专利名称：二苯基脲衍生物及其作为氯化物通道阻滞剂或BK_ca通道调节剂的应用的制作方法 氯化物通道可适用于各种特异性细胞功能并且促进例如骨骼肌和平滑肌细胞的正常功能。氯化物通道可能在每一细胞中找到，从细菌到哺乳动物。其生理学任务从细胞体积调节到膜电位的稳定，经上皮或跨细胞转运和胞内细胞器的酸化。 同样，Ca2+-活化的BK通道存在于许多细胞中，包括大部分中枢和外周神经细胞，横纹肌细胞，心肌细胞，气道平滑肌、脉管系统、胃肠道和膀胱细胞，内外分泌腺中包括胰腺b-细胞和肾小管中的细胞。 对提供具有氯化物通道阻滞剂或BKCa通道调节剂活性和具有最佳药理学特性的化合物存在持续需求。此外，对发现无与早期化合物相关的不期望的副作用有效化合物存在强烈需求。 WO 2005/023237和WO 2005/023238(Poseidon PharmaceuticalsA/S)中描述了ERG通道开放剂在治疗超兴奋性相关神经元疾病和心律失常中的应用。在披露的化合物中有1-(3-三氟甲基-苯基)-3-[2-(5-氧代-4，5-二氢-[1，2，4]噁二唑-3-基)-4-(4’-N，N-二甲基-氨基甲酰基)-联苯基]-脲。 发明概述 本发明的一个目的在于提供作为氯化物通道阻滞剂或BKCa通道调节剂起作用的新颖的化合物。 本发明的另一个目的在于提供具有更好选择性的化合物。本发明的另一个目的在于提供具有更好功效的化合物。 本发明的另一个目的在于提供对细胞或组织特异性氯化物通道或BKCa通道起作用的化合物。本发明的另一个目的在于提供对氯化物通道的特异性族或亚型起作用的化合物。 本发明的另一个目的在于提供具有更优化的药效学特性，诸如动力学行为，生物利用度，溶解性和功效的化合物。
本发明在其第一个方面中提供了通式I的化合物，
任意的其异构体或其异构体的任意混合物或其药学上可接受的盐，其中Ro，Rm，Rp，R2，R3，R4，R5和R6如下文所定义。
本发明在其第二个方面中提供了药物组合物，其包含治疗有效量的本发明化合物，任意的其异构体或其异构体的任意混合物或其药学上可接受的盐与至少一种药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂。
本发明在另一个方面中提供了本发明的化合物，任意的其异构体或其异构体的任意混合物或其药学上可接受的盐在制备用于治疗、预防或缓解哺乳动物，包括人的疾病或障碍或病症的药物组合物中的应用，所述的疾病，障碍或病症对阻断氯化物通道或调节BKCa通道有应答；或在制备用于增加血脑屏障通透性的药物中的应用。
本发明在另一个方面中涉及治疗、预防或缓解活的动物体，包括人的疾病或障碍或病症的方法，所述的障碍，疾病或病症对阻断氯化物通道或调节BKCa通道有应答，该方法包括对有此需要的这类活的动物体给予治疗有效量的本发明化合物，任意的其异构体或其异构体的任意混合物或其药学上可接受的盐的步骤。
本发明的其它目的对本领域技术人员而言从下列详细描述和实施例中显而易见。
发明详述 二苯基脲衍生物 本发明在其第一个方面中提供了式I的化学化合物，
任意的其异构体或其异构体的任意混合物，或其药学上可接受的盐；其中 Ro，Rm，Rp，R2，R3，R4，R5和R6彼此独立地表示 氢，卤素，三氟甲基，三氟甲氧基，烷基或烷氧基。
在式I化合物的一个实施方案中，Ro表示氢；Rm表示氢；且Rp表示卤素，三氟甲基，三氟甲氧基，烷基或烷氧基。在另一个实施方案中，Ro表示氢；Rm表示氢；且Rp表示卤素或三氟甲基。在一个具体的实施方案中，Rp表示三氟甲基。
在另一个实施方案中，R3，R4，R5和R6表示氢；且R2表示卤素，三氟甲基，三氟甲氧基，烷基或烷氧基。在一个具体的实施方案中，R2表示卤素，诸如氯。
在另一个实施方案中，R2，R4，R5和R6表示氢；且R3表示卤素，三氟甲基，三氟甲氧基，烷基或烷氧基。在一个具体的实施方案中，R3表示卤素，诸如溴。
