专利名称：一种肉鸡脾转移因子脂质体溶液的制备方法目前，鸡转移因子(Chicken Transfer Factor，简称CTF)是用以肉鸡脾脏为原料， 经加工、制备而成的一种由低聚核苷酸和多肽组成的不含蛋白质的一种可溶性、可透析、可 超滤的小分子物质。淋巴细胞转移试验和血清学试验监测结果表明鸡转移因子能极显 著提高细胞免疫水平(t > 2.878，P < 0.01 =，显著提高体液免疫水平(t > 2. 101，P < 0. 05 =；单独使用CTF注射液对新城疫，法氏囊病和马立克氏病都有明显的治疗作用， 可降低发病鸡死亡率27. 5-40%,降低马立克氏病发病鸡死亡率5%。现有的肉鸡脾转移因子 制备方法过程复杂，产品质量不稳定，临床使用次数多。
本发明为解决公知技术中存在的技术问题而提供一种肉鸡脾转移因子脂质体溶 液的制备方法。本发明的目的是提供一种具有工艺简单，经济实用，产品性能稳定，临床效果好， 应用范围广等特点的肉鸡脾转移因子脂质体溶液的制备方法。本发明肉鸡脾转移因子脂质体溶液的制备方法为解决公知技术中存在的技术问 题所采取的技术方案是肉鸡脾转移因子脂质体溶液的制备方法，其特点是肉鸡脾转移因子脂质体溶液制备 工艺步骤为，1)鸡转移因子的制备清理肉鸡脾脏清洗，去除脂肪和被膜；粉碎按重量比0. 5-3:1脾脏和水混合，用组织捣碎机粉碎；反复冻融在_15°C至_30°C温度下冷却IOhr以上，然后快速溶解；如此反复冻融3 — 8次；
透析冻融处理的脾组织装入透析袋中，密封后放入装有甲醛溶液的生理盐水的容器 内，磁力搅拌透析获取肉鸡脾转移因子；
2)脂质体的制备
卵磷脂和胆固醇重量比例为5 — 9:1，放入蒸发瓶中，加入3 - 7 %。的维生素E，再加入 重量比例为15 — 19%的氯仿；溶解后进行减压旋转蒸发，直至氯仿完全蒸发，在旋转瓶形成 一层白色薄膜，该物质为脂质体；
3)转移因子脂质体的制备
鸡转移因子水溶液与脂质体混合，用勻浆机将其勻浆制得纳米肉鸡脾转移因子脂质体。
本发明肉鸡脾转移因子脂质体溶液的制备方法还可以采用如下技术方案
所述的肉鸡脾转移因子脂质体溶液的制备方法，其特点是按照权利要求1所述的肉 鸡脾转移因子脂质体溶液的制备方法，其特征是清理时，肉鸡脾脏用生理盐水清洗，用剪 刀去除脂肪和被膜。所述的肉鸡脾转移因子脂质体溶液的制备方法，其特点是粉碎时，组织捣碎机 8000 至 15000RPM 粉碎 3 — IOmin0所述的肉鸡脾转移因子脂质体溶液的制备方法，其特点是反复冻融时，装入塑料 容器中，在一 18°C至_25°C条件下冷却12 — 16hr，用自来水冲洗溶解并震荡，如此反复冻 融3-5次。所述的肉鸡脾转移因子脂质体溶液的制备方法，其特点是透析时，冻融处理的脾 组织装入分子截流量8000 - 12000的透析袋中，密封后加入体积比为2 :1 — 3含0. 1% — 0. 4%甲醛的生理盐水，在2 - 6°C条件下磁力搅拌透析24-48hrs。所述的肉鸡脾转移因子脂质体溶液的制备方法，其特点是鸡转移因子与脂质体 混合的重量比例为鸡转移因子水溶液脂质体=550 - 650 :1，混合时间10 - 30min。所述的肉鸡脾转移因子脂质体溶液的制备方法，其特点是制得纳米肉鸡脾转移 因子脂质体时，勻浆机勻浆5 — 30 HIin0所述的肉鸡脾转移因子脂质体溶液的制备方法，其特点是脂质体的制备时，溶解 在旋转蒸发瓶中进行，水温为30°C。本发明具有的优点和积极效果是
肉鸡脾转移因子脂质体溶液的制备方法由于采用了本发明全新的技术方案，与现有技 术相比，肉鸡脾转移因子脂质体溶液的制备方法，简化了生产工艺，除去离心(确保组织粉 碎的细度)和超滤(由于放入甲醛起到了杀毒和杀菌的作用)两个步骤生产口服溶液。 本发明具有工艺简单，经济实用，产品性能稳定，临床效果好，应用范围广等优点。


图1是本发明的工艺流程结构示意图。

实施例1 参阅附图1。肉鸡脾转移因子脂质体溶液的制备方法，包括以下工艺步骤 1.高浓度鸡转移因子的制备
将肉鸡脾脏用生理盐水洗净后，用弯剪刀去除脂肪和被膜。按2 1将脾脏和生理盐水 混合后用高速组织捣碎机以IOOOOrpm勻浆1分钟，装入塑料瓶，放入-20°C冰箱中冻结。自 来水冲洗快速溶解。如此反复冻融3次。将冻融处理后的脾组织装入分子截流量为10000 的透析袋中，密封后放入白瓷罐或白瓷盘内，容器内同时放入同等体积的含0. 2%甲醛溶液 的生理盐水，在4°C冰箱内磁力搅拌透析24-48hrs，获取高浓度鸡转移因子，可10倍以上稀释后应用于临床；该透析外液不需要再进行超滤除菌等。2.脂质体的制备
精确称取卵磷脂和胆固醇0. 17g，其比例为7:1，放入蒸发瓶中，加入5 %。左右的维生 素E，再加入3ml氯仿。在旋转蒸发瓶中溶解，水温为30°C;待全部溶解后，将蒸发瓶与真空 泵接通，进行减压旋转蒸发，直至氯仿完全蒸发，在旋转瓶形成一层白色薄膜，该物质为脂 质体。脂质体制备过程采用薄膜分散法，以维生素E为稳定剂。3.转移因子脂质体的制备
将高浓度鸡转移因子(作为水相)IOOmL加入到旋转瓶(瓶内脂质体作为油相)内，摇转 瓶约20分钟，直至液体呈乳白色均质状。混合后用高速勻浆机将其高速勻浆10分钟，得到 CTF纳米脂质体。


本发明涉及一种肉鸡脾转移因子脂质体溶液的制备方法。本发明属于口服制剂技术领域。肉鸡脾转移因子脂质体溶液的制备方法，工艺步骤1、鸡转移因子的制备清理，脾脏和水用组织捣碎机粉碎，反复冻融3－8次；冻融处理的脾组织装入透析袋中，密封后放入装有甲醛溶液的生理盐水的容器内，磁力搅拌透析获取肉鸡脾转移因子；2、脂质体的制备卵磷脂和胆固醇放入蒸发瓶中，加入维生素E，再加入氯仿；溶解后进行减压旋转蒸发，在旋转瓶形成脂质体；3、转移因子脂质体的制备鸡转移因子与脂质体混合，用匀浆机将其匀浆制得纳米肉鸡脾转移因子脂质体。本发明具有工艺简单，经济实用，产品性能稳定，临床效果好，应用范围广等优点。