专利名称：来自辣椒疫霉的多聚半乳糖醛酸酶pcipg21及其编码基因与应用的制作方法植物病原 卵菌与寄主互作过程中分泌多种重要的细胞壁降解酶或致病酶，其中多聚半乳糖醛酸酶(PG EC 3. 2. I. 15)是多种植物病原卵菌分泌的ー种重要致病酶，该类酶通过降解寄主植物细胞壁的果胶、中胶层而破坏寄主防御体系，近而增强病菌对寄主的亲合力，因此该类酶是ー种重要的致病因子。研究表明多聚半乳糖醛酸酶是ー种细胞壁结合蛋白酶，可催化果胶分子中α - (1，4)-聚半乳糖醛酸裂解，降解细胞壁的果胶，导致细胞壁软化，利于病原菌的各种侵染结构、及其分泌的各种致病酶或致病毒素顺利侵染寄主组织细胞而导致寄主的病程发展。PG分为内切型(endo-)和外切型(exo-)两种，均由多基因编码，植物病原卵菌PG基因簇成员间所编码的多聚半乳糖醛酸酶的性能存在差异，该类酶降解寄主细胞壁的性能常由单个或几个关键Pg基因协同作用。因此，探索植物病原卵菌与寄主互作过程中分泌的PG对寄主植物的致病作用，立足于致病靶标Pg基因及其编码的蛋白质功能特性研究，具重要的理论和实验意义。在世界范围内，植物病原卵菌易导致多种植物的病害，给农业生产造成了严重的损失。资料表明PG是多种植物病原卵菌的重要致病因子，辣椒疫霉病是ー种重要的卵菌病害，能导致多种植物发生严重病害，深入开展辣椒疫霉菌(Phytoph thora capsici)多聚半乳糖醛酸酶基因分离及靶标基因编码的蛋白制作和功能分析具重要的实践意义，可以实现对于植物病原卵菌所导致的多种植物病害的防治与研究。而且，多聚半乳糖醛酸酶可用于食品加工，如在果汁和酒的生产中，多聚半乳糖醛酸酶可用于增加果汁的产量，便于加压和过滤，而且可以提高果汁和酒的透明度。
本发明的ー个目的是提供一种多聚半乳糖醛酸酶。本发明所提供的多聚半乳糖醛酸酶，名称为PCIPG21，来源于辣椒疫霉菌(Phytophthora capsici)的一个强致病菌株SD33,是如下a)或b)或c)的蛋白质a)由序列表中序列2第20-390位所示的氨基酸序列组成的蛋白质；b)由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质；c)将序列表中序列2所示的氨基酸序列或序列2第20-390位所示的氨基酸序列经过ー个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有多聚半乳糖醛酸酶活性的由a)衍生的蛋白质。其中，序列表中序列2由390个氨基酸残基组成，第1-19位氨基酸组成信号肽。a)所述的蛋白质是多聚半乳糖醛酸酶的成熟蛋白，b)所述的蛋白质是多聚半乳糖醛酸酶的前体蛋白。为了使上述(a)中的蛋白便于纯化，可在由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质的氨基末端或羧基末端连接上如表I所示的标签。表I标签的序列本发明公开了来自辣椒疫霉的多聚半乳糖醛酸酶PCIPG21及其编码基因与应用。本发明所提供的多聚半乳糖醛酸酶PCIPG21，是如下a)或b)或c)的蛋白质a)由序列表中序列2第20-390位所示的氨基酸序列组成的蛋白质；b)由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质；c)将序列表中序列2所示的氨基酸序列或序列2第20-390位所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有多聚半乳糖醛酸酶活性的由a)衍生的蛋白质。多聚半乳糖醛酸酶PCIPG21具有较高的酶活性，其多聚半乳糖醛酸酶的比活力达63±0.2U/mg蛋白，其果胶酶的比活力达43±0.2U/mg。