在另一个实施方案中，R2，R5和R6表示氢；且R3和R4彼此独立地表示卤素，三氟甲基，三氟甲氧基，烷基或烷氧基。在另一个实施方案中，R3和R4彼此独立地表示卤素或三氟甲基。在一个具体的实施方案中，R3和R4之一表示卤素，诸如氯，而R3和R4中的另一个表示三氟甲基。在另一个实施方案中，R3表示三氟甲基和R4表示卤素，诸如氯。
在另一个实施方案中，R2，R4和R6表示氢；且R3和R5彼此独立地表示卤素，三氟甲基，三氟甲氧基，烷基或烷氧基。在一个具体的实施方案中，R3和R5彼此独立地表示卤素。在另一个实施方案中，R3表示氟且R5表示氟。
在一个具体的实施方案中，本发明的化合物为: N-(3，5-二氟-苯基)-N′-[3-(5-氧代-4，5-二氢-[1，2，4]噁二唑-3-基)-4′-三氟甲基-联苯-4-基]脲； N-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-N′-{3-(5-氧代-4，5-二氢-[1，2，4]-噁二唑-3-基)-4′-三氟甲基-联苯-4-基}脲； N-(3-溴-苯基)-N′-{3-(5-氧代-4，5-二氢-[1，2，4]-噁二唑-3-基)-4′-三氟甲基-联苯-4-基}脲； N-(2-氯-苯基)-N′-{3-(5-氧代-4，5-二氢-[1，2，4]-噁二唑-3-基)-4′-三氟甲基-联苯-4-基}脲； 或其药学上可接受的盐。
取代基定义 在本发明的上下文中，卤素表示氟，氯，溴或碘。
烷基意旨1-6个碳原子的直链或支链，包括但不限于甲基，乙基，丙基，异丙基，丁基，异丁基，叔丁基，戊基和己基；甲基，乙基，丙基和异丙基为优选的基团。
烷氧基为O-烷基，其中烷基如上述所定义。
药学上可接受的盐 本发明的化学化合物可以任何适合预期给药的形式提供。适合的形式包括本发明化学化合物的药学(即生理学)上可接受的盐类以及前药(predrug)或前体药物(prodrug)形式。
药学上可接受的加成盐类的实例包括但不限于无毒性无机和有机酸加成盐类，诸如盐酸盐，氢溴酸盐，硝酸盐，高氯酸盐，磷酸盐，硫酸盐，甲酸盐，乙酸盐，阿康酸盐，抗坏血酸盐，苯磺酸盐，苯甲酸盐，肉桂酸盐，柠檬酸盐，双羟萘酸盐，庚酸盐，富马酸盐，谷氨酸盐，羟乙酸盐，乳酸盐，马来酸盐，丙二酸盐，扁桃酸盐，甲磺酸盐，萘-2-磺酸盐，酞酸盐，水杨酸盐，山梨酸盐，硬脂酸盐，琥珀酸盐，酒石酸盐，对甲苯磺酸盐等。这类盐可通过本领域众所周知和描述的操作步骤形成。
并不视为药学上可接受的其它酸，诸如草酸可以用于制备用作获得本发明化学化合物及其药学上可接受的酸加成的盐的中间体的盐。
本发明化合物的药学上可接受的阳离子盐的实例包括但不限于包含阴离子基团的本发明化合物的钠，钾，钙，镁，锌，铝，锂，胆碱，赖氨酸鎓(lysinium)和铵的盐等。这类阳离子盐可以通过本领域众所周知和描述的操作步骤形成。
在本发明上下文中，含N化合物的“鎓盐”也被认为是药学上可接受的盐。优选的“鎓盐”包括烷基-鎓盐、环烷基-鎓盐和环烷基烷基-鎓盐。
本发明化学化合物的前药或前体药物形式的实例包括本发明物质的合适的前体药物的实例，包括在母体化合物的一个或多个反应性或可衍生基团上被修饰的化合物。特别关注在羧基、羟基或氨基上被修饰的化合物。合适的衍生物的实例为酯类或酰胺类。
可以将本发明的化学化合物与药学上可接受的溶剂，诸如水、乙醇等制成可溶性或不溶性形式。可溶性形式还可以包括水合形式，诸如一水合物，二水合物，半水合物，三水合物，四水合物等。一般就本发明的目的而言，可溶性形式被视为与不溶性形式等效。
异构体 本领域技术人员会理解本发明的化合物可以以不同立体异构体形式存在-包括对映体、非对映体和顺式-反式异构体。
本发明包括所有这类异构体及其任意的混合物，包括外消旋混合物。
