专利名称：生物转化法制备富含共轭亚油酸的活性乳酸菌饮料的方法共轭亚油酸(Conjugated Linoleic Acid, CLA)是含有共扼双键的一系列十八碳 二烯酸(Octadecadienoic acid)的混合物，是由必需脂肪酸亚油酸(Linoleic Acid, LA) 衍生的共轭不饱和双键位于不同位置的十八碳二烯酸几何异构体的总称。共轭亚油酸能清 除人体内的自由基，增强人体的抗氧化能力和免疫能力，调节血液胆固醇和甘油三酸脂水 平，促进生长发育，促进脂肪氧化分解，防止动脉粥样硬化，促进人体蛋白合成，对人体进行 全面的良性调节；共轭亚油酸还可清除血管中的垃圾，有效调节血液黏稠度；并能显著增 加人体的心肌肌红蛋白、骨骼肌肌红蛋白含量，提高人体细胞的血液摄取和贮存氧气的能 力；能增强细胞膜的流动性，维持细胞的正常结构及功能。目前共轭亚油酸主要来源于反刍动物，研究证明，人体摄取3g/d的共轭亚油酸对 于预防癌症有积极作用。乳制品(脂肪含量0.55 9. 12mg/g)是人类获得共轭亚油酸的 主要来源物质，然而，即使在以乳制品及动物制品作为主食的西方国家，共轭亚油酸的人均 摄入量也远少于最佳摄入量，因此，向乳制品中强化共轭亚油酸是有必要的。但是直接添加 共轭亚油酸成本较高，并且会造成分散不均勻。通过化学合成或生物转化法可以大量制备共轭亚油酸。但化学合成的共轭亚油酸 异构体组成复杂，无法获得单一的异构体，对人类健康是否具有负面影响还未知。利用生物 合成法合成共轭亚油酸，无毒、无害、无副作用，并且有利于产品的开发应用。植物乳杆菌(Lactobacilli! plantrum)广泛存在于传统发酵制品中，尤其在以植 物为原料的发酵制品中较为常见，同时植物乳杆菌作为人体肠道内的主要的益生菌，对维 持人体肠道环境平衡、抑制致病菌生长发挥着重要的作用。目前有研究发现，植物乳杆菌在 发酵介质中具有将亚油酸转化为共轭亚油酸的能力，最大转化率可达到30%。因此，利用植 物乳杆菌转化亚油酸生成共轭亚油酸能有效降低成本，并且对人体无毒、无害、无副作用。CN101731335A提供了一种通过生物转化法生产富含共轭亚油酸酸奶的方法。但是 并没有关于植物乳杆菌的生物转化作用生产富含共轭亚油酸的活性乳饮料的相关研究。
本发明的一个目的在于提供一种利用生物转化法制备富含共轭亚油酸的活性乳 酸菌饮料的方法，通过对工艺条件的合理控制，使所制备得到的富含共轭亚油酸的活性乳 酸菌饮料具有独特的风味和清爽的口感以及良好的稳定性。本发明的另一目的在于提供一种富含共轭亚油酸的活性乳酸菌饮料，其中所含有 的共轭亚油酸由底物中的亚油酸通过生物转化法来实现的。乳酸菌饮料是以牛(羊)乳或复原乳为原料经乳酸菌培养发酵制得的乳液，并且 加入水、糖液等调制而成的饮料制品。现有的乳酸菌饮料由于其碳水化合物、蛋白质、游离 氨基酸更易于人体消化吸收，而且其口感更清爽，更适合人们日常饮用。根据是否进行灭菌 可以将乳酸饮料分为活性乳酸菌饮料和非活性乳酸菌饮料；活性乳酸菌饮料所含的益生菌 耐酸性和生长活性很强，具有很好的肠胃保健功能。本发明提供了一种富含共轭亚油酸的活性乳酸菌饮料的制备方法，该方法包括步 骤(1)制备亚油酸乳浊液亚油酸与占亚油酸重量 2%的亲油硬脂酸甘油酯混合，制成亚油酸乳化液；(2)制备酸奶基料将亚油酸乳浊液加入到原料奶中，添加量为 5% (以酸奶基料的总重量为 基准)，然后在55 65°C、15 30MPa下进行均质，再于90 120°C杀菌5min 120min， 之后冷却到42 士 2 °C，加入包含植物乳杆菌的发酵菌种，42 士 2 °C发酵6 10h，待pH达到 4. 0士0. 1时终止发酵，得到酸奶基料；(3)上述酸奶基料经稀释制得富含共轭亚油酸的活性乳酸菌饮料。除特别说明外，本发明中所述比例和含量均为重量比例和含量。本发明通过植物乳杆菌发酵的方法，将发酵乳中游离的亚油酸底物转化为共轭亚 油酸，并将利用此发酵乳制作活性乳饮料，提高了活性乳饮料中的共轭亚油酸水平，还能进 一步扩大乳饮料的功能性，按照本发明的方法制得的活性乳酸菌饮料，富含共轭亚油酸，且 由于此饮料所含有的共轭亚油酸是植物乳杆菌利用游离的亚油酸进行转化而来的，无任何 外来添加物质，对人体安全、无副作用。本发明人经过研究发现，由于亚油酸的脂溶性的特征，若将其直接添加到发酵基 质中会造成分散的不均勻。发明人经过反复试验，最终确定通过配制亚油酸乳浊液的方法 来解决此问题。具体是将亚将亚油酸与占亚油酸重量 2%的亲油硬脂酸单甘油酯混 合，将混合物通过超声乳化Imin 3min，超声条件优选为180 220W，2 5s开，2 5s 停，即可形成稳定的亚油酸乳浊液。这样处理能使亚油酸在发酵基质中分散均勻，增加亚油 酸与菌株细胞的接触面积，从而提高亚油酸的转化率。发明人对采用两种处理方法对发酵酸奶中的亚油酸转化为共轭亚油酸的转化率 的影响进行了比较，两种处理分别为直接向底物中添加亚油酸以及添加本发明中配制的亚 油酸乳浊液，其他工艺条件相同，具体对比结果见表1。表1不同处理底物中的亚油酸生成共轭亚油酸的转化率本发明提供了一种富含共轭亚油酸的活性乳酸菌饮料及其制备方法，本发明的方法包括步骤亚油酸与占亚油酸重量1％～2％的亲油硬脂酸单甘油酯混合，制成亚油酸乳化液；将亚油酸乳浊液加入到原料奶中，添加量为1％～5％，然后均质，杀菌，之后冷却到42±2℃，加入包含植物乳杆菌的发酵菌种，42±2℃发酵6～10h，待pH达到4.0±0.1左右时终止发酵，得到酸奶基料；上述酸奶基料经稀释制得富含共轭亚油酸的活性乳酸菌饮料。本发明通过对工艺条件的合理控制，使所制备得到的富含共轭亚油酸的活性乳酸菌饮料具有独特的风味和清爽的口感以及良好的稳定性。