专利名称：共轭多烯脂肪酸多酚酯、类胡萝卜素酯、花青素酯衍生物及用途的制作方法多种共轭多烯脂肪酸，如共轭十八碳二烯酸(又名共轭亚油酸，Conjugated linoleic acid，CLA)、共轭十八碳三烯酸(又名共轭亚麻酸，Conjugated Iinolenic acid, CLnA)、共轭十八碳四烯酸(又名帕里拉油烯酸，Parinaric acid, PnA)、共轭二十二碳六烯酸(ConjugatedDocosahexenoic Acid ；CDHA)、共轭二十碳五烯酸(Conjugated Eicosapntemacnioc Acid,CEPA)等均具有降血脂、降血糖、抗动脉粥样硬化、减肥等生理活性，尤其是对乳腺癌、肝癌、胃癌、神经胶质瘤等恶性肿瘤具有很强的预防和治疗作用，因而备受研究人员关注。但是，这些共轭多烯脂肪酸都极易氧化。例如本课题组发现在50°C的空气中，共轭十八碳二烯酸经过110小时即完全氧化，共轭十八碳三烯酸则仅需20小时即完全氧化，而共轭十八碳四烯酸的氧化稳定性更差，常温下几个小时即发生自氧化。易氧化的特性对这些共轭多烯脂肪酸的应用极其不利，大大影响了相关产品的应用和开发。而目前提高脂肪酸稳定性的常规方法主要包括与食用油脂混合、微囊化、添加抗氧化剂等。其中与食用油脂混合法保护效果欠佳；微囊化的保护效果虽然很好，但较低的包封率导致产品中共轭多烯脂肪酸的有效浓度过低；添加抗氧化剂的效果相对较好，因而成为市场上最为常用的一种手段。然而该法的巨大缺点在于，抗氧化剂在提高稳定性的同时也导致共轭多烯脂肪酸的抗癌活性几乎丧失殆尽。因此，目前有必要开发新的方法，在提高共轭多烯脂肪酸的氧化稳定性的同时，亦保留其强烈的抗癌活性。本发明的目的在于提供共轭多烯脂肪酸的新型衍生物，包括多酚酯、类胡萝卜素酯、花青素酯衍生物。这些衍生物的特征在于氧化稳定性大大提高，同时还具有优秀的抗癌活性。因此，这些衍生物在食品添加剂、营养强化剂、抗癌药物等方面具有广阔的应用前景。
本发明要解决的问题是提供共轭多烯脂肪酸多酚酯、类胡萝卜素酯、花青素酯衍生物。本发明还要解决的问题是提供上述共轭多烯脂肪酸多酚酯、类胡萝卜素酯、花青素酯衍生物的用途。本发明所提供的共轭多烯脂肪酸多酚酯、类胡萝卜素酯、花青素酯衍生物，其特征是以多种共轭多烯脂肪酸以及多酚、类胡萝卜素、花青素等分子为原料，经催化脱水法合成的，具有良好的氧化稳定性以及抗癌活性的酯类衍生物。所述的共轭多烯脂肪酸包括共轭十八碳二烯酸(又名共轭亚油酸，Conjugated linoleic acid, CLA)多种异构体，如顺9， 反Il-CLAJi 8，反IO-CLAJi 9，顺Il-CLAJi 8，顺IO-CLA等；共轭十八碳三烯酸(又名共轭亚麻酸，Conjugated linolenic acid, CLnA)多种异构体，如α -桐酸、β-桐酸、石榴酸、蓝花楹酸、梓树酸、α-金盏花酸、β-金盏花酸等；共轭十八碳四烯酸(又名帕里拉油烯酸，Parinaric acid, PnA)多种异构体，如cis-PnA、trans-PnA等；共轭二十二碳六烯酸(Conjugated DocosahexenoicAcid ；CDHA)多种异构体；共轭二十碳五烯酸(Conjugated Eicosapntemacnioc Acid, CEPA)多禾中异构体。本发明提供的共轭多烯脂肪酸多酚酯、类胡萝卜素酯、花青素酯衍生物，是采用催化脱水法制备的。