专利名称：丹参总酚酸的制备方法丹参为唇形科植物丹参salviz miltiorrhiza Bge.的干燥根及根茎，具有活血祛 瘀、凉血消痈、除烦安神的功效。现代药理研究证实，丹参具有扩张血管、改善微循环、增加 心肌供氧量和供血量、降低心肌耗氧量等作用。丹参主要含有水溶性和脂溶性两大类成分。 脂溶性成分是以丹参酮为代表的醌类化合物，具有明显的抗炎作用；水溶性成分是以原儿 茶醛为代表的酚酸类成分，是治疗心血管系统疾病的主要成分。(富志军等，浓缩、精制及干 燥对复方丹参提取液中水溶性成分的影响.安徽中医学院学报，2003，22 O) :52 目前丹参的水溶性酚酸类成分多采用水提醇沉、水提后过树脂再醇沉(中国专利 CN 1129572A)、水提醇沉后过大孔树脂(中国专利CN 1384090A)或聚酰胺柱(中国专利CN 1242364A)、水提后先后用聚酰胺柱和大孔树脂层析(中国专利CN1459448A)，然后减压或 冷冻干燥等方法来获得。但以上方法制备丹参总酚酸都存在一些问题，影响到产业化和成 品的得率。首先，以上方法中多数采用了水煎煮或长时间加热(50 60°C)的方法提取，而 丹酚酸为一多元酚结构，受热极易氧化降解，失去疗效，因而严重影响产品的质量及疗效； 其次，多数提取方法采用高浓度乙醇沉淀这一步骤，使产业化生产安全性大大降低，乙醇消 耗量大，生产成本高；第三，上述方法提取时，需要大量的浓缩水，不便于工业化大生产，操 作较为复杂；第四，上述方法提取得到的丹参酚酸产率较低，一般在2 4 %，低的产率亦使 工业化生产成本加大，带来困难。
本发明的技术方案是提供了一种丹参总酚酸的提取方法，本发明还提供了含有丹 参总酚酸提取物的药物组合物。本发明通过以下技术方案予以实施a、丹参去杂质，蒸汽软化，切碎成饮片；b、丹参饮片，冷水浸渍，用渗漉法提取，收集渗漉液；C、渗漉液离心，取上清液通过大孔吸附树脂，然后洗脱，先用水洗，再用乙醇洗脱， 收集乙醇洗脱液；d、洗脱液减压浓缩、干燥即得。其中，步骤(a)中，冷水(10 25°C )浸渍时间为6 M小时，渗漉时间为12 24小时。步骤(b)中，大孔吸附树脂为苯乙烯型，上柱药液中丹参酚酸B 树脂(重量比) =1 40 50，洗脱时，水洗脱体积为树脂的1 5倍，乙醇体积为树脂的2 5倍，流速 控制在1 3倍体积/小时。乙醇洗脱浓度为30 95%。步骤(c)中，干燥温度为50 70°C。优选的是，步骤(a)中，冷水浸渍时间为6小时，渗漉时间为M小时。大孔吸附树脂为HPD100，上柱药液中丹参酚酸B 树脂(重量比)=1 40，洗 脱时加水洗脱体积为树脂的1 1. 5倍，乙醇体积为树脂的4倍，流速控制在1 1. 5倍体 积/小时。乙醇洗脱浓度为70 95%。从工业化生产的角度考虑，用70%乙醇洗脱，可使 成本降低，生产安全。上述本发明技术方案各步骤中所有的参数，包括浸渍时间、渗漉速度和时间、大孔 树脂型号、洗脱液体积、乙醇浓度、干燥温度均为通过正交实验筛选所得最佳条件。依照本发明的方法制成的丹参总酚酸，可制成任何一种药剂学上所说的剂型。如 用于口服的片剂、胶囊剂或颗粒剂等形式，用于注射的粉针剂、注射液等。也可配合其它药 物或组分一起制成制剂使用。利用本发明方法得到的丹参总酚酸制备所需药物的各种剂型时，可以按照药学领 域的常规生产方法制备。例如利用本发明方法得到的丹参总酚酸与一种或多种药学上可接 受的载体混合，然后制成相应的剂型。本发明与现有技术相比具有以下优势和特点1、步骤简单、操作方便、易于产业化。本发明克服了现有技术中需要大量浓缩水、 高浓度乙醇的缺陷，简化了生产步骤，优化了生产条件，能耗大大降低，不污染环境，使产业 化生产更容易实现。2、有效成分损失少，成品得率高。本发明避免了现有技术中因加热和醇沉造成酚 酸有效成分的损失，稳定性大大增加，成品得率提高，一般在5%以上，明显高于现有技术所 采用的方法。3、成本低。基于上述两方面的优点，本发明产业化时生产成本较目前采用其它方 法制备丹参总酚酸大大降低，为患者带来了更多利益，也为社会带来了经济效益。以下通过实施例的方式进一步说明本发明的效果。标准曲线的制备分别精密量取对照品溶液(0. 05mg/ml) 1. 0、1· 5、2· 0、2· 5、3· 0ml, 甲醇-水(1 1)稀释并定容于10ml。