专利名称：肽酶可切断的、定向的抗肿瘤药及其治疗用途的制作方法很多抗肿瘤化合物在其用途上受到限制，因为其治疗指数狭窄，即当这些化合物在某些剂量水平以上给药时诱发的毒性超过了其所提供的效益。例如，Anthracycline(如多柔比星)疗法的局限性在于该药物以超过累计500～550mg多柔比星/m2的水平给药会产生心毒性和脊髓抑制的实质性风险(von Hoff等人)。然而，像多柔比星这样的化合物往往依然是供特定化疗形式选择的药物；因此，开发能降低该化合物毒性同时保持其医疗潜力的手段会是十分有用的。数十年来一直在尝试的、逼近这个目标的一种手段是设计能在肿瘤组织中差异性活化的药物前体分子，即在给药时无活性或活性显著低、能在肿瘤组织中选择性加工从而在其中有治疗活性的药物分子。例如，Leu-Dox(与anthracycline多柔比星连接的氨基酸亮氨酸)是一种药物前体，已发现需要由胞内蛋白酶使来自该药物前体的氨基酸水解才能释放出该anthracycline(Boven等人(1990))。在小鼠中Leu-Dox向Dox的转化迅速发生，尽管不完全，但达到大约20％总转化率(de Jong等人(1992a))。当Leu-Dox对人体给药时取得了类似观察结果(de Jong等人(1992b)；Canal等人)；在一个I期试验中，在肿瘤组织中迅速发生Leu-Dox向Dox的大约25％转化。进而，在人卵巢肿瘤异种移植小鼠模型中，Leu-Dox已显示出在等毒剂量下是比游离多柔比星更有效的抗肿瘤剂(Boven等人(1992))。额外氨基酸与Leu-Dox的连接可能进一步降低这种化合物对那些不分泌所需蛋白酶的细胞的有效性，因而进一步限制了该化合物在肿瘤外的活性。在这一方面，例如，Denmeade等人已经显示一种肽-多柔比星药物前体是以前列腺特异性抗原(“PSA”)为目标的。Ac-HSSKLQ-Leu-Dox是PSA蛋白酶的一种底物，而且有对抗那些表达蛋白酶活性的前列腺肿瘤细胞的活性。进而，除Leu-Dox外，anthracycline上的其它单肽和二肽连接体也已被显示有生物活性(Masquelier等人；Baurain等人)。尽管还没有人报告二肽-anthracycline连接体的综合分析，但由Leu-Leu-柔红霉素、Ala-Leu-柔红霉素、和Leu-Ala-柔红霉素组成的化合物已被显示具有可观的生物活性。各种基质金属蛋白酶(“MMP”)已有人描述，而且已经把可识别肽断裂部位与它们联系在一起(Nagase等人；McGeehan等人)。进而，已经有人在它们与转移性肿瘤发展之间建立了联系。在这一方面，多名研究者已经显示，酶MMP-2、MMP-9、和最近的MMP-14(MT1-MMP)是与肿瘤进展有联系(见诸如McDonnell和Fingleton；MacDougall和Matrisian)。也已经有人报告，与对应的正常组织相比，肺癌、胃癌、和乳腺癌中MMP-2的表达增加了。增加MMP表达不限于肿瘤本身。在接近于该肿瘤的基质细胞和内皮细胞中已经观察到MMP-2和MMP-14的表达增加(例如Snoini，Brummer)。因此，在肿瘤部位上，MMP的表达水平提高了。在肿瘤及其支持组织中提高的MMP表达意味着也存在着提高的活性。虽然MMP-2和MMP-9酶的前体形式是细胞分泌的而且容易在人血清和尿中检出(Garbisa等人；Moses等人)，但该酶的活性形式是在细胞表面上发现的。在MMP-2的情况下，其前体形式可以在细胞表面上由跨膜酶MMP-14活化(Sato等人；Kurschatt等人)。也已经有人描述前体MMP-2的活化是通过该酶的前体形式与一种整合素(integrin)的结合发生的(Brooks等人)。已经有人显示MMP-9的活化是通过对细胞表面抗原CD-44的特异性结合发生的(Yu和Stamenkovic)。根据这些发现，预期提高的MMP蛋白酶活性在肿瘤细胞表面上将是最高的，因此，药物前体的差异性活化在肿瘤部位上将是最高的。Safavy等人(A.Safavy等人，J.Med.Chem.424919-4924(1999))描述了一种七氨基酸合成肽对一种抗肿瘤剂紫杉醇的附着。Trouet和Baurain在1999年10月5日公布的美国专利5,962,216中描述了肿瘤活化的药物前体化合物。WO99/02175、WO98/18493和WO98/10651使某些前列腺特异性抗原(“PSA”)可切断肽对细胞毒性剂连接。
WO98/16240使肽附着到脂质上，以便使所得到的连接体随后包括在脂质体中，从而使该小泡的细胞毒性剂内容物的递送定向于肿瘤。
WO00/33888描述了由一种称为trouase的酶加工的多柔比星的肽连接体。
WO00/21571描述了FAP(成纤维细胞活化蛋白)把多柔比星递送到肿瘤的用途。
WO00/64486主张MMP活化的连接体用于把物质递送到肿瘤。
然而，当前仍然需要开发一些化疗用药物前体化合物，使其在给药时无活性或活性显著低、从而降低该化合物的毒性，并能在肿瘤组织中或其附近选择性加工从而变成有治疗活性的抗癌剂。
本发明公开了可用于癌症治疗的新型化合物，其中包含一种与多柔比星连接的基质金属蛋白酶(MMP)可切断的肽。进而，本发明公开了可用于癌症治疗的新型化合物，该化合物在由基质金属蛋白酶切断时产生一种第二肽-多柔比星底物，后者可由在肿瘤环境中表达的氨基肽酶进一步切断或加工。以上参考文献中无一提出了本发明的化合物。
发明概要本发明提供一种化合物，其中包含一种与一种抗肿瘤剂例如anthracycline、长春花生物碱、博莱霉素、丝裂霉素、紫杉烷、细胞毒性核苷酸、喋啶、或鬼臼毒素连接的可酶切肽。可酶切肽是一种包含能被膜结合和/或细胞分泌的肽酶例如基质金属蛋白酶选择性识别和切断的氨基酸顺序的肽。这样的化合物可用于癌症治疗。
这里也提供的是一种药物组合物，其中包含所述化合物和可药用载体。这里进一步提供的是一种把本发明化合物递送到患有癌症或其它病症的哺乳动物的细胞中的方法，包含在一种能使该肽切断的肽酶的存在下使该细胞与该化合物接触。
要理解的是，为清晰起见而在各独立实施方案范围内描述的本发明的某些特色也可能综合性地在一种单一实施方案中提供。反之，为简洁起见而在一种单一实施方案范围内描述的本发明的各种特色也可能单独地或以任何适用亚组合方式提供。
本发明详细说明本发明提供一种化合物，其中包含与一种可酶切肽连接的一种抗肿瘤剂。