可以使用本领域技术人员公知的拆分光学异构体的方法并且对本领域普通技术人员而言显而易见。这类方法包括那些由J.Jaques，A.Collet和S.Wilen在“Enantiomers，Racemates and Resolutions”，John Wiley和Sons，New York(1981)中讨论的方法。
还可以由光学活性原料制备光学活性化合物。
标记的化合物 本发明的化合物可以以标记或未标记的形式使用。在本发明的上下文中，标记的化合物具有一个或多个被具有不同于在自然界通常发现的原子质量或质量数的原子质量或质量数的原子置换。所述标记能够便利地定量检测所述的化合物。
本发明标记的化合物可以用作各种诊断方法中的诊断工具，放射性示踪物或监测剂，并且用于体内受体成像。
本发明标记的异构体优选包含至少一种放射性核素作为标记。发射正电子的放射性核素均为使用候选物。在本发明的上下文中，放射性核素优选自2H(氘)、3H(氚)、13C、14C、131I、125I、123I和18F。
用于检测本发明标记的异构体的物理方法可以选自正电子发射断层摄影(PET)、单光子发射计算机化断层显像(SPECT)、磁共振波谱分析(MRS)、磁共振成像(MRI)和计算机辅助轴向X线断层照相术(CAT)或其组合。
制备方法 可以通过用于化学合成的常规方法，例如在制备实施例中描述的那些方法制备本发明的化合物。用于本申请中所述方法的原料为公知的或易于通过常规方法由商购化学品制备。
还可以使用常规方法将本发明的一种化合物转化成本发明的另一种化合物。
可以通过常规技术，例如通过提取、结晶、蒸馏、色谱等分离本文所述的反应终产物。
生物活性 本发明的化合物用作氯化物通道阻滞剂或BKCa通道调节剂。
本发明的优选化合物在亚微摩尔和微摩尔范围，即低于1到约100μM内表现出生物活性。
氯化物通道类型的实例为体积调节的阴离子通道(VRAC)或破骨细胞或红细胞的氯化物通道。为了测定这些化合物的活性，可以使用本领域中公知的各种氯化物通道阻断测定法。
因此，在另一个方面中，本发明的化合物被视为用于治疗、预防或缓解对阻断氯化物通道有应答的疾病、障碍或病症。
在一个具体的实施方案中，本发明的化合物被视为用于治疗、预防或缓解: ·骨代谢病，诸如破骨细胞相关骨病，诸如骨质疏松症，停经后骨质疏松症，继发性骨质疏松症，溶骨性乳腺癌骨转移，溶骨癌侵入(invation)或骨的佩吉特病； ·对抑制血管发生有应答的疾病，诸如涉及肿瘤细胞增殖的疾病，诸如癌症，转移癌，前列腺癌，肺癌，乳腺癌，膀胱癌，肾癌，结肠癌，胃癌，胰腺癌，卵巢癌，黑素瘤，肝细胞瘤，肉瘤，淋巴瘤； ·眼血管发生相关疾病，诸如渗出性黄斑变性，老年性黄斑变性(AMD)，视网膜病，糖尿病性视网膜病，增生性糖尿病性视网膜病，糖尿病性黄斑水肿(DME)，缺血性视网膜病(例如视网膜静脉(vain)或动脉闭塞)，早产性视网膜病，新生血管性青光眼，角膜新生血管形成；和 ·对眼内压降低有应答的疾病、障碍或病症，诸如眼高压，开角型青光眼，慢性开角型青光眼，闭角型青光眼，因闭角型青光眼导致的睫状充血；和 ·类风湿关节炎，银屑病 ·镰状细胞贫血。
在另一个方面中，本发明的化合物被考虑用于治疗、预防或缓解对调节BKCa通道有应答的疾病、障碍或病症。
在一个具体的实施方案中，本发明的化合物被考虑用于治疗、预防或缓解: ·心血管疾病，诸如动脉粥样硬化，局部缺血，再灌注损伤，高血压，再狭窄，动脉炎症，心肌缺血或缺血性心脏病； ·阻塞或炎症性气道疾病，诸如气道高反应性，肺尘症，铝尘肺，炭末沉着症，石棉肺，石末肺，驼鸟毛尘肺，铁尘肺，矽肺，烟草尘肺，棉尘肺，肉样瘤病，铍中毒，肺气肿，急性呼吸窘迫综合征(ARDS)，急性肺损伤(ALI)，急性或慢性感染性肺病，慢性阻塞性肺疾病(COPD)，支气管炎，慢性支气管炎，喘鸣性支气管炎，气道高反应性加剧(excerbation)或囊性纤维化，咳嗽，包括慢性咳嗽，气道高反应性加剧，肺纤维化，肺动脉高压，炎症性肺病或急性或慢性呼吸系统传染病； ·尿失禁，精神病，癫痫或疼痛。