分别精密吸取上述两种溶液各2ml于比色管中，分 别加入亚硝酸钠(1-20)0. 5ml，放置5min，再加入硝酸铝(1-10)0. 5ml，放置5min，再加入氢 氧化钠试液5ml，摇勻，以相应的溶剂为空白，照分光光度法在500nm波长处测定吸收度，以 吸收度为纵坐标(y)，浓度为横坐标(χ)，绘制标准曲线，并得到丹参总酚酸的计算公式y =9. 167x+0. 0185 (r = 0. 9991)测定法取本品10mg，精密称定，置锥形瓶中，精密加甲醇 水(1 l)25ml，称定重 量，超声至完全溶解为止，放至室温，再称定重量，用甲醇 水(1 1)补足减失的重量，摇 勻，精密量取2ml稀释至10ml，作为供试液。照标准曲线制备项下的方法测定吸收度值，代 入上面公式计算，即得样品中丹参中酚酸的含量。实施例2从中药丹参中提取丹参总酚酸丹参^g，蒸汽软化。切成碎片，加去离子水25L，冷浸渍Mh，渗漉18h，流速2L/h。 收集渗漉液45L，离心，上大孔吸附树脂柱HPD100，用7. 5L水洗脱，再加20L 95%乙醇洗脱， 收集乙醇洗脱液，减压干燥，温度控制在60°C。得丹参酚酸干粉300g，成品产率6%。按实 施例1方法测定，丹酚酸B含量为62. 7 %，总酚酸含量为86. 4%。实施例3从中药丹参中提取丹参总酚酸丹参^g，蒸汽软化。切成碎片，加去离子水25L，冷浸渍12h，渗漉12h，流速2L/h。 收集渗漉液45L，离心，上大孔吸附树脂柱HPD100，用7. 5L水洗脱，再加20L80%乙醇洗脱， 收集乙醇洗脱液，减压干燥，温度控制在60°C。得丹参酚酸干粉275g，成品产率5.5%。按 实施例1方法测定，丹酚酸B含量为61. 5%，总酚酸含量为82. 5%。实施例4胶囊剂的制备丹参总酚酸提取物360g微晶硅胶10. 8g共制成1000粒取丹参总酚酸提取物与微晶硅胶过80目筛混合均勻，充填于1号胶囊中，即得，每 粒含丹参总酚酸提取物360mg。实施例5片剂的制备丹参总酚酸提取物360gPEG600070g滑石粉1.4%共制成1000片取丹参总酚酸提取物与PEG6000、滑石粉过筛混合均勻，干粉直接压片，即得，每片 含丹参总酚酸提取物360mg。实施例6颗粒剂的制备丹参总酚酸提取物360g微晶纤维素70g滑石粉1.4%3%聚维酮乙醇溶液适量共制成500袋取丹参总酚酸提取物与微晶纤维素混合均勻，加3%聚维酮乙醇溶液制软材，过 18目筛制颗粒，50°C干燥30 60min，整粒，加入滑石粉，混勻，装袋，即得，每袋含丹参总酚 酸提取物720mg。实施例7粉针剂的制备丹参总酚酸提取物甘露醇依地酸钙钠注射用水
IOOg 30g 5g 5ml上述组分混合后，冷冻干燥，分装1000支，即得注射用冻干粉。实施例8丹参总酚酸提取物对肾性高血压大鼠血压的影响造模方法雌雄SD大鼠，体重200 220g，实验动物中心提供。腹腔注射戊巴比妥 30mg/kg麻醉大鼠，在大鼠左腰侧行切口，将左侧肾脏牵拉出，分离肾动脉起始部，用0. 2mm 银夹夹住肾动脉，使之狭窄；并以只分离肾动脉但不用银夹狭窄肾动脉作为对照(即假手 术大鼠)，缝合皮肤。术后每两周测定血压一次，血压测定用RBP-IB大鼠血压计(由北京中 日友好医院研制)测定尾动脉收缩压，每次测量时，重复三次，取平均值作为当日血压，术 后5周血压大于18kPa者视为高血压大鼠。实验大鼠分为四组即假手术组、模型组、阳性组、丹参总酚酸提取物组(以下简 称丹参组)，以雷米普利(德国赫斯特公司，批号40ffi42)为阳性对照药物，给药剂量为 lmg/kg/d ；丹参组给药剂量为500mg/kg/d，连续给药4周，假手术组与模型组灌胃等体积的 生理盐水，分别于给药2周、4周后测定大鼠血压值。结果如表1所示。表1丹参总酚酸提取物对肾性高血压大鼠血压两影响(X士s，η = 6)


本发明公开一种丹参总酚酸的制备方法及其用途。其制备方法为:丹参冷水浸渍后，用渗漉法提取，渗漉液通过大孔吸附树脂吸附，洗脱，洗脱液减压浓缩、干燥，即得丹参总酚酸。本发明方法制备丹参总酚酸具有步骤简单、操作方便、成品得率高(一般在5%以上)、能耗少、无污染、安全性高、易于工业化生产的优势和特点。所得的丹参总酚酸可作为防治心脑血管疾病等的药物应用。