在第一种实施方案中，本发明提供式(I)的一种化合物ECP-A(I)或其可药用盐形式，其中ECP是一种与A连接的可酶切肽并选自Cap-Paa-Xa2-Gly-Xp1-Laa-；Cap-Xa2-Gly-Xp1-Laa-；Cap-Paa-Xa2-Gly-Xp1-Xp2-Laa-；Cap-Xa2-Gly-Xp1-Xp2-Laa-；Cap-Gly-Xp1-Xp2-Laa-；Cap-Paa-Xa2-Gly-Xp1-Xp2-Xp3-Laa-；Cap-Xa2-Gly-Xp1-Xp2-Xp3-Laa-；Cap-Gly-Xp1-Xp2-Xp3-Laa-；Cap-Paa-Xa2-Sar-Xp1-Laa-；Cap-Xa2-Sar-Xp1-Laa-；C ap-Paa-Xa2-Sar-Xp1-Xp2-Laa-；Cap-Xa2-Sar-Xp1-Xp2-Laa-；Cap-Sar-Xp1-Xp2-Laa-；Cap-Paa-Xa2-Sar-Xp1-Xp2-Xp3-Laa-；Cap-Xa2-Sar-Xp1-Xp2-Xp3-Laa-；和Cap-Sar-Xp1-Xp2-Xp3-Laa-；Paa是一种Pro、Hyp、Aze、高-Pro、Chg、Fph、Npa、Tze、或脯氨酸模拟物；Xa2是一种氨基酸；
Xp1是一种氨基酸，其中-Gly-Xp1-或-Sra-Xp1-形成一个可由一种基质酶(matrixin)切断的键；Xp2是一种氨基酸；Xp3是一种氨基酸；Laa是一种氨基酸，选自Leu、Ile、Nle、β-高-Leu、Hol、Hos、Ala、α-Ala、Cha、Cba、Cba、Cta、4-吡啶基-Ala、3-吡啶基-Ala、2-吡啶基-Ala、Gly、Abu、Aib、Iva、Nva、Ahx、Aph、Amh、Phe、Bip、Glu、Arg、Trp、Tyr、O-(C1-C4烷基)-Tyr、O-(苯基(C1-C4烷基))-Tyr、(C3-C8烷基)-Gly、和氨基烷基羧酸；Cap是一个N-端基，选自R-、Xa4-、和R-Xa4-；Xa4-是一种氨基酸；R是一种氨基封端基团(amino capping group)；和A是一种抗肿瘤剂。
〔2〕在一种优选实施方案中，本发明提供式(I)的一种化合物，其中，A是多柔比星、一种多柔比星衍生物、或一种多柔比星类似物。
〔3〕在一种更优选的实施方案中，本发明提供式(I)的一种化合物，其中，A是多柔比星。
〔4〕在一种优选实施方案中，本发明提供式(Ia)的一种化合物 或其可药用盐形式，其中ECP是一种可酶切肽，选自
Cap-Paa-Xa2-Gly-Xp1-Laa-；Cap-Xa2-Gly-Xp1-Laa-；Cap-Paa-Xa2-Gly-Xp1-Xp2-Laa-；Cap-Xa2-Gly-Xp1-Xp2-Laa-；Cap-Gly-Xp1-Xp2-Laa-；Cap-Paa-Xa2-Gly-Xp1-Xp2-Xp3-Laa-；Cap-Xa2-Gly-Xp1-Xp2-Xp3-Laa-；Cap-Gly-Xp1-Xp2-Xp3-Laa-；Cap-Paa-Xa2-Sar-Xp1-Laa-；Cap-Xa2-Sar-Xp1-Laa-；Cap-Paa-Xa2-Sar-Xp1-Xp2-Laa-；CaP-Xa2-Sar-Xp1-Xp2-Laa-；Cap-Sar-Xp1-Xp2-Laa-；Cap-Paa-Xa2-Sar-Xp1-Xp2-Xp3-Laa-；Cap-Xa2-Sar-Xp1-Xp2-Xp3-Laa-；和Cap-Sar-Xp1-Xp2-Xp3-Laa-；Paa是一种Pro、Hyp、Aze、高-Pro、Chg、Fph、Npa、Tze、或脯氨酸模拟物；Xa2是一种氨基酸；Xp1是一种氨基酸，其中-Gly-Xp1-或-Sra-Xp1-形成一个可由一种基质酶切断的键；Xp2是一种氨基酸；Xp3是一种氨基酸；Laa是一种氨基酸，选自Leu、Ile、Nle、β-高-Leu、Hol、Hos、Ala、α-Ala、Cha、Cba、Cba、Cta、4-吡啶基-Ala、3-吡啶基-Ala、2-吡啶基-Ala、Gly、Abu、Aib、Iva、Nva、Ahx、Aph、Amh、Phe、Bip、Glu、Arg、Trp、Tyr、O-(C1-C4烷基)-Tyr、O-(苯基(C1-C4烷基))-Tyr、(C3-C8烷基)-Gly、和氨基烷基羧酸；
Cap是一个N-端基，选自R-、Xa4-、和R-Xa4-；Xa4-是一种氨基酸；R选自H3CC(＝O)-；HOC(＝O)-(CH2)vC(＝O)-；式中v是1、2、3、4、5或6；H3CO-(CH2CH2O)t-CH2C(＝O)-，HO2CCH2O-(CH2CH2O)t-CH2C(＝O)-，H2N-(CH2CH2O)t-CH2C(＝O)-，和H3CC(＝O)HN-(CH2CH2O)t-CH2C(＝O)-，式中t是1、2、3或4；R1-C(＝O)-；R1-S(＝O)2-；R1-NHC(＝O)-；R1a-CH2C(＝O)-；有-OR3取代的脯氨酸；有0～1个R4取代的C1-C4烷基；2-羧基苯基-C(＝O)-；和-(O＝)C-苯基-C(＝O)-；R1是C3-C6环烷基，有0、1、或2个选自-OH、甲氧基和-CO2H的取代基取代；5～6元杂环，所述杂环是饱和的、部分饱和的或不饱和的；所述杂环含有1、2、3、或4个选自N、O、和S的杂原子；所述杂环任选地有1或2个-OH、甲氧基或-CO2H取代；苯基，有0、1、或2个选自-OH、甲氧基和-CO2H的取代基取代；或C1-C6烷基，有0～4个R1a取代；R1a是-OH、C1-C3烷基、C1-C4烷氧基、-CO2H、-N(CH2CH2)2N-R2、-SO3H；C3-C6环烷基，有0、1、或2个选自甲氧基和-OH的取代基取代；5～6元杂环，所述杂环是饱和的、部分饱和的或不饱和的；所述杂环含有1、2、3、或4个选自N、O、和S的杂原子，所述杂环任选地有1或2个-OH取代；苯基，有0、1、或2个选自甲氧基和-OH的取代基取代；R2是-H、H2N(C2-C4烷基)-、乙酰基(H)N(C2-C4烷基)-、或乙酰基；
R3是-H、C1-C4烷基、C3-C6环烷基、苯基、或苄基；R4是-OH、C1-C3烷基、C1-C4烷氧基、-CO2H、-N(CH2CH2)2N-R2；C3-C6环烷基，有0、1、或2个选自甲氧基和-OH的取代基取代；5～6元杂环，所述杂环是饱和的、部分饱和的或不饱和的，所述杂环含有1、2、3、或4个选自N、O、或S的杂原子，所述杂环任选地有1或2个-OH取代；或C6-C10碳环，有0、1、或2个选自甲氧基和-OH的取代基取代；〔5〕在一种优选实施方案中，本发明提供式(Ia)的一种化合物，或其可药用盐形式，其中ECP是一种可酶切肽，选自Cap-Paa-Xa2-Gly-Xp1-Laa-；Cap-Xa2-Gly-Xp1-Laa-；Cap-Paa-Xa2-Gly-Xp1-Xp2-Laa-；Cap-Xa2-Gly-Xp1-Xp2-Laa-；Cap-Gly-Xp1-Xp2-Laa-；Cap-Paa-Xa2-Gly-Xp1-Xp2-Xp3-Laa-；Cap-Xa2-Gly-Xp1-Xp2-Xp3-Laa-；Cap-Gly-Xp1-Xp2-Xp3-Laa-；Paa是一种Pro、Hyp、Aze、高-Pro、Chg、Fph、Npa、Tzc、或脯氨酸模拟物；Xa2是一种氨基酸；Xp1是一种氨基酸，其中-Gly-Xp1-形成一个可由一种基质酶切断的键；Xp2是一种氨基酸；Xp3是一种氨基酸；Laa是一种氨基酸，选自Leu、Ile、Nle、β-高-Leu、Hol、Hos、Ala、β-Ala、Cha、Cba、Cba、Cta、4-吡啶基-Ala、Abu、Aib、Iva、Nva、Phe、Bip、Tyr、O-苄基-Tyr；和Cap是一个N-端基，选自R-、Xa4-、R-Xa4-；Xa4-是一种氨基酸；