此外，本发明的化合物还可以适合于促进治疗物质跨过血脑屏障障转运，并且特别是有利于将化疗剂和病毒颗粒递送至肿瘤细胞和其它异常脑组织。
因此，在另一个方面中，本发明涉及本发明的化合物作为促进剂的应用，其用于增加血脑屏障通透性，且由此能够促进治疗物质跨过血脑屏障，包括在脑肿瘤中发现的血液-肿瘤屏障转运。
在该方面的一个实施方案中，本发明的化合物用于促进活性剂到达生理学上受到损伤、创伤、感染、中风或局部缺血侵害的异常脑组织区域。这种异常脑区域为良性或恶性肿瘤组织或其它肿瘤性疾病或病症的区域。恶性肿瘤特别可以为神经胶质瘤，胶质母细胞瘤，少突神经胶质瘤，星形细胞瘤，室管膜瘤，初级神经外胚层肿瘤，非典型脑膜瘤，恶性脑膜瘤，神经母细胞瘤，肉瘤，黑素瘤，淋巴瘤或癌。
当作为促进剂使用时，本发明的化合物可以与治疗剂通过任何合适的途径，按照任何便利的方式共同给药。优选同时(即同时或并发地)或基本上同时(即在约1小时内，优选在30分钟内，甚至更优选在15分钟内)与治疗剂一起给药。
可以通过任何合适的途径给予用于本发明应用的活性剂，即促进剂和治疗剂，通过该途径活性剂被递送至血流。优选通过静脉内、肌内或动脉内注射或输注进行该过程。
用于本发明应用的治疗剂可以为任意的活性剂或药物。然而，优选用于本发明应用的治疗剂或药物为抗肿瘤药，化疗剂，细胞毒性剂，DNA表达载体，蛋白质，寡核苷酸，核苷酸类似物，抗微生物药，干扰素，细胞因子，细胞因子激动剂，细胞因子拮抗剂，免疫毒素，免疫抑制剂，硼化合物，单克隆抗体，肾上腺素能药，抗惊厥药，防局部缺血药，抗创伤药，抗癌化疗剂和诊断试剂。
用于本发明应用的优选化疗剂包括: ·烷化剂，如氮芥类(例如氮芥，环磷酰胺，异环磷酰胺(ifosamide)，美法仑和苯丁酸氮芥)，乙烯亚胺类和甲基蜜胺类(例如六甲蜜胺和塞替派)，烷基磺酸盐类(例如白消安)，亚硝基脲类(例如卡莫司汀(BCNU)，洛莫司汀(CCNU)，司莫司汀(甲基-CCNU)和链佐星)，三氮烯类(例如达卡巴嗪(DTIC))； ·抗代谢药，如叶酸类似物(例如甲氨蝶呤)，嘧啶类似物(例如氟尿嘧啶，氟尿苷和阿糖胞苷)，嘌呤类似物和相关抑制剂(例如巯嘌呤，硫鸟嘌呤和喷司他丁)；和 ·天然抗有丝分裂产品，如长春花生物碱类(例如长春碱和长春新碱)，表鬼臼毒素(例如依托泊苷和替尼泊苷)，抗生素(例如更生霉素，柔红霉素，多柔比星，博来霉素，普卡霉素和丝裂霉素)，酶(例如L-天冬酰胺酶)，铂配位络合物(例如顺铂和卡铂)和生物应答调节剂，如干扰素(例如干扰素-α)。
在另一个优选的实施方案中，所述的DNA表达载体为病毒载体，优选腺病毒衍生的载体或单纯疱疹病毒衍生的载体。
在另一个优选的实施方案中，用于本发明应用的诊断试剂特别可以为成像剂或造影剂，并且它特别可以为放射性标记的物质，镓标记的物质或选自亚铁磁性剂，荧光剂，发光剂和碘化造影剂的造影剂。
当作为促进剂使用时，本发明的化合物可以优选与治疗剂共同给药，所述的治疗剂用于靶向生理学上直接受到物理或生化损伤侵害的脑组织区域或脑内瘤生长区域，所述的物理或生化损伤例如阿尔茨海默病，帕金森病，帕金森综合征，创伤，感染，中风，脑缺血，所述的脑内瘤生长区域诸如良性或恶性脑肿瘤组织。
治疗方法 本发明的另一个方面提供了治疗、预防或缓解活的动物体，包括人的疾病或障碍或病症的方法，所述的疾病、障碍或病症对阻断氯化物通道或调节BKCa通道有应答，并且该方法包含对有此需要的这类活的动物体，包括人给予有效量的本发明的化合物。
本发明关注的优选医学适应症为上述那些。
