专利名称：一种兽用抗菌油、水双混悬型注射用乳剂及其制备方法当前，在兽医药剂学领域，特别是抗菌药制剂学领域普遍使用的剂型是粉散剂、预 混剂、普通水针注射剂、片剂以及颗粒剂等几种常规剂型，此类制剂在控制动物疾病方面发 挥了重要作用。然而，近年来世界各地畜牧业疾病不断蔓延，并且呈现出了混合感染的恶性 循环趋势，常规的药物剂型特别是在抗菌药物领域中的常规剂型很难达到当前治疗细菌感 染性疾病的目的。近几年，兽药工作者对于长效缓释、靶向等新制剂进行了大量的研究，最 为突出的是长效制剂和靶向制剂，该类制剂虽然能在一定程度上应和了兽药药物的某些特 征，如长效用药次数减少、靶向定位准确等，但是由于部分产品一味强调长效而使注射后血 药浓度在相当长的时间内维持在细菌1个MIC上下，而多数低于细菌MPC以下，从而就增大 了细菌耐药突变的几率，因此在很大程度上就诱导了细菌的耐药性，给今后的临床合理用 药造成了很大的困难，以致大大缩短了抗菌药的使用寿命。另一类的靶向药物分为器官靶 向的被动靶向和具有“导航系统”的主动靶向药物，器官靶向药物主要剂型是脂质体、微囊 剂等，虽然从试验数据上分析该类被动器官靶向药物在很大程度上能够产生定向给药的作 用，但是此类新剂型同时面临着成本高、稳定性差以及必须通过静脉注射给药方可达到良 好的药效等缺点，此类缺点导致了该类新制剂无法在临床应用，特别是在抗菌药领域。具有 “导航系统”的主动靶向药物可以通过其他有活性的物质修饰抗菌药物已达到准确定位之 目的，与此同时，成本过高、体内代谢过快以及只针对少数细菌靶向作用完全不能解决我国 当前畜牧业发展的现实问题。对于普通水针注射剂，经肌肉注射后抗菌药物迅速分布扩散到血液循环系统和周 围的组织脏器，从而达到速效的效果。由于动物机体的代谢特点多数抗菌药在体内有效浓 度时间一般为6 12h，这样的半衰期使临床用药次数增至2 3次/天，给实际操作带来 了较大的困难。为了改变此现状兽药工作者近年集中开发长效缓释制剂，并且强调长效的 期限，从而导致了细菌耐药性、药物残留以及长期存留于体内造成了某些器官的功能作用 和基因调控紊乱。故此，开发一类长效和速效相结合的抗菌药物新制剂势在必行，取速效和 长效之优势，弃其弊端，切实符合兽医临床抗菌药物的应用。目前，关于兽药普通水针注射剂的制备方法主要是注射用水、有机溶剂以及稳定 剂等制备的灭菌溶液，一般是澄清透明；普通粉针注射剂制备方法是将原料药以及部分稳 定性辅料无菌分装，注射时经注射用稀释液混合后使用。此二类均属普通型的速效注射液。 当前的长效制剂主要有制备成难以吸收的前体修饰药物、油混悬型的混悬剂、油包水型的 乳剂以及其他能够达到缓慢释放效果长效制剂，因缓慢释放实现持续供药的目的。该两类 制剂在临床应用上均起到了积极的作用。然而，不同类抗菌药的药动学及代谢特点需要采 用不同的剂型已到达其最大使用效果，如内酰胺类抗菌药为时间持续型，必须对其达到相应血药浓度后持续的给药方可发挥其最大效用，喹诺酮类抗菌药为浓度持续型，必须 使其达到相当高的血药浓度并且持续一定时间方可能发挥其药效最大化。因此，本领域的 技术人员迫切的需要找到一种新的制剂可有效的发挥抗菌药物的最大药效，同时在最大程 度上避免了细菌耐药性的产生。