R选自H3CC(＝O)-；HOC(＝O)-(CH2)vC(＝O)-；式中v是1、2、3、或4；H3CO-(CH2CH2O)t-CH2C(＝O)-，HO2CCH2O-(CH2CH2O)t-CH2C(＝O)-，H2N-(CH2CH2O)t-CH2C(＝O)-，和H3CC(＝O)HN-(CH2CH2O)t-CH2C(＝O)-，式中t是1、2、或3；R1-C(＝O)-；R1-S(＝O)2-；R1-NHC(＝O)-；R1a-CH2C(＝O)-；有-OR3取代的脯氨酸；有0～1个R4取代的C1-C4烷基；HO3SCH2CH(NH2)C(＝O)-；2-羧基苯基-C(＝O)-；和-(O＝)C-苯基-C(＝O)-；R1是C3-C6环烷基，有0、1、或2个选自-OH、甲氧基和-CO2H的取代基取代；5～6元杂环，所述杂环是饱和的、部分饱和的或不饱和的；所述杂环含有1、2、3、或4个选自N、O、和S的杂原子；所述杂环任选地有1或2个-OH、甲氧基或-CO2H取代；苯基，有0、1、或2个选自-OH、甲氧基和-CO2H的取代基取代；或C1-C6烷基，有0～4个R1a取代；R1a是-OH、C1-C3烷基、C1-C4烷氧基、-CO2H、-N(CH2CH2)2N-R2、-SO3H；C3-C6环烷基，有0、1、或2个选自甲氧基和-OH的取代基取代；5～6元杂环，所述杂环是饱和的、部分饱和的或不饱和的；所述杂环含有1、2、3、或4个选自N、O、和S的杂原子，所述杂环任选地有1或2个-OH取代；苯基，有0、1、或2个选自甲氧基和-OH的取代基取代；R2是-H、H2N(C2-C4烷基)-、乙酰基(H)N(C2-C4烷基)-、或乙酰基；R3是-H、C1-C4烷基、C3-C6环烷基、苯基、或苄基；
R4是-OH、C1-C3烷基、C1-C4烷氧基、-CO2H、-N(CH2CH2)2N-R2；C3-C6环烷基，有0、1、或2个选自甲氧基和-OH的取代基取代；5～6元杂环，所述杂环是饱和的、部分饱和的或不饱和的，所述杂环含有1、2、3、或4个选自N、O、或S的杂原子，所述杂环任选地有1或2个-OH取代；或C6-C10碳环，有0、1、或2个选自甲氧基和-OH的取代基取代；〔6〕在一种优选的实施方案中，本发明提供式(Ia)的一种化合物，其中，-Gly-Xp1-形成一个选自MMP-2、MMP-9、和MMP-14的基质酶可切断的键。
〔7〕在一种优选的实施方案中，本发明提供式(Ia)的一种化合物，其中，-Gly-Xp1-形成一个选自MMP-2和MMP-9的基质酶可切断的键。
〔8〕在一种优选的实施方案中，本发明提供式(Ia)的一种化合物，其中，-Gly-Xp1-形成一个基质酶MMP-14可切断的键。
〔9〕在一种优选的实施方案中，本发明提供式(Ia)的一种化合物，其中，-Gly-Xp1-形成一个MMP-2、MMP-9、和MMP-14可切断的键。
〔10〕在一种优选的实施方案中，本发明提供式(Ia)的一种化合物，或其可药用盐形式，其中ECP是一种可酶切肽，选自Cap-Paa-Xa2-Gly-Xp1-Laa-；Cap-Xa2-Gly-Xp1-Laa-；Cap-Paa-Xa2-Gly-Xp1-Xp2-Laa-；Cap-Xa2-Gly-Xp1-Xp2-Laa-；Cap-Gly-Xp1-Xp2-Laa-；Cap-Paa-Xa2-Gly-Xp1-Xp2-Xp3-Laa-；Cap-Xa2-Gly-Xp1-Xp2-Xp3-Laa-；Cap-Gly-Xp1-Xp2-Xp3-Laa-；式中-Gly-Xp1-形成一个基质酶可切断的键；Paa是一种Pro、Hyp、Aze、高-Pro、Chg、Fph、Npa、Tzc、或式 的脯氨酸模拟物，式中R5选自H、卤素、C1-C6烷基、-OH、C1-C6烷氧基、和苄氧基，n是2、3、4或5；Xa2是一种氨基酸，选自Hof、Leu、His、Arg、Gln、Ile、Val、Lys、(R)-Leu、Orn、β-Ala、γ-Abu、Cha、Chg、Dap、Cit、N-甲基-Leu、戊内酰胺、N，N-二甲基-Lys、4-氮杂-Phe、吗啉基丙基-Gly、N-甲基哌嗪丙基-Gly、4-氮杂-Hof、Ala、Asn、Asp、Aze、Cys、Glu、Gly、Hyp、Irg、Met、Phe、Phe(4-氟)、Pro、Sar、Ser、Thr、Trp、Tyr、Cya、Hca、和Spa；Xp1是一种氨基酸，选自Hof、Leu、Bip、Phe、正-Leu、Tha、Phg、Val、Glu、Asn、Ser、Ala、高-Tyr、Aze、4-氮杂-Hof、O-(3-吡啶基)-Tyr、O-(4-吡啶基)-Tyr、O-苄基-Tyr、O-苄基-Thr、O-苄基-Ser、O-甲基-Ser、O-烯丙基-Ser、4-硝基-Hof、N-甲基-Leu、O-(4-吡啶基甲基)-Tyr、4-羟基苯基-Gly、苯基丙基-Gly、苯乙烯基-Ala、或2Nal；Xp2是一种氨基酸，选自Tyr、Ala、Ser、Leu、Gln、Val、Glu、His、Lys、Arg、Orn、Aze、Hof、高-Tyr、Cit、4-氮杂-Phe、N，N-二甲基-Lys、Dab、Dap、Asn、Asp、Aze、Cha、Cys、Gly、Hyp、Ile、Irg、Met、Phe、Phe(4-氟)、Pro、Sar、Thr、Trp、Cya、Hca、Spa、吗啉基丙基-Gly、O-(4-吡啶基甲基)-Tyr、和N-甲基哌嗪丙基-Gly；Xp3是一种氨基酸，选自Tyr、Ala、Ser、Leu、Hof、Arg、Asn、Asp、Aze、Cha、Cys、Dpa、Gln、Glu、Gly、His、Hyp、Ile、Irg、Lys、Met、Orn、Phe、Phe(4-氟)、Pro、Sar、Thr、Trp、和Val；Laa是一种氨基酸，选自Leu、Ile、Nle、β-高-Leu、Hol、Hos、Ala、β-Ala、Cha、Cba、Cba、Cta、4-吡啶基-Ala、Abu、Aib、Iva、Nva、和Phe；Cap是一种N-端基，选自