目前预期，适当的剂量范围是每日0.1至1000mg，每日10至500mg，及特别是每日30-100mg，通常取决于确切的给药方式，给药形式，给药所针对的适应症，所涉及的受试者及所涉及受试者的体重，及进一步地，主管医师或兽医的偏好及经验。当与本领域中已知治疗所述疾病的化合物联用时，可以减少剂量方案。
组合疗法 可以将本发明化合物的应用与用于治疗、预防或缓解对阻断氯化物通道有应答的疾病、障碍或病症的其它化合物的应用进行组合。
作为实例，可以将所述的化合物与一种或多种用于治疗、预防或缓解对抑制血管发生有应答的疾病的其它药物，诸如用于抗转移治疗的化合物联用。这类其它的药物包括细胞毒性化合物，抗有丝分裂化合物和抗代谢药。
细胞毒性化合物的实例(包括细胞毒性烷化剂)包括卡莫司汀(BCNU)，福莫司汀，替莫唑胺(temodal)，异环磷酰胺和环磷酰胺(cyclofosfamide)。
抗有丝分裂化合物的实例包括紫杉醇(泰素)和多西他赛。
抗代谢药的实例包括甲氨蝶呤。
此外，可以使用用于本发明的药物组合物或将其与其它治疗或疗法联合给予。其它治疗或疗法的实例包括放疗和手术。
此外，可以将本发明化合物的应用与其它用于治疗骨代谢疾病的骨代谢控制化合物的应用进行组合。这类已知的骨代谢控制化合物包括二膦酸盐，诸如任选与钙联用的依替膦酸，帕玛二磷酸或氯膦酸；雌激素受体活性化合物，诸如雌二醇(oestrogen)，即雌二醇(oestradiol)和ethyloestradiol，降钙素，1，25-二羟基维生素D及其代谢物，氟化物，生长激素，甲状旁腺素，三碘-酪氨酸(thyrosine)，胶原蛋白降解酶，诸如蛋白酶抑制剂，或癌症治疗剂。
此外，可以将本发明化合物的应用与用于治疗、预防或缓解对降低眼内压有应答的疾病、障碍或病症的一种或多种其它的药物的应用进行组合。这类其它的药物包括β-阻滞剂，拟副交感神经缩瞳药，拟交感神经药和碳酸酐酶抑制剂。
此外，可以将本发明化合物的应用与其它治疗或疗法进行组合。
对疾病和障碍的治疗可以为慢性(chronical)或长期治疗以及治疗疾病和障碍的猝然危象。
药物组合物 在另一个方面中，本发明提供新颖的药物组合物，其包括治疗有效量的本发明化学化合物。
尽管用于治疗的本发明化合物可以原料化合物的形式给药，但优选将活性成分、任选地以生理上可接受的盐的形式，与一种或多种辅剂、赋形剂、载体、缓冲剂、稀释剂和/或其它常规的药物辅料一起引入成为药物组合物。
在优选的实施方案中，本发明提供了药物组合物，其包含本发明化学化合物或其药学上可接受的盐或衍生物以及一种或多种药学上可接受的载体、和任选地与其它本领域已知和使用的治疗性和/或预防性成分混合。该载体必须是＂可接受的＂，即与制剂中的其它成分相容且不会对其接受者有害。
本发明的药物组合物可以是那些适合于口服、直肠、支气管、鼻、肺、局部(包括颊内和舌下)、透皮、阴道或肠胃外(包括皮肤、皮下、肌内、腹腔内、静脉内、动脉内、脑内、眼内注射或输注)给药的药物组合物，或那些适合于通过吸入或吹入给药的形式，包括粉末和液体气雾剂给药、或通过缓释系统给药的药物组合物。合适的缓释系统的例子包括含有本发明化合物的固体疏水性聚合物的半渗透基质，该基质可以是成形的制品形式，例如薄膜或微囊。
因此可将本发明的化学化合物与常规的辅剂、载体或稀释剂一起制成药物组合物及其单位剂型的形式。这样的形式包括固体，并尤其是片剂、填充胶囊、粉末和丸剂的形式、以及液体，尤其是水溶液或非水溶液、混悬液、乳剂、酏剂和填充上述形式的胶囊，所有这些形式均用于口服、用于直肠给药的栓剂、以及用于肠胃外的无菌可注射溶液。这样的药物组合物及其单位剂型可包括常规比例的常规成分、含有或不含另外的活性化合物或成分，并且这样的单位剂型可含有与预期每日应用剂量范围相当的任何合适的有效量的活性成分。
本发明化学化合物可以各种口服和胃肠外剂型给药。对本领域技术人员来说，显而易见的是下述剂型可包含作为活性成分的本发明化合物或本发明化合物药学上可接受的盐。