主要步骤如下将共轭多烯脂肪酸与多酚、类胡萝卜素、花青素等分子按 1 5 10 1的比例溶解于适当的有机溶剂中，加入质量百分比浓度 200%的二环己基碳二亚胺、1-乙基-3- (3- 二甲基氨丙基)碳二亚胺或二异丙基碳二亚胺中的一种或其混合物作为脱水剂，以及 150%的二甲胺、4-二甲氨基吡啶、三乙胺、吡啶、碳酸钾中的一种或几种的混合物作为催化剂，充N2密封后在-5°C 50°C温度下搅拌反应1 120小时。反应结束后收集滤液，用0.5 1.5M的硫酸水溶液洗涤3 5遍，收集有机相。旋转蒸发浓缩后，TLC薄板分离得到产物。其中所用的多酚、类胡萝卜素、花青素等分子包括茶多酚、可可多酚、山楂多酚、苹果多酚、葡萄多酚、大豆异黄酮、蕃茄红素、β-胡萝卜素Y-胡萝卜素、隐黄质、玉米黄质、叶黄素、辣椒红、辣椒玉红素、虾青素、海胆烯酮、蒲公英黄质、新黄质、柠黄质、紫菌红素丁、藏花素、胭脂树橙、红酵母红素、紫甘薯花青素、越橘花青素、葡萄皮花青素、蓝莓花青素、蔓越橘花青素、接骨木花青素、黑莓花青素和黑豆皮花青素等。所用有机溶剂包括二氯甲烷、三氯甲烷、丙酮、乙酸乙酯、DMS0、DMF、四氢呋喃中的一种或几种的混合物。本发明提供的共轭多烯脂肪酸多酚酯、类胡萝卜素酯、花青素酯衍生物，其特征是具有以下光谱特征(1)红外光谱中共轭碳碳双键的特征吸收在gggcnrSssicn^jzicnr1 左右，C = 0键的特征吸收在1738CHT1左右，C-O-C的对称伸缩振动特征吸收在1160CHT1左右，C-O-C的不对称伸缩振动的特征吸收在1050CHT1左右，脂肪酸甲基和亚甲基的特征伸缩振动吸收在四00 SOOOcnr1左右；( 具有所用多酚、类胡萝卜素、花青素等分子的特征红外吸收峰。和游离态的共轭多烯脂肪酸相比，本发明提供的新型衍生物的氧化稳定性大大提高，因而可用作食品添加剂以及营养强化剂，提高共轭多烯脂肪酸产品的货架寿命；尤其重要的是，上述衍生物同时也具有较强的抗癌活性，可用作新型抗癌药物。总之，本发明提供的共轭多烯脂肪酸多酚酯、类胡萝卜素酯、花青素酯衍生物，在大大提高了氧化稳定性的同时还保留了较强的抗癌活性，因而具有广阔的应用前景。图1 共轭亚油酸茶多酚酯的红外光谱图2 游离共轭亚油酸(空心三角标记实线)以及共轭亚油酸茶多酚酯(空心圆标记实线)在50°C空气中的氧化稳定性曲线图3 共轭亚油酸茶多酚酯对NIH3T3细胞生长的抑制作用图4 石榴酸叶黄素酯的红外光谱图5 游离石榴酸(实心圆标记实线)以及石榴酸叶黄素酯的(空心三角标记实线)在50°C空气中的氧化稳定性曲线图6 石榴酸叶黄素酯对NIH3T3細胞生长的抑制作用图7 =Cis-PnA葡萄皮花青素酯衍生物的红外光谱图8 游离cis-PnA (空心三角标记实线)以及cis-PnA葡萄皮花青素酯(实心圆标记实线)在50°C空气中的氧化稳定性曲线图9 =Cis-PnA葡萄皮花青素酯对NIH3T3細胞生长的抑制作用


本发明涉及共轭多烯脂肪酸多酚酯、类胡萝卜素酯、花青素酯衍生物及用途。多种中共轭多烯脂肪酸均具有抗癌、降血脂、降血糖等生理活性，因而备受关注。但共轭多烯脂肪酸极易氧化，大大影响了其应用。而现有的提高氧化稳定性的常用方法，会大大降低其生物活性。本发明提供的新型衍生物，是以多种共轭多烯脂肪酸以及多酚、类胡萝卜素、花青素等为原料，经催化脱水法合成的，具备良好的氧化稳定性以及抗癌活性的酯类衍生物。和游离共轭多烯脂肪酸相比，本发明提供的新型酯类衍生物的氧化稳定性大大提高，可用作食品添加口剂以及营养强化剂。尤其重要的是，上述衍生物还保留了较强的抗癌活性，可用作新型抗癌药物，因而具有广阔的应用前景。