R-、Xa4-、和R-Xa4-；Xa4是一种氨基酸，选自Gly、Pro、γ-Glu、Dmg、Ala、Arg、Asn、Asp、β-Asp、Aze、Cha、Cys、Dpa、Gln、Glu、His、Hyp、Ile、Irg、Leu、Lys、Met、Orn、Phe、Sar、Ser、Thr、Trp、Tyr、或Val；R选自H3CC(＝O)-；HOC(＝O)CH2CH2C(＝O)-；HOC(＝O)CH2CH2CH2C(＝O)-；HOC(＝O)CH2CH2CH2CH2C(＝O)-；H3COCH2CH2OCH2C(＝O)-，H3COCH2CH2OCH2CH2OCH2C(＝O)-，HO2CCH2OCH2CH2OCH2C(＝O)-，H2NCH2CH2OCH2C(＝O)-，H2NCH2CH2OCH2CH2OCH2C(＝O)-，H3CC(＝O)HNCH2CH2OCH2C(＝O)-，H3CC(＝O)HNCH2CH2OCH2CH2OCH2C(＝O)-，H2NCH2CH2N(CH2CH2)2NCH2C(O)-；H3CC(＝O)HNCH2CH2N(CH2CH2)2NCH2C(O)-；H3CC(＝O)N(CH2CH2)2NCH2C(O)-；O(CH2CH2)2NCH2CH2NHC(O)-HO2CCH2C(CO2H)(OH)CH2C(＝O)-，HO2CCH2C(CH3)(OH)CH2C(＝O)-，2-羧基环己基-C(＝O)-；2-羧基环戊基-C(＝O)-；羧苄氧基；4-甲氧基苯磺酰基；环丙基羰基；环丁基羰基；3-吡啶羰基；2-吡嗪羰基；
四唑乙酰基；新戊酰基；甲氧乙酰基；羟基脯氨酸；和4-(2-(5，6，7，8-四氢萘基))丁基。
〔11〕在一种优选的实施方案中，本发明提供式(Ia)的一种化合物，其中，-Gly-Xp1-形成一个选自MMP-2、MMP-9、和MMP-14的基质酶可切断的键。
〔12〕在一种优选的实施方案中，本发明提供式(Ia)的一种化合物，其中，-Gly-Xp1-形成一个选自MMP-2和MMP-9的基质酶可切断的键。
〔13〕在一种优选的实施方案中，本发明提供式(Ia)的一种化合物，其中，-Gly-Xp1-形成一个基质酶MMP-14可切断的键。
〔14〕在一种优选的实施方案中，本发明提供式(Ia)的一种化合物，其中，-Gly-Xp1-形成一个MMP-2、MMP-9、和MMP-14可切断的键。
〔15〕在一种优选的实施方案中，本发明提供式(Ia)的一种化合物或其可药用盐形式，其中ECP是一种可酶切肽，选自
Cap-Paa-Xa2-Gly-Leu-Laa-；Cap-Paa-Xa2-Gly-Hof-Laa-；Cap-Xa2-Gly-Leu-Laa-；Cap-Xa2-Gly-Hof-Laa-；Cap-Paa-Xa2-Gly-Leu-Xp2-Laa-；Cap-Paa-Xa2-Gly-Hof-Xp2-Laa-；Cap-Xa2-Gly-Leu-Xp2-Laa-；Cap-Xa2-Gly-Hof-Xp2-Laa-；Cap-Gly-Leu-Xp2-Laa-；和Cap-Gly-Hof-Xp2-Laa-；式中-Gly-Leu-和-Gly-Hof-形成一个基质酶可切断键；Paa是一个Pro、Hyp、Aze、高-Pro、或Npa；Xa2是一种氨基酸，选自Hof、Leu、His、Arg、Gln、Ile、Val、Lys、(R)-Leu、Orn、β-Ala、γ-Abu、Cha、Chg、Dap、Cit、N-甲基-Leu、戊内酰胺、N，N-二甲基-Lys、4-氮杂-Phe、吗啉基丙基-Gly、N-甲基哌嗪丙基-Gly、4-氮杂-Hof、Ala、Asn、Asp、Aze、Cys、Glu、Gly、Hyp、Irg、Met、Phe、Phe(4-氟)、Pro、Sar、Ser、Thr、Trp、Tyr、Cya、Hca、和Spa；Xp2是一种氨基酸，选自Tyr、Ala、Ser、Leu、Gln、Val、Glu、His、Lys、Arg、Orn、Aze、Hof、高-Tyr、Cit、4-氮杂-Phe、N，N-二甲基-Lys、Dab、Dap、Asn、Asp、Aze、Cha、Cys、Gly、Hyp、Ile、Irg、Met、Phe、Phe(4-氟)、Pro、Sar、Thr、Trp、Cya、Hca、Spa、吗啉基丙基-Gly、O-(4-吡啶基甲基)-Tyr、和N-甲基哌嗪丙基-Gly；Laa是一种氨基酸，选自Leu、Cha、Nle、和Hol；Cap是一个N-端基，选自R-、Xa4-、和R-Xa4-；Xa4-是一种氨基酸，选自Gly、Pro、γ-Glu、和Dmg；R选自H3CC(＝O)-；
HOC(＝O)CH2CH2C(＝O)-；HOC(＝O)CH2CH2CH2C(＝O)-；HOC(＝O)CH2CH2CH2CH2C(＝O)-；H3COCH2CH2OCH2C(＝O)-，H3COCH2CH2OCH2CH2OCH2C(＝O)-，HO2CCH2OCH2CH2OCH2C(＝O)-，H2NCH2CH2OCH2C(＝O)-，H2NCH2CH2OCH2CH2OCH2C(＝O)-，H3CC(＝O)HNCH2CH2OCH2C(＝O)-，H3CC(＝O)HNCH2CH2OCH2CH2OCH2C(＝O)-，H2NCH2CH2N(CH2CH2)2NCH2C(O)-；H3CC(＝O)HNCH2CH2N(CH2CH2)2NCH2C(O)-；H3CC(＝O)N(CH2CH2)2NCH2C(O)-；O(CH2CH2)2NCH2CH2NHC(O)-HO2CCH2C(CO2H)(OH)CH2C(＝O)-，HO2CCH2C(CH3)(OH)CH2C(＝O)-，2-羧基环己基-C(＝O)-；2-羧基环戊基-C(＝O)-；羧苄氧基；4-甲氧基苯磺酰基；环丙基羰基；环丁基羰基；3-吡啶羰基；2-吡嗪羰基；四唑乙酰基；新戊酰基；甲氧乙酰基；羟基脯氨酸；和4-(2-(5，6，7，8-四氢萘基))丁基。
〔16〕在一种优选的实施方案中，本发明提供式(Ia)的一种化合物，其中-Gly-Leu-和Gly-Hof-形成一个选自MMP-2、MMP-9、和MMP-14的基质酶可切断的键。
〔17〕在一种优选的实施方案中，本发明提供式(Ia)的一种化合物，其中-Gly-Leu-和Gly-Hof-形成一个选自MMP-2和MMP-9的基质酶可切断的键。
〔18〕在一种优选的实施方案中，本发明提供式(Ia)的一种化合物，其中-Gly-Leu-和Gly-Hof-形成一个基质酶MMP-14可切断的键。
〔19〕在一种优选的实施方案中，本发明提供式(Ia)的一种化合物，其中-Gly-Leu-和Gly-Hof-形成一个选自MMP-2、MMP-9、和MMP-14可切断的键。