本发明的目的旨在提供一种兽用抗菌药物的注射用新剂型，通过对剂型的改进可 以发挥出药物的速效杀菌及长效杀菌的功能，从而很大程度避免了细菌耐药性的产生。本发明的目的还在于，提供上述兽用抗菌药物的注射用新剂型简单而高效的制备 方法，为畜牧业在药物治疗和保健方面提供的相应的技术支持。本发明是一种兽用抗菌药物新剂型的创制，根据抗菌有效成分在靶动物体内的代 谢特征使该新制剂的最终产物可以将抗菌有效成分等量或非等量分布于油、水不同载体形 成双混悬型乳剂。本发明的双混悬型乳剂经肌肉注射后，抗菌有效成分可以呈“分体式”的 “二次释放”特征，达到速效和长效的结合，从而形成长效和速效的制剂学新概念。本发明的技术方案是一种兽用抗菌油、水双混悬型注射用乳剂，抗菌有效成分分别混悬于油相和水相 中，水相在外层其内包覆有油相。所述油相中含有失水山梨醇脂肪酸酯、PEG和抗氧化剂、油相稳定剂，油相溶剂为 注射用油；所述的水相含有聚氧乙烯失水山梨醇脂肪酸酯、水相稳定剂、乙醇以及明胶，水 相溶剂为注射用水。本发明的油相稳定剂优选为棕榈醇、硬脂酸中一种或两种，通过优选的油相稳定 剂可很好地增加乳化后混悬油相的粘稠度和支撑力；水相稳定剂优选为丙三醇、丙二醇、 β -环糊精中一种或几种，通过优选的水相稳定剂可很好的增加乳化后混悬水相的粘稠度 和承载力。本发明优选的各成分的含量为每IOOOml乳剂含抗菌有效成分50 300g ；失水 山梨醇脂肪酸酯5 10ml, PEG 5 25g，抗氧化剂0. 2 0. 4g，油相稳定剂1 2g，注射 用油250 750ml ；聚氧乙烯失水山梨醇脂肪酸酯5 10ml，丙二醇或丙三醇5 15ml，乙 醇10 25ml，明胶2. 5 7. 5g，注射用水700 200ml。本发明通过分别制备有抗菌有效成分混悬的混悬油相液和混悬水相液；按混悬油 相液与混悬水相液的体积比1 1 5比例，在搅拌混悬水相液的过程中逐步加入混悬油 相液，形成油乳状悬液，将该油乳状悬液加入均质机作用后移至高压乳化机或胶体磨中乳 化；制得双混悬型乳剂，分装、灭菌既得。本发明乳剂的制备方法，包括以下步骤1)制备混悬油相液，将抗菌有效成分、失水山梨醇脂肪酸酯、PEG、油相稳定剂及抗 氧化剂混悬于注射用油中，湿热灭菌后备用；2)制备混悬水相液，将抗菌有效成分、聚氧乙烯失水山梨醇脂肪酸酯、水相稳定 剂、乙醇及明胶混悬于注射用水中，湿热灭菌后备用；3)取上述两种混悬液按油相液与水相液的体积比1 1 5比例，在搅拌混悬水 相液的过程中逐步加入混悬油相液，形成油乳状悬液，将该油乳状悬液加入均质机作用后移至高压乳化机或胶体磨中乳化；制得双混悬型乳剂，分装、灭菌既得。其中混悬油相液制备过程为所述1)步的制备过程为，在注射用油中加入失水 山梨醇脂肪酸酯以及抗氧化剂，并加入油相稳定剂，加热90 110°C范围内搅拌使之溶解 或混悬，维持此温度5 15min，同方向搅拌直至温度降为2048°C，形成油相备用；(运用 固体分散技术制备混悬油相)水浴加热聚乙二醇使之呈熔融状态，然后保持该状态，少量 多次加入抗菌有效成分至聚乙二醇中，同时不断搅拌形成糊状物；将糊状物在-15 -25°C 下冷冻后粉碎，再加入油相中搅拌，灭菌既得混悬油相液。所述2、步中混悬水相液的制备过程为取所需注射用水体积的60 70%加热至 75 85°C，加入明胶不断搅拌并使控制温度至95 100°C，使之混悬或溶解，随后加入水相 稳定剂搅拌至温度降为20-28°C，形成水相备用；将聚氧乙烯失水山梨醇脂肪酸酯和乙醇 混合并逐步加入抗菌有效成分不断搅拌、混勻，加入剩余的注射用水，充分搅拌、混勻后加 入到水相中搅拌使之混悬，灭菌既得混悬水相液。