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一种植物雄性育性相关蛋白及其编码基因与应用制作方法

  • 专利名称
    一种植物雄性育性相关蛋白及其编码基因与应用制作方法
  • 发明者
    万建民, 余晓文, 刘世家, 刘喜, 张云辉, 江玲, 赵志刚, 陈亮明
  • 公开日
    2012年8月1日
  • 申请日期
    2012年3月29日
  • 优先权日
    2012年3月29日
  • 申请人
    南京农业大学
  • 文档编号
    C12N1/21GK102618510SQ20121008795
  • 关键字
  • 权利要求
    1.一种蛋白质,具有如(a)或(b)所不的氣基酸残基序列 (a)由SEQID NO. I所示的氨基酸序列组成的蛋白质; (b)将SEQID NO. I所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加衍生得到的与植物雄性育性相关的蛋白质2.编码权利要求I所述蛋白的基因3.根据权利要求2所述的基因,其特征在于所述基因是如下I)或2)或3)或4)的DNA分子 1)SEQ ID NO. 2所示的DNA分子; 2)SEQ ID NO.所示的DNA分子; 3)在严格条件下与I)或2)限定的DNA序列杂交且编码所述蛋白的DNA分子; 4)与I)或2)或3)限定的DNA序列具有90%以上同源性,且编码植物雄性育性相关蛋白的DNA分子4.含有权利要求2或3所述基因的重组表达载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌5.如权利要求4所述的重组表达载体,其特征在于所述重组表达载体是在PCAMBIA1305. I载体的EcoRI重组位点之间插入权利要求2或3所述基因得到的重组质粒6.扩增权利要求2或3所述基因的全长及其任意片段的引物对,优选Primerl/Primer2、Primer3/Primer4 或 Primer5/Primer67.权利要求I所述蛋白,权利要求2或3所述基因,权利要求4所述重组表达载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌中的至少一种在植物育种中的应用8.一种培育雄性可育转基因植物的方法,是将权利要求2或3所述基因导入雄性不育植物中,得到雄性可育的转基因植物;所述雄性不育植物为花粉育性低于50%的植物;所述雄性可育的转基因植物为花粉育性高于90%的转基因植物9.如权利要求7所述的方法,其特征在于权利要求2或3所述基因通过权利要求4或5所述重组表达载体导入雄性不育植物中10.一种培育雄性不育系转基因植物的方法,是抑制目的植物中权利要求2或3所述基因的表达,得到雄性不育系转基因植物;所述目的植物为携带权利要求2或3所述基因的植物
  • 技术领域
    本发明属于基因工程领域,涉及一种植物雄性育性相关蛋白及其编码基因与应用
  • 背景技术
  • 专利详情
  • 全文pdf
  • 权力要求
  • 说明书
  • 法律状态
专利名称:一种植物雄性育性相关蛋白及其编码基因与应用的制作方法水稻花药的开裂特性是通过控制柱头上萌发的花粉量来影响植株的花粉育性,是影响水稻结实率的一个重要因素。在水稻籼粳杂种Fl植株普遍存在较严重的花药不开裂障碍,主要表现为部分花药的一个或两个药室在开花时不开裂,其花药表皮细胞形状不规贝U,膨大也不够充分。从解剖学方面分析,花药不能正常开裂的原因有几方面,一是亚种间组合部分花药的“药室间组织间隙”未充分发育,药隔维管束细胞结合紧密牢固,开颖时药室开裂困难造成部分花药的传粉障碍。二是发现花药的“药室间组织间隙”发育不够完善,致使该杂种的成熟花药不能很好地开裂。此外,还发现杂种花药中的核糖体状颗粒会引起成熟花粉粒相互聚集,使其不利散粉。三是植株的裂药性受花粉不育基因互作控制,不同杂合座位内等位花粉不育基因互作导致杂种Fl花药不开裂的程度不同,不同杂合座位间非等位花粉不育基因互作明显降低杂种Fl的裂药程度,杂种Fl中含杂合花粉不育基因座位数越多,其裂药指数越小,裂药程度越低。杂种Fl花药不开裂的原因随其所含的杂合花粉不育基因座位种类和数目不同而异,总起来看主要包括药室退化、花药缺乏裂腔或形成的裂腔小、药室严重畸形以及形成的“弹簧”弱等;此外,大量败育花粉的产生也可能是引起杂种Fl花药不开裂的原因之一。对于水稻这种自花授粉植物而言,在花药发育后期必须经历一下三个时期才能顺利完成开花授粉一是花药能够正常裂药,使成熟的花粉粒释放在柱头上;二是成熟的花粉粒能和柱头亲和以及花粉粒在柱头上萌发;最后是萌发的花粉管能伸长至胚囊中释放2个精细胞,完成双受精的过程。花药的正常开裂是开花植物受精的第一步,在这个发育过程中,有许多的因素影响着花药的开裂。其中植物激素就涉及到花药的裂药、花粉的萌发和双受精等过程。如植物激素生长素就是植物生长发育调控的核心激素,生长素含量过高或过低都会对植物的生长发育产生不利影响,特别在花药的开裂以及花粉的萌发和生长。因此在水稻花药合成的生长素的浓度必然要求有相应的机制严格控制它的含量。否则将导致植株的雄性不育出现。目前,水稻花药开裂的机制并不清楚。
本发明的目的是提供一种植物雄性育性相关蛋白。本发明的另一目的是提供该蛋白的编码基因与应用。本发明提供的植物雄性育性相关蛋白(OsRadl),来源于稻属水稻(Oryza sativavar.日本晴),具有如(a)或(b)所示的氨基酸残基序列(a)由SEQ ID NO. I所示的氨基酸序列组成的蛋白质;(b)将SEQ ID NO. I所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加衍生得到的与植物雄性育性相关的蛋白质。序列表中的序列I由300个氨基酸残基组成,自第149至251位为2酮戊二酸-Fe2+加氧酶(20G_FeII Oxy)结构域。为了使(a)中的OsRadl便于纯化,可在由SEQ ID NO. I所示的氨基酸序列组成的蛋白质的氨基末端或羧基末端连接上如表I所示的标签。 表I标签的序列本发明公开了一种植物雄性育性相关蛋白及其编码基因与应用。本发明提供的蛋白质,是如下(a)或(b)的蛋白质(a)由SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列组成的蛋白质;(b)将序列1的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且与植物雄性育性相关的由SEQ ID NO.1衍生的蛋白质。本发明的植物雄性育性相关蛋白影响植物的花药开裂过程。抑制该蛋白编码基因的表达可导致植物雄性育性降低,并影响其结实率,从而可以培育雄性花药不开裂变异的转基因植物和植物雄性不育系转基因植物。将所述蛋白的编码基因导入雄性不育植物中,可以培育雄性可育转基因植物。所述蛋白及其编码基因可以应用于植物遗传改良。


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