〔20〕在一种优选的实施方案中，本发明提供式(Ia)的一种化合物或其可药用盐形式，其中ECP是一种可酶切肽，选自Cap-Paa-Xa2-Gly-Leu-Leu-；Cap-Paa-Xa2-Gly-Leu-Cha-；Cap-Paa-Xa2-Gly-Leu-Nle-；Cap-Paa-Xa2-Gly-Leu-Hol-；Cap-Paa-Xa2-Gly-Hof-Leu-；Cap-Paa-Xa2-Gly-Hof-Cha-；Cap-Paa-Xa2-Gly-Hof-Nle-；
Caap-Paa-Xa2-Gly-Hof-Hol-；Cap-Paa-Xa2-Gly-Leu-Xp2-Leu-；Cap-Paa-Xa2-Gly-Leu-Xp2-Cha-；Cap-Paa-Xa2-Gly-Leu-Xp2-Nle-；Cap-Paa-Xa2-Gly-Leu-Xp2-Hol-；Cap-Paa-Xa2-Gly-Hof-Xp2-Leu-；Cap-Paa-Xa2-Gly-Hof-Xp2-Cha-；Cap-Paa-Xa2-Gly-Hof-Xp2-Nle-；Cap-Paa-Xa2-Gly-Hof-Xp2-Hol-；式中，-Gly-Leu-和Gly-Hof-形成一个基质酶可切断键；Paa是一种Pro、Hyp、Aze、高-Pro、或Npa；Xa2是一种氨基酸，选自Hof、Leu、His、Arg、Gln、Ile、Val、Lys、(R)-Leu、Orn、β-Ala、γ-Abu、Cha、Chg、Dap、Cit、N-甲基-Leu、戊内酰胺、N，N-二甲基-Lys、4-氮杂-Phe、吗啉基丙基-Gly、N-甲基哌嗪丙基-Gly、4-氮杂-Hof、Ala、Asn、Asp、Aze、Cys、Glu、Gly、Hyp、Irg、Met、Phe、Phe(4-氟)、Pro、Sar、Ser、Thr、Trp、和Tyr；Xp2是一种氨基酸，选自Tyr、Ala、Ser、Leu、Gln、Val、Glu、His、Lys、Arg、Orn、Aze、Hof、高-Tyr、Cit、4-氮杂-Phe、N，N-二甲基-Lys、Dab、Dap、Asn、Asp、Aze、Cha、Cys、Gly、Hyp、Ile、Irg、Met、Phe、Phe(4-氟)、Pro、Sar、Thr、Trp、吗啉基丙基-Gly、O-(4-吡啶基甲基)-Tyr、和N-甲基哌嗪丙基-Gly；Cap是一个N-端基，选自R-、Xa4-和R-Xa4-；Xa4-是一种氨基酸，选自Gly、Pro、γ-Glu、和Dmg；R选自H3CC(＝O)-；HOC(＝O)CH2CH2C(＝O)-；HOC(＝O)CH2CH2CH2C(＝O)-；HOC(＝O)CH2CH2CH2CH2C(＝O)-；H3COCH2CH2OCH2C(＝O)-；H3COCH2CH2OCH2CH2OCH2C(＝O)-；
2-羧基环己基-C(＝O)-；2-羧基环戊基-C(＝O)-；和四唑乙酰基。
〔21〕在一种优选实施方案中，本发明提供式(Ia)的一种化合物，其中-Gly-Leu-和Gly-Hof-形成一个选自MMP-2、MMP-9、和MMP-14的基质酶可切断的键。
〔22〕在一种优选实施方案中，本发明提供式(Ia)的一种化合物，其中-Gly-Leu-和Gly-Hof-形成一个选自MMP-2和MMP-9的基质酶可切断的键。
〔23〕在一种优选实施方案中，本发明提供式(Ia)的一种化合物，其中-Gly-Leu-和Gly-Hof-形成一个基质酶MMP-14可切断的键。
〔24〕在一种优选实施方案中，本发明提供式(Ia)的一种化合物，其中-Gly-Leu-和Gly-Hof-形成一个MMP-2、MMP-9、和MMP-14可切断的键。
〔25〕在一种优选的实施方案中，本发明提供式(Ia)的一种化合物，或其可药用盐形式，其中ECP是可酶切肽，选自Cap-Xa2-Gly-Leu-Leu-；Cap-Xa2-Gly-Leu-Cha-；Cap-Xa2-Gly-Leu-Nle-；Cap-Xa2-Gly-Leu-Hol-；Cap-Xa2-Gly-Hof-Leu-；Cap-Xa2-Gly-Hof-Cha-；
Cap-Xa2-Gly-Hof-Nle-；Cap-Xa2-Gly-Hof-Hol-；Cap-Xa2-Gly-Leu-Xp2-Leu-；Cap-Xa2-Gly-Leu-Xp2-Cha-；Cap-Xa2-Gly-Leu-Xp2-Nle-；Cap-Xa2-Gly-Leu-Xp2-Hol-；Cap-Xa2-Gly-Hof-Xp2-Leu-；Cap-Xa2-Gly-Hof-Xp2-Cha-；Cap-Xa2-Gly-Hof-Xp2-Nle-；和Cap-Xa2-Gly-Hof-Xp2-Hol-；式中，-Gly-Leu-和Gly-Hof-形成一个基质酶可切断键；Xa2是一种氨基酸，选自Hof、Leu、His、Arg、Gln、Ile、Val、Lys、(R)-Leu、Orn、β-Ala、γ-Abu、Cha、Chg、Dap、Cit、N-甲基-Leu、戊内酰胺、N，N-二甲基-Lys、4-氮杂-Phe、吗啉基丙基-Gly、N-甲基哌嗪丙基-Gly、4-氮杂-Hof、Ala、Asn、Asp、Aze、Cys、Glu、Gly、Hyp、Irg、Met、Phe、Phe(4-氟)、Pro、Sar、Ser、Thr、Trp、和Tyr；Xp2是一种氨基酸，选自Tyr、Ala、Ser、Leu、Gln、Val、Glu、His、Lys、Arg、Orn、Aze、Hof、高-Tyr、Cit、4-氮杂-Phe、N，N-二甲基-Lys、Dab、Dap、Asn、Asp、Aze、Cha、Cys、Gly、Hyp、Ile、Irg、Met、Phe、Phe(4-氟)、Pro、Sar、Thr、Trp、吗啉基丙基-Gly、O-(4-吡啶基甲基)-Tyr、和N-甲基哌嗪丙基-Gly；Cap是一个N-端基，选自R-、Xa4-和R-Xa4-；Xa4-是一种氨基酸，选自Gly、Pro、γ-Glu、和Dmg；R选自H3CC(＝O)-；HOC(＝O)CH2CH2C(＝O)-；HOC(＝O)CH2CH2CH2C(＝O)-；HOC(＝O)CH2CH2CH2CH2C(＝O)-；H3COCH2CH2OCH2C(＝O)-；H3COCH2CH2OCH2CH2OCH2C(＝O)-；2-羧基环己基-C(＝O)-；2-羧基环戊基-C(＝O)-；和四唑乙酰基。
〔26〕在一种优选实施方案中，本发明提供式(Ia)的一种化合物，其中-Gly-Leu-和Gly-Hof-形成一个选自MMP-2、MMP-9、和MMP-14的基质酶可切断的键。
〔27〕在一种优选实施方案中，本发明提供式(Ia)的一种化合物，其中-Gly-Leu-和Gly-Hof-形成一个选自MMP-2和MMP-9的基质酶可切断的键。
〔28〕在一种优选实施方案中，本发明提供式(Ia)的一种化合物，其中-Gly-Leu-和Gly-Hof-形成一个基质酶MMP-14可切断的键。