为从本发明化合物制备药物组合物，药学上可接受的载体可以是固体或者液体。固体形式的制剂包括粉末、片剂、丸剂、胶囊、扁囊剂、栓剂以及可分散的颗粒剂。固体载体可以是一种或多种还能用作稀释剂、调味剂、增溶剂、润滑剂、悬浮剂、粘合剂、防腐剂、片剂崩解剂或包囊材料的物质。
在粉末剂中，载体为细粒固体，它与细分的活性组分混合。
在片剂中，活性成分与具有必要的结合容量的载体以适当的比例混合并压缩成所需的形状和大小。
粉末剂和片剂优选含5％或10％至约70％的活性化合物。合适的载体为碳酸镁、硬脂酸镁、滑石粉、糖、乳糖、果胶、糊精、淀粉、明胶、黄蓍胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、低熔点蜡、可可脂等。术语＂制剂＂欲包括活性化合物与作为载体的包囊材料的剂型，所述包囊材料提供胶囊，其中含或不含载体的活性成分被载体包围，载体由此与活性化合物结合在一起。类似地，还包括扁囊剂和锭剂。片剂、粉末剂、胶囊、丸剂、扁囊剂和锭剂可以用作适合于口服给药的固体形式。
为了制备栓剂，首先将低熔点的蜡、如脂肪酸甘油酯或可可脂的混合物熔化，并通过搅拌将活性成分均匀地分散在其中。然后将该熔化的均匀混合物倾入适当大小模具中，使其冷却并由此固化。
适合于阴道给药的组合物可以阴道栓剂、棉塞、乳膏剂、凝胶剂、糊剂、泡沫或喷雾剂的形式存在，除含活性成分外还含有本领域已知的合适的载体。
液体制剂包括溶液、混悬液和乳剂，例如，水溶液或水-丙二醇溶液。例如，肠胃外注射液体制剂可以配制成含水聚乙二醇的溶液。
因此，本发明化学化合物可配制成用于肠胃外给药(例如注射，如推注或连续输注)的制剂，并可以与添加的防腐剂一起以安瓿、预填充注射器、小体积输注液的单位剂量形式或以多剂量容器提供。该组合物可采取油性或水性载体的混悬液、溶液或乳剂的形式，并可含有制剂成分，如悬浮剂、稳定剂和/或分散剂。另外，活性成分可以是粉末形式，通过无菌固体的无菌分离或通过溶液冻干获得，用于在使用前与合适的载体如无菌的、无热原的水进行配制。
适合于口服使用的水溶液可通过将活性组分溶解在水中并根据需要加入合适的着色剂、调味剂、稳定剂和增稠剂来制备。
适合于口服使用的水悬浮液可通过将细分活性组分分散在含粘性物质、如天然或合成的树胶、树脂、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、或其它公知的悬浮剂的水中而制备。
还包括欲在临用之前转化为用于口服给药的液体形式制剂的固体形式制剂。这样的液体形式包括溶液、混悬液和乳剂。除活性组分之外，这样的制剂可包含着色剂、调味剂、稳定剂、缓冲剂、人造和天然的甜味剂、分散剂、增稠剂、增溶剂等。
为了局部施用到表皮，可将本发明化合物配制成软膏剂、霜剂，或洗剂，或透皮贴剂。例如，软膏剂和霜剂可用水性或油性基质外加合适的增稠剂和/或胶凝剂配制而成。洗剂可用水性或油性基质配制而成，且通常还含一种或多种乳化剂、稳定剂、分散剂、悬浮剂、增稠剂或着色剂。
适合于在口腔中局部给药的组合物包括在调味基质、通常为蔗糖和金合欢胶或黄蓍胶中包含活性成分的锭剂；在惰性基质、如明胶和甘油或蔗糖和金合欢胶中包含活性成分的软锭剂；以及在合适的液体载体中包含活性成分的漱口剂。
可将溶液或混悬液用常规方法例如用滴管、吸管或喷雾器直接施用到鼻腔。该组合物可以单剂量或多剂量的形式提供。
呼吸道给药也可以借助气雾剂实现，其中活性成分与合适的推进剂一起在加压包装中提供，合适的推进剂包括含氯氟烃(CFC)例如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷或二氯四氟乙烷，二氧化碳或其它合适的气体。气雾剂还可适当地含有表面活性剂如卵磷脂。药物的剂量可通过配备计量阀控制。