在本发明各个方案中，抗菌有效成分可以为酰胺醇类、氨基糖苷类、四环素类、氟 喹诺酮类、磺胺类、喹恶啉类、硝基呋喃类、提高机体免疫力的植物有效成分提取物或者药 用植物单体中一种或几种。其中所述的提高机体免疫力的植物有效成分提取物可以包括黄 芪多糖提取物、板蓝根提取物、大黄提取物中一种或几种；药用植物单体可以包括小檗碱、 血根碱、白屈红菜碱中一种或几种。本发明选用的抗菌有效成分在水相和油相中均是不溶或微溶的。本发明特点还在于，①制备工艺相对较简单，材料易得，特别适合规模化生产。 ②能够根据不同靶动物对不同抗菌药物的药动学特证设计不同载体量的药物已达到速 效-长效结合与治疗感染的效果，特别适合临床应用。③该双混悬型乳剂的载体可以承载 动物保健性原料以制备复方型动保产品。本发明的优势还在于成功的运用固体分散体技术，将速效注射剂和长效注射剂的 优势特征合理运用，以发挥不同种类兽用抗菌药物的最大药效，从而很大程度避免了细菌 耐药性的产生，因制备工艺较简单，较少的使用了有机溶剂，故大大地降低了产品成本，为 畜牧业在药物治疗和保健方面提供的相应的技术支持。所述乳化时间范围要根据油、水两相的不同比例及抗菌药物的添加量确定。本发明具体的制备工艺为每IOOOml该双混悬型乳剂的原料包括抗菌有效成分 50 300g，注射用油250 750ml，油相稳定剂1 2g，注射用水700 200ml，PEG (优选 4000 6000)5 25g，失水山梨醇脂肪酸酯5 10ml，聚氧乙烯失水山梨醇脂肪酸酯5 10ml，丙二醇5 15ml，乙醇10 25ml，明胶2. 5 7. 5g，以及抗氧化剂。还可为了增强乳 化效果需要加入助表面活性剂，如卵磷脂等。步骤包括1.制备混悬油相液A 将注射用油中加入失水山梨醇脂肪酸酯、卵磷 脂以及抗氧化剂加热90 110°C范围内搅拌使之溶解或混悬，维持此温度5 15min，同 方向搅拌至20-28°C，备用；B:水浴加热PEG使之呈熔融状态，然后保持该状态(温度范围 士5°C )，少量多次加入抗菌有效成分，同时不断搅拌形成糊状；C 将B步得到的糊状物在该 温度状态下迅速涂至_20°C下的钢板上冷冻2. 5 证；D 将C步得到的冷冻成分在-20°C钢 板上取下在粉碎机上作用1 :3min ；E 将D得到的成分，加入到A得到的成分中搅拌5 lOmin，湿热灭菌20 30min后，既得混悬油相(O)。2.制备混悬水相液A 取配方比例的注射用水(配方体积量的60-70% )加热至 75 85°C加入明胶不断搅拌并使控制温度至95 100°C，使之混悬或溶解，随后加入丙二 醇，搅拌至20 ^°C，备用；B 将聚氧乙烯失水山梨醇脂肪酸酯和乙醇混合并逐步加入抗 菌有效成分不断搅拌、混勻，加入剩余的注射用水(配方体积量30-40% )，充分搅拌、混勻 (均为常温下操作)。C 将B步所得成分加入到A步所得成分中搅拌5 IOmin使之混悬， 灭菌既得混悬水相(W)。3.取上述一定比例的两种混悬液乳化25 35min，制备双混悬型乳剂，分装、灭菌 既得。乳化过程为将混悬油相液(0)与混悬水相液(W)按0 W体积比=1 1 5 比例，搅拌W的过程中逐步加入0，形成乳白色油乳状悬液，将该悬液加入均质机作用5 IOmin,然后移至高压乳化机或胶体磨中强度作用(如胶体磨间隙调至0. 2 μ m以下)15min 既得油、水双混悬型乳剂(0/W型)。