〔29〕在一种优选实施方案中，本发明提供式(Ia)的一种化合物，其中-Gly-Leu-和Gly-Hof-形成一个MMP-2、MMP-9、和MMP-14可切断的键。
〔30〕在另一种优选的实施方案中，本发明提供式(Ia)的一种化合物，或其可药用盐形式，其中ECP是一种可酶切肽，选自SEQ.ID.NO185 R-γ-E-P-Orn-G-Hof-E-L-；SEQ.ID.NO186R-γ-E-P-L-G-(O-苄基-S)-Y-L-；SEQ.ID.NO187 R-γ-E-P-L-G-(O-苄基-S)-Y-Nle-；SEQ.ID.NO188 R-P-L-G-(O-苄基-S)-Y-L-；SEQ.ID.NO189 R-P-L-G-(O-甲基-S)-Y-L-；SEQ ID NO190 R-P-L-G-(氮杂Hof)-Y-L-；SEQ.ID NO191R-P-L-G-Hof-Y-L-；SEQ ID NO192R-P-L-G-Hof-E-L-；SEQ.ID.NO193 R-P-L-G-(O-苄基-S)-Y-Nle-；SEQ.ID.NO194 R-P-L-G-(O-甲基-S)-Y-Nle-；SEQ.ID.NO195R-P-L-G-(氮杂Hof)-Y-Nle-；SEQ.ID.NO196 R-P-L-G-Hof-Y-Nle-；SEQ.ID.NO197 R-P-L-G-Hof-E-Nle-；SEQ.ID.NO198 R-P-L-G-(O-苄基-S)-Y-Hol-；SEQ.ID.NO199 R-P-L-G-(O-甲基-S)-Y-Hol-；SEQ.ID.NO200R-P-L-G-(氮杂Hof)-Y-Hol-；
SEQ.ID.NO201 R-P-L-G-Hof-Y-Hol-；和SEQ.ID.NO202 R-P-L-G-Hof-E-Hol-；R选自H3CC(＝O)-；HOC(＝O)-(CH2)vC(＝O)-；式中v是1、2、3、4、5或6；H3CO-(CH2CH2O)t-CH2C(＝O)-，HO2CCH2O-(CH2CH2O)t-CH2C(＝O)-，H2N-(CH2CH2O)t-CH2C(＝O)-，和H3CC(＝O)HN-(CH2CH2O)t-CH2C(＝O)-，式中t是1、2、3、或4；R1-C(＝O)-；R1-S(＝O)2-；R1-NHC(＝O)-；R1a-CH2C(＝O)-；有-OR3取代的脯氨酸；有0～1个R4取代的C1-C4烷基；2-羧基苯基-C(＝O)-；和-(O＝)C-苯基-C(＝O)-；R1是C3-C6环烷基，有0、1、或2个选自-OH、甲氧基和-CO2H的取代基取代；5～6元杂环，所述杂环是饱和的、部分饱和的或不饱和的；所述杂环含有1、2、3、或4个选自N、O、和S的杂原子；所述杂环任选地有1或2个-OH、甲氧基或-CO2H取代；苯基，有0、1、或2个选自-OH、甲氧基和-CO2H的取代基取代；或C1-C6烷基，有0～4个R1a取代；R1a是-OH、C1-C3烷基、C1-C4烷氧基、-CO2H、-N(CH2CH2)2N-R2、-SO3H；C3-C6环烷基，有0、1、或2个选自甲氧基和-OH的取代基取代；5～6元杂环，所述杂环是饱和的、部分饱和的或不饱和的；所述杂环含有1、2、3、或4个选自N、O、和S的杂原子，所述杂环任选地有1或2个-OH取代；苯基，有0、1、或2个选自甲氧基和-OH的取代基取代；R2是-H、H2N(C2-C4烷基)-、乙酰基(H)N(C2-C4烷基)-、或乙酰基；R3是-H、C1-C4烷基、C3-C6环烷基、苯基、或苄基；R4是-OH、C1-C3烷基、C1-C4烷氧基、-CO2H、-N(CH2CH2)2N-R2；C3-C6环烷基，有0、1、或2个选自甲氧基和-OH的取代基取代；5～6元杂环，所述杂环是饱和的、部分饱和的或不饱和的，所述杂环含有1、2、3、或4个选自N、O、或S的杂原子，所述杂环任选地有1或2个-OH取代；或C6-C10碳环，有0、1、或2个选自甲氧基和-OH的取代基取代。
〔31〕在一种优选的实施方案中，本发明提供式(Ia)的一种化合物，或其可药用盐形式，其中ECP是一种可酶切肽，选自SEQ ID.NO185R-γ-E-P-Orn-G-Hof-E-L-；SEQ.ID.NO186 R-γ-E-P-L-G-(O-苄基-S)-Y-L-；SEQ.ID.NO187 R-γ-E-P-L-G-(O-苄基-S)-Y-Nle-；SEQ ID.NO188R-P-L-G-(O-苄基-S)-Y-L-；SEQ ID.NO189R-P-L-G-(O-甲基-S)-Y-L-；SEQ ID.NO190 R-P-L-G-(氮杂Hof)-Y-L-；SEQ.ID.NO191 R-P-L-G-Hof-Y-L-；SEQ ID NO192 R-P-L-G-Hof-E-L-；SEQ ID NO193 R-P-L-G-(O-苄基-S)-Y-Nle-；SEQ.ID.NO194 R-P-L-G-(O-甲基-S)-Y-Nle-；SEQ.ID.NO195 R-P-L-G-(氮杂Hof)-Y-Nle-；SEQ.ID.NO196 R-P-L-G-Hof-Y-Nle-；SEQ.ID NO197 R-P-L-G-Hof-E-Nle-；SEQ.ID.NO198 R-P-L-G-(O-苄基-S)-Y-Hol-；SEQ.ID.NO199 R-P-L-G-(O-甲基-S)-Y-Hol-；SEQ.ID.NO200 R-P-L-G-(氮杂Hof)-Y-Hol-；SEQ ID NO201 R-P-L-G-Hof-Y-Hol-；和SEQ.ID.NO202 R-P-L-G-Hof-E-Hol-；R选自H3CC(＝O)-；
HOC(＝O)CH2CH2C(＝O)-；HOC(＝O)CH2CH2CH2C(＝O)-；HOC(＝O)CH2CH2CH2CH2C(＝O)-；H3COCH2CH2OCH2C(＝O)-，H3COCH2CH2OCH2CH2OCH2C(＝O)-，HO2CCH2OCH2CH2OCH2C(＝O)-，H2NCH2CH2OCH2C(＝O)-，H2NCH2CH2OCH2CH2OCH2C(＝O)-，H3CC(＝O)HNCH2CH2OCH2C(＝O)-，H3CC(＝O)HNCH2CH2OCH2CH2OCH2C(＝O)-，H2NCH2CH2N(CH2CH2)2NCH2C(O)-；H3CC(＝O)HNCH2CH2N(CH2CH2)2NCH2C(O)-；H3CC(＝O)N(CH2CH2)2NCH2C(O)-；O(CH2CH2)2NCH2CH2NHC(O)-HO2CCH2C(CO2H)(OH)CH2C(＝O)-，HO2CCH2C(CH3)(OH)CH2C(＝O)-，2-羧基环己基-C(＝O)-；2-羧基环戊基-C(＝O)-；羧苄氧基；4-甲氧基苯磺酰基；环丙基羰基；环丁基羰基；3-吡啶羰基；2-吡嗪羰基；四唑乙酰基；新戊酰基；甲氧乙酰基；羟基脯氨酸；和