或者，活性成分可以干粉形式提供，例如化合物在合适的粉末基质如乳糖、淀粉、淀粉衍生物如羟丙基甲基纤维素和聚乙烯吡咯烷酮(PVP)中的粉末混合物。适宜地，粉末载体将在鼻腔内形成凝胶。粉末组合物可以单位剂量形式呈现，例如以胶囊或药筒(如明胶的胶囊或药筒)形式，或以粉末可借助吸入器从中给药的泡罩包装形式。
在欲用于呼吸道给药的组合物包括鼻内用组合物中，通常化合物具有小的粒径，例如为5微米或更小的数量级。这样的粒径可以借助本领域已知的方法、例如通过微粉化获得。
需要时，可以应用适合提供活性成分持续释放的组合物。
药物制剂优选为单位剂型形式。这类形式中，制剂被细分为含有适量活性组分的单位剂量。单位剂量形式可以是包装的制剂，该包装含有离散量的制剂，如包装的片剂、胶囊，以及小瓶或安瓿中的粉末。此外，单位剂量形式可以是胶囊、片剂、扁囊剂或锭剂本身，或可以是适合数量的任何这些剂型的包装形式。
用于口服给药的片剂或胶囊和用于静脉给药的液体以及连续输注液是优选的组合物。
关于制剂和给药技术的更详细的资料可以在最新版的Reminaton′s Pharmaceutical Sciences(Maack PublishingCo.Easton，PA)上找到。
治疗有效剂量指的是活性成分的量，其可改善症状或病状。治疗效力及毒性、例如ED50及LD50可在细胞培养物或实验动物内通过标准药理学程序予以测定。治疗效果与毒性作用之间的剂量比为治疗指数并可通过比例LD50/ED50表示。优选显现出大的治疗指数的药物组合物。
给予的剂量当然必须针对所治疗的个体的年龄、体重和病症，以及给药途径、剂量形式及给药方案，以及期望的结果而小心地调整，且确切的剂量当然应该由医师决定。
实际的剂量取决于所治疗疾病的性质及严重程度，且在医师的判断范围之内，可以根据本发明具体情况对剂量的反应而改变，以产生所需的治疗效果。然而，目前预期含有从约0.1至约500mg、优选从约1至约100mg、更优选从约1至约10mg的活性成分/单个剂量的药物组合物对于治疗性处置是合适的。
活性成分可以每日一或数剂给予。在某些情况中，以低至0.1μg/kg(静脉内)及1μg/kg(口服)的剂量可以获得令人满意的结果。目前认为剂量范围的上限是约10mg/kg(静脉内)及100mg/kg(口服)。优选范围为从约0.1μg/kg至约10mg/kg/日(静脉内)和从约1μg/kg至约100mg/kg/日(口服)。
实施例 进一步参照下列实施例解释本发明，但这些实施例不以任何方式来限定请求保护的本发明的范围。
实施例1 4-氨基-4′-三氟甲基-联苯-3-腈
在250ml水和500ml 1，2-二甲氧基乙烷中混合26.5g4-(三氟甲基)苯硼酸，25g 2-氨基-5-溴-苄腈和57.9g碳酸钾。使该混合物通过氮气发泡10分钟，然后加入1g双(三苯基膦)钯(II)氯化物，并且将该反应混合物在回流状态下加热过夜。将该反应混合物冷却至室温，加入700ml水并且用800ml乙酸乙酯萃取。首先用300ml饱和氯化钠，然后用300ml 2M氯化钙且最终用300ml水洗涤有机相。用硫酸镁干燥有机相，蒸发至得到油状物并且与乙醚一起研磨。产量30.5g(92％)。
实施例2 4-氨基-N-羟基-4′-三氟甲基-联苯-3-甲酰胺
将4-氨基-4′-三氟甲基-联苯-3-腈(10g)溶于250ml甲醇并且加入5.6g羟胺盐酸盐和8.1g三乙胺。将该反应混合物在50℃下搅拌过夜，加入100ml水和100ml乙酸乙酯。用100ml乙酸乙酯萃取水相。用100ml水并且此后用100ml饱和氯化钠洗涤有机相。用硫酸镁干燥有机相并且蒸发至得到油状物。产量10.8g(96％)。
实施例3 3-(4-氨基-4′-三氟甲基-联苯-3-基)-4H-[1，2，4]-噁二唑-5-酮
