专利名称：一种柔性纳米雄黄脂质体及其制备方法和用途的制作方法宫颈癌的发病率居女性生殖道恶性肿瘤的首位。最近的全球资料显示，在全世界 妇女中，每年的新发病例数为46000，其中80%的病例发生在发展中国家。我国每年新发病 例13. 15万，约占世界宫颈癌新发病例的28.8%。经过几十年广泛开展的妇科普查，宫颈癌 的发病率及致死率降低了近68%，但宫颈癌的患病率仍居我国妇女恶性肿瘤第一位，且宫 颈癌的发病正呈现一种年轻化的趋势。目前宫颈癌的综合治疗已取得了一定成绩，但许多患者不能耐受放化疗的不良反 应；部分宫颈癌生长迅速、易远处转移、可能失去最佳手术时机或对放化疗不敏感，使部分 晚期或复发患者预后差，且放射治疗后女性内分泌功能受到损害导致年轻患者治疗后生活 质量严重下降，因此急需寻求补充或替代治疗手段。目前由于大多数基因治疗方案仍处于 初期的临床试验阶段，其有效性和安全性尚存在很大问题。目前，宫颈癌的基因治疗虽然取 得了一定进展，但仅停留在动物模型阶段，还未广泛用于临床，因此传统中药仍被寄予了极 大期望。且现阶段国内整体医疗资源紧张、昂贵的宫颈癌治疗费用给尚弱的国民经济带来 了沉重负担，因此利用丰富的雄黄矿产资源，制备柔性纳米雄黄脂质体靶向治疗宫颈癌，将 其作为宫颈癌的补充治疗或替代治疗方式有很强的实用性和经济学意义。雄黄的主要成分是硫化砷(As4S4，即As2+状态)、还含有少量的Aa2O3(氧化砷，即 As3+状态)。雄黄发挥抗瘤作用的主要分子机制为As进入机体后作用于酶系统，可抑制酶 蛋白的巯基，干扰巯基酶类的活性，影响细胞生物代谢活动、应激修复、癌基因表达以及阻 抑癌细胞周期进程等(胡清娜，岳传哲，王东明，等.三氧化二砷的医学价值及其作用机制 [J].中国误诊学杂志，2005，5 (13) =2418-2419) 0但这种作用可以抑制巯基酶的正常功能， 阻止细胞氧化和呼吸，严重者干扰组织代谢，会导致全身各系统功能受损甚至衰竭；长期暴 露于低剂量的砷环境中可以导致多种恶性肿瘤(安艳.砷致癌作用机制研究进展[J].中 国地方病防治杂志，2006，21 (4) -.221-224) 0外源无机砷进入机体内，在特定酶作用下甲基 化，这种甲基化的有机砷毒性远远小于外源无机砷，因此可以视砷甲基化为砷的解毒(李 冰.甲基亚砷酸一一种毒性更强的无柳砷代谢中间产物[J].中国地方病学杂志，2001。 20(3) :219-221)。但是砷甲基化过程中许多代谢产物或中间代谢产物能导致生物体疾病、 DNA损伤，具有更强毒性(孙贵范.砷代谢研究在解析砷毒性作用机制中的意义[J].中国 地方病学杂志，2008，28(1) :1-2)。因此雄黄恰如一把双刃剑(治瘤=致瘤，解毒=制毒)， 从而导致雄黄在临床上的应用难以开展。大部分学者认为雄黄中有抗瘤作用的是As4S4，而 As2O3与雄黄的毒性作用有关。但①目前没有研究跟踪标记雄黄体内外抗瘤的分子成分；② 雄黄对温度和光敏感、性状不稳定、极易转化成砒霜(即由As4S4转变为As2O3)；③As4S4和As2O3抗瘤以及毒性机制一致，为As结合到酶蛋白的巯基、干扰巯基酶类的活性，影响细胞 生物代谢活动、应激修复、癌基因表达而诱导癌细胞凋亡、阻抑癌细胞周期进程等；④As2+ 极难溶于水，胃肠道吸收差，生物利用度低，难以达到抗瘤效果；⑤As2O3较As4S4有更强的 毒性，这是砷制剂以小剂量和短期作用方式抑制生命力旺盛的癌细胞的必要基础。雄黄在机体内发挥抗瘤和毒性的活性成分均为As2O3，其对肿瘤细胞毒治疗作用和 其对机体毒副作用一致。这样，使用雄黄的关键在于提高生物利用度和靶向性，使其细胞毒 目标集中在瘤细胞。利用宫颈与外界相通，能通过表皮吸收药物的有利条件，借助透皮给药模式 (transdermal drug delivery, TDD)达到在宫颈癌变局部靶向使用雄黄、减少雄黄在宫颈 癌瘤体外组织中的含量、降低毒副作用。但雄黄溶解度低、难以吸收、生物利用度低，因此为 了保证其药效性，发明人将纳米技术应用于雄黄的炮制和包装，制造出粒径小于IOOnm的 纳米雄黄，结合柔性纳米脂质体(flexible nano-liposomes, FNL)的高度自身形变、可高 效地穿过比自身小数倍的皮肤孔道，并且具有亲脂亲水、高效渗透、高度柔韧和包容性等特 点，将其作为天然靶向透皮给药载体可实现纳米雄黄的靶向治疗。
针对现有技术中存在的不足，本发明的一个目的在于提供了一种柔性纳米雄黄脂 质体，该目的通过如下技术方案来实现一种柔性纳米雄黄脂质体，它含有下述重量份的主药和辅料本发明公开了一种柔性纳米雄黄脂质体及其制备方法和用途，解决了现有技术中治疗宫颈癌药物中存在的药力不持久，靶向性弱等问题，本发明的柔性纳米雄黄脂质体含有主药雄黄和去氧胆酸钠、天然大豆磷脂、胆固醇、维生素E等辅料，本发明方法采用纳米中药技术处理雄黄，将雄黄制成膜形柔性纳米雄黄脂质体。本发明的优点在于柔性纳米脂质体是种高度自身形变的靶向药物载体，具有可高效地穿过比其自身小数倍的皮肤孔道和亲脂亲水、高效渗透、高度柔韧和包容性等特点，在靶向给药治疗宫颈癌领域极具潜力。