4-(2-(5，6，7，8-四氢萘基))丁基。
〔32〕在一种优选的实施方案中，本发明提供式(Ia)的一种化合物，或其可药用盐形式，其中ECP是一种可酶切肽，选自SEQ ID.NO185 R-γ-E-P-Orn-G-Hof-E-L-；SEQ.ID.NO186 R-γ-E-P-L-G-(O-苄基-S)-Y-L-；SEQ.ID.NO187R-γ-E-P-L-G-(O-苄基-S)-Y-Nle-；SEQ.ID.NO188 R-P-L-G-(O-苄基-S)-Y-L-；SEQ.ID.NO189 R-P-L-G-(O-甲基-S)-Y-L-；SEQ.ID.NO190R-P-L-G-(氮杂Hof)-Y-L-；SEQ.ID.NO191 R-P-L-G-Hof-Y-L-；SEQ.ID.NO192 R-P-L-G-Hof-E-L-；SEQ.ID.NO193 R-P-L-G-(O-苄基-S)-Y-Nle-；SEQ.ID.NO194 R-P-L-G-(O-甲基-S)-Y-Nle-；SEQ.ID.NO195 R-P-L-G-(氮杂Hof)-Y-Nle-；SEQ.ID.NO196R-P-L-G-Hof-Y-Nle-；SEQ.ID.NO197R-P-L-G-Hof-E-Nle-；SEQ.ID.NO198 R-P-L-G-(O-苄基-S)-Y-Hol-；SEQ.ID.NO199 R-P-L-G-(O-甲基-S)-Y-Hol-；SEQ.ID NO200 R-P-L-G-(氮杂Hof)-Y-Hol-；SEQ.ID.NO201R-P-L-G-Hof-Y-Hol-；和SEQ.ID.NO202R-P-L-G-Hof-E-Hol-；R选自H3CC(＝O)-；HOC(＝O)CH2CH2C(＝O)-；HOC(＝O)CH2CH2CH2C(＝O)-；HOC(＝O)CH2CH2CH2CH2C(＝O)-；H3COCH2CH2OCH2C(＝O)-；H3COCH2CH2OCH2CH2OCH2C(＝O)-； 和四唑乙酰基。
〔33〕在另一种优选的实施方案中，本发明提供一种化合物，选自SEQ.ID.NO1 4-甲氧基苯磺酰基-β-Ala-G-Hof-Y-L-Dox；SEQ.ID.NO2 1，2-C6H4(CO)2-H-G-Hof-Y-L-Dox；SEQ.ID.NO3 乙酰基-P-L-G-L-L-Dox；SEQ.ID.NO4乙酰基-P-(R)L-G-L-L-Dox；SEQ.ID.NO5乙酰基-P-(β-Ala)-G-L-L-Dox；SEQ.ID.NO6乙酰基-P-(γ-Abu)-G-L-L-Dox；SEQ.ID.NO7 乙酰基-P-Cha-G-L-L-Dox；SEQ.ID.NO8 P-L-G-L-L-Dox；SEQ.ID.NO9 MeOCH2CH2OCH2C(＝O)-P-L-G-L-L-Dox；SEQ.ID.NO10 MeOCH2CH2OCH2CH2OCH2C(＝O)-P-L-G-L-L-Dox；SEQ.ID.NO11H2NCH2CH2N(CH2CH2)2NCH2C(＝O)-P-L-G-L-L-Dox；SEQ.ID.NO12AcHNCH2CH2N(CH2CH2)2NCH2C(＝O)-P-L-G-L-L-Dox；SEQ.ID.NO13 AcN(CH2CH2)2NCH2C(＝O)-P-L-G-L-L-Dox；SEQ.ID.NO17 Dmg-P-R-Sar-Hof-L-Dox；SEQ.ID.NO18乙酰基-P-H-G-Hof-L-Dox；SEQ.ID.NO19 乙酰基-P-Orn-G-Hof-L-Dox；SEQ.ID.NO20 乙酰基-P-Dap-G-Hof-L-Dox；SEQ.ID.NO21 乙酰基-P-Cit-G-Hof-L-Dox；SEQ.ID.NO22 乙酰基-P-L-G-(O-(3-吡啶基))-Y-L-Dox；SEQ.ID.NO23 乙酰基-P-L-G-(O-(4-吡啶基))-Y-L-Dox；SEQ.ID.NO24 乙酰基-P-L-G-(4-氮杂)-Hof-L-Dox；SEQ.ID.NO25 乙酰基-P-L-G-(O-苄基)-S-L-Dox；SEQ.ID.NO26 Cbz-P-L-G-(O-(4-吡啶基甲基))-Y-L-Dox；SEQ.ID.NO27乙酰基-P-L-Sar-L-L-Dox；SEQ.ID.NO28 乙酰基-P-(N-Me)-L-G-L-L-Dox；SEQ.ID.NO29 乙酰基-P-L-G-(N-Me)-L-L-Dox；SEQ.ID.NO30乙酰基-Hyp-L-G-L-L-Dox；SEQ.ID.NO31乙酰基-Tzc-L-G-L-L-Dox；SEQ.ID.NO32 乙酰基-(高-P)-L-G-L-L-Dox；SEQ.ID.NO33 乙酰基-(高-P)-L-G-Hof-L-Dox；SEQ.ID.NO34 乙酰基-(高-P)-Orn-G-Hof-L-Dox；SEQ.ID.NO35 乙酰基-哌啶甲酸-L-G-L-L-Dox；SEQ.ID.NO36乙酰基-Aze-L-G-L-L-Dox；SEQ.ID.NO37乙酰基-Chg-L-G-L-L-Dox；SEQ.ID.NO38 乙酰基-P-戊内酰胺-G-L-L-Dox；SEQ.ID.NO41 乙酰基-L-G-L-Y-L-Dox；SEQ.ID.NO42 环丙基羰基-L-G-L-Y-L-Dox；SEQ.ID.NO43 环丁基羰基-L-G-L-Y-L-Dox；SEQ.ID.NO44新戊酰基-L-G-L-Y-L-Dox；SEQ.ID.NO45 Hyp-G-P-L-G-L-L-Dox；SEQ.ID.NO46乙酰基-P-L-G-L-A-L-Dox；SEQ.ID.NO47乙酰基-P-L-G-L-Y-L-Dox；SEQ.ID.NO48 Peg-P-L-G-L-Y-L-Dox；SEQ.ID.NO49 H3CC(＝O)NH-Peg-P-L-G-L-Y-L-Dox；SEQ.ID.NO50AcHNCH2CH2N(CH2CH2)2NCH2C(＝O)-P-L-G-L-Y-L-Dox；SEQ.ID.NO51乙酰基-P-L-G-L-S-L-Dox；SEQ.ID.NO52乙酰基-G-P-L-G-L-L-Dox；SEQ.ID.NO53 O(CH2CH2)NCH2CH2NHC(＝O)-G-P-L-G-L-L-Dox；SEQ.ID.NO55乙酰基-P-L-G-L-L-L-Dox；SEQ.ID.NO58 Cbz-G-P-L-G-L-L-Dox；SEQ.ID.NO59AcHNCH2CH2N(CH2CH2)2NCH2C(＝O)-G-P-L-G-L-L-Dox；SEQ.ID.NO60H2NCH2CH2N(CH2CH2)2NCH2C(＝O)-G-P-L-G-L-L-Dox；SEQ.ID.NO61 