将钠(1.6g)在200ml干燥乙醇中搅拌至其溶解，向该溶液中加入10.8g 4-氨基-N-羟基-4′-三氟甲基-联苯-3-甲酰胺和16g碳酸二乙酯，将该反应混合物在85℃下搅拌过夜，蒸发至得到油状物，将残余物溶于乙酸乙酯，用4N NaOH水溶液萃取水相。用浓盐酸酸化水相并且用乙酸乙酯萃取。用饱和氯化钠水溶液洗涤水相，用硫酸镁干燥并且蒸发至得到油状物。将残余物溶于150ml沸腾乙醇。将该溶液冷却至室温，产物结晶，通过过滤分离并且干燥。产量5.1g(45％)。
实施例4 N-(3，5-二氟-苯基)-N′-[3-(5-氧代-4，5-二氢-[1，2，4]噁二唑-3-基)-4′-三氟甲基-联苯-4-基]脲
在100ml干燥甲苯中悬浮5g3-(4-氨基-4′-三氟甲基-联苯-3-基)-4H-[1，2，4]噁二唑-5-酮并且加入2.5g 3，5-二氟苯基异氰酸酯，将该反应混合物在室温下搅拌过夜，加入1.3g 3，5-二氟苯基异氰酸酯，并且持续搅拌过夜。加入3，5-二氟苯基异氰酸酯(1.3g)和100ml乙腈，将该反应混合物在室温下搅拌90分钟并且蒸发至干。将残余物溶于100ml沸腾丙酮，然后冷却至0℃并且过滤。使沉淀从200ml乙醇中重结晶，在过滤后，在加热的同时将该溶液加入到400ml水中。通过过滤分离产物。产量4g(54％)mp.>150℃分解。
按照类似方式制备: N-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-N′-{3-(5-氧代-4，5-二氢-[1，2，4]-噁二唑-3-基)-4′-三氟甲基-联苯-4-基}脲。Mp>139℃分解 N-(3-溴-苯基)-N′-{3-(5-氧代-4，5-二氢-[1，2，4]-噁二唑-3-基)-4′-三氟甲基-联苯-4-基}脲。Mp>200℃分解 N-(2-氯-苯基)-N′-{3-(5-氧代-4，5-二氢-[1，2，4]-噁二唑-3-基)-4′-三氟甲基-联苯-4-基}脲。Mp220-222℃。
实施例5 体外人红细胞氯化物电导 按照如WO 00/24707说明书中的“Biology”段落中的程序测定氯化物电导。从这些研究中计算的参数为IC50值-50％的氯化物通道被阻断时的浓度。
实施例4的第一个化合物N-(3，5-二氟-苯基)-N′-[3-(5-氧代-4，5-二氢-[1，2，4]噁二唑-3-基)-4′-三氟甲基-联苯-4-基]脲显示出0.28μM的IC50值。
实施例6 体积调节的阴离子通道(VRAC)效应 如Helix等在J Membr Biol.2003 196(2):83-94中所述，使用人胚肾细胞(HEK293)，通过全细胞膜片钳技术测试对体积调节的阴离子通道(VRAC)的活性。简言之，通过使细胞在低渗(75％张度)胞外盐溶液中溶胀活化VRAC，并且测定电压钳(voltage ramps)引起的阴离子电流与时间的关系。在该电流稳定后，向胞外溶液中加入测试化合物；并且出现时间依赖性阻断，计算KD值。
实施例4的第一个化合物N-(3，5-二氟-苯基)-N′-[3-(5-氧代-4，5-二氢-[1，2，4]噁二唑-3-基)-4′-三氟甲基-联苯-4-基]脲显示出0.23μM的KD值。
实施例7 人BK通道筛选 按照电生理学方式在能够表达人BK通道的爪蟾卵母细胞(Xenopus Oocytes)上测定化合物对膜电流的影响，并且使用传统的两电极电压钳制术记录通过所述通道的电流。
以0.3μM测试化合物的浓度对实施例4的第一个化合物N-(3，5-二氟-苯基)-N′-[3-(5-氧代-4，5-二氢-[1，2，4]噁二唑-3-基)-4′-三氟甲基-联苯-4-基]脲进行此测定，并且它导致BK电流比基础电流增加200％以上。


本发明涉及用作氯化物通道阻滞剂或BKCa通道调节剂的新颖的二苯基脲衍生物。本发明在其它方面中涉及这些化合物在疗法中的应用并且涉及包含本发明化合物的药物组合物。