行定量。试验结果见表1。表1不同试验药物对HPV感染的DNA作用结果本发明属于医药技术领域，本发明公开了呋喃二烯的新用途即呋喃二烯在制备治疗HPV感染药物中应用。本发明通过试验研究，在众多导致宫颈癌的因素中，确定了呋喃二烯对HPV感染导致的宫颈癌具有很好的治疗作用。