Dmg-P-L-G-L-L-Dox；SEQ.ID.NO62 乙酰基-γ-E-P-L-G-L-L-Dox；SEQ.ID.NO65 甲氧基乙酰基-G-P-L-G-L-L-Dox；SEQ.ID.NO66 Dmg-P-L-G-Tha-L-Dox；SEQ.ID.NO67 Dmg-P-L-G-Phg-L-Dox；SEQ.ID.NO68Dmg-P-L-G-(O-苄基-Y)-L-Dox；SEQ.ID.NO69 Dmg-P-L-G-Bip-L-Dox；SEQ.ID.NO77乙酰基-G-P-Q-G-L-L-Dox；SEQ.ID.NO78乙酰基-G-P-R-G-L-L-Dox；SEQ.ID.NO82乙酰基-G-P-L-G-V-L-Dox；SEQ.ID.NO83 乙酰基-G-P-L-G-Hof-L-Dox；SEQ.ID.NO84乙酰基-G-P-L-A-L-L-Dox；SEQ.ID.NO85 Dmg-P-I-G-Bip-L-Dox；SEQ.ID.NO86 Dmg-P-Chg-G-Bip-L-Dox；SEQ.ID.NO87乙酰基-G-P-V-G-L-L-Dox；SEQ.ID.NO88 Dmg-P-I-G-L-L-Dox；SEQ.ID.No89 Dmg-P-R-G-Bip-L-Dox；SEQ.ID.NO91乙酰基-G-P-L-G-E-L-Dox；SEQ.ID.NO92 Dmg-P-K-G-Bip-L-Dox；SEQ.ID.NO95 Dmg-P-R-Sar-Hof-R-L-Dox；SEQ.ID.NO96 Dmg-P-R-G-Hof-R-L-Dox；SEQ.ID.NO97 Dmg-P-R-G-Bip-R-L-Dox；SEQ.ID.NO98乙酰基-G-P-L-G-N-L-Dox；SEQ.ID.NO99乙酰基-G-P-L-G-S-L-Dox；SEQ.ID.NO100 乙酰基-G-P-L-G-(4-羟基苯基-G)-L-Dox；SEQ.ID.NO101 乙酰基-P-L-G-Hof-H-L-Dox；SEQ.ID.NO102 乙酰基-P-L-G-Hof-A-L-Dox；SEQ.ID.NO103 乙酰基-P-L-G-Hof-Y-L-Dox；SEQ.ID.NO104乙酰基-P-L-G-Hof-(吗啉基丙基-G)-L-Dox；SEQ.ID.NO105乙酰基-γ-E-P-L-G-Hof-Y-L-Dox；SEQ.ID.NO106 琥珀酰基-P-L-G-Hof-Y-L-Dox；SEQ.ID.NO107 乙酰基-P-L-G-Hof-(O-(4-吡啶基甲基)-Y)-L-Dox；SEQ.ID.NO108 乙酰基-P-L-G-(高-Y)-Y-L-Dox；SEQ.ID.NO109乙酰基-P-L-G-(4-氮杂-Hof)-y-L-Dox；SEQ.ID.NO110乙酰基-P-L-G-(O-(4-吡啶基)-Y)-Y-L-Dox；SEQ.ID.NO111乙酰基-P-L-G-(苯基丙基-G)-Y-L-Dox；SEQ.ID.NO112乙酰基-P-L-G-(苯乙烯基-A)-y-L-Dox；SEQ.ID.NO113 乙酰基-P-L-G-(O-苄基-S)-Y-L-Dox；SEQ.ID.NO114 乙酰基-P-(N，N-二甲基-K)-G-Hof-Y-L-Dox；SEQ.ID.NO115 乙酰基-P-L-G-Hof-Dap-L-Dox；SEQ.ID.NO116 乙酰基-P-L-G-Hof-Orn-L-Dox；SEQ.ID.NO117 Peg-P-L-G-Hof-Orn-L-Dox；SEQ.ID.NO118 乙酰基-γ-E-P-L-G-Hof-Orn-L-Dox；SEQ.ID.NO119 γ-E-P-L-G-Hof-Orn-L-Dox；SEQ.ID.NO120 乙酰基-P-Orn-G-Hof-Orn-L-Dox；SEQ.ID.NO121 乙酰基-P-Orn-G-Hof-Y-L-Dox；SEQ.ID.NO122乙酰基-γ-E-P-Orn-G-Hof-E-L-Dox；SEQ.ID.NO123 乙酰基-P-Orn-G-L-Y-L-Dox；SEQ.ID.NO124乙酰基-P-(4-氮杂-F)-G-L-Y-L-Dox；SEQ.ID.NO125 乙酰基-P-L-G-Hof-Dab-L-Dox；SEQ.ID.NO126 乙酰基-P-L-G-Hof-K-L-Dox；SEQ.ID.NO127 乙酰基-P-L-G-Hof-(N，N-二甲基-K)-L-Dox；SEQ.ID.NO128Dmg-P-L-G-Hof-(N，N-二甲基-K)-L-Dox；SEQ.ID.NO129Peg-P-L-G-Hof-(N，N-二甲基-K)-L-Dox；SEQ ID.NO130乙酰基-γ-E-P-L-G-Hof-(N，N-二甲基-K)-L-Dox；SEQ.ID.NO131 γ-E-P-L-G-Hof-(N，N-二甲基-K)-L-Dox；SEQ.ID.NO132 乙酰基-P-L-G-Hof-(N，N-二甲基-K)-Nle-Dox；SEQ.ID.NO133 乙酰基-P-L-G-Hof-(N，N-二甲基-K)-Cha-Dox；SEQ.ID.NO134 乙酰基-P-L-G-Hof-Cit-L-Dox；SEQ.ID.NO135乙酰基-γ-E-P-L-G-Hof-Cit-L-Dox；SEQ.ID.NO136 乙酰基-P-L-G-Hof-Q-L-Dox；SEQ.ID.NO137 乙酰基-P-L-G-Hof-(4-氮杂-F)-L-Dox；SEQ.ID.NO138 乙酰基-P-L-G-Hof-V-L-Dox；SEQ.ID.NO139 乙酰基-γ-E-P-L-G-Hof-E-L-Dox；SEQ.ID.NO140 乙酰基-G-Aze-L-G-L-L-Dox；SEQ.ID.NO141乙酰基-(4-氟-F)-L-G-L-L-Dox；SEQ.ID.NO142乙酰基-(高-P)-L-G-L-Y-L-Dox；SEQ.ID.NO143乙酰基-(高-P)-L-G-Hof-Orn-L-Dox；SEQ.ID.NO144 乙酰基-Aze-L-G-L-Y-L-Dox；SEQ.ID.NO145 乙酰基-Aze-L-G-Hof-Orn-L-Dox；SEQ.ID.NO154 乙酰基-P-L-G-L-L-A-L-Dox；SEQ.ID.NO155 乙酰基-P-L-G-L-Y-A-L-Dox；SEQ.ID.NO156 乙酰基-G-P-L-G-L-A-L-Dox；SEQ.ID.NO157 乙酰基-P-L-G-L-A-A-L-Dox；SEQ.ID.NO158 乙酰基-P-L-G-L-A-L-L-Dox；SEQ.ID.NO159 乙酰基-P-L-G-L-L-S-L-Dox；SEQ.ID.NO160