抗氧化剂可以选自TBHQ或BHT等；配方中根据不同抗菌药的特性需加入特定辅料 以起到稳定及提高生物利用度的效果，如乳酸、氢氧化钠、EDTANa2等。本发明所使用的注射用油包括注射用大豆油、注射用花生油、注射用棉籽油、注射 用蓖麻油、注射用茶油等，质量要求应符合《中国兽药典》二 00五年版规定。本发明的抗菌有效成分混悬于油、水相两层，其含量可以根据不同靶动物的对不 同抗菌药物的药动学特征进行相应的调整。所述分装容器为安瓿瓶或大容量玻璃瓶(50和100ml)，大容量玻璃瓶需丁基胶塞铝盖封口。所述分装条件需在洁净级别100级环境中进行。本发明的优点及有益效果是1.本发明将混悬剂和乳剂的制备工艺有机的结合，根据不同靶动物对于不同抗菌 有效成分的代谢特点制备相应的油、水双混悬型乳剂以发挥其最大药效，同时在最大程度 上避免了细菌耐药性的产生。2.本发明在制备混悬油相的过程中通过采用固体分散体的方式，将兽用抗菌有效 成分在混悬油相中形成固体分散体，使得本发明的油、水双混悬型乳剂更容易使机体吸收 和利用，同时减少了肌肉的刺激性，从而提高了靶动物对药物的生物利用度。3.本发明可在相当程度上解决了对于抗菌有效成分水溶性差或者制成可溶性药 物成本过高及PH值与机体相差较大而造成注射部位疼痛等多种问题。4.本发明运用药物在靶动物体内代谢规律提出一种兽医抗菌药临床应用新理念， 同时对该理念进行实施。5.本发明使用材料易得、工艺相对简便、成本较低、乳剂(0/W型)粘度低，使得通 针性极好便于兽医临床应用，前景广阔，经济和社会效益均明显。附图为本发明制备的油、水双混悬型乳剂及其结构模式1. 20%氟苯尼考油、水双混悬型乳剂；图2. 10 %复方恩诺沙星油、水双混悬型乳剂；
图3.油、水双混悬型乳剂颗粒显微镜照片(100X)；图4.油、水双混悬型乳剂颗粒显微镜照片QOOX)；图5.油、水双混悬型乳剂结构模式图；A-混悬油层(即混悬油相液)，B-混悬水 层(即混悬水相液)，C-抗菌药物(即抗菌有效成分)。

氟苯尼考200g
注射用茶油308ml
丙二醇15ml
乙醇IOml
明胶5g
棕榈醇l.Og
PEG400020g
Span-805. 5ml
Tween-808. 5ml
BHT0. 2g
注射用水633ml
共1000ml制备方法按照上述工艺要求，另外制备两相时氟苯尼考分布于油相为150g，分布 于水相为50g，靶动物为猪和牛。体外抑菌效果以大肠杆菌、沙门氏菌、巴氏杆菌及金黄色葡萄球菌的标准菌株为受试菌，利用二 倍稀释法、平板计数法测定氟苯尼考双混悬型乳剂的MIC和MBC，利用上述数据测定其MPC 值，结果见图1。表1氟苯尼考双混悬型乳剂对四种细菌的体外抗菌结果


一种兽用抗菌油、水双混悬型注射用乳剂，抗菌有效成分分别混悬于油相和水相中，水相在外层其内包覆有油相。本发明根据抗菌有效成分在靶动物体内的代谢特征使该新制剂的最终产物的抗菌有效成分以等量或非等量的方式分布于油、水不同载体形成双混悬型乳剂。该双混悬型乳剂经肌肉注射后，抗菌药物呈“分体式”的“二次释放”特征，已达到速效和长效的结合。本发明特点①制备工艺相对较简单，材料易得，特别适合规模化生产。②能够根据不同靶动物对不同抗菌药物的药动学特证设计不同载体量的药物已达到速效-长效结合与治疗感染的效果，特别适合临床应用。③该双混悬型乳剂的载体可以承载动物保健性原料以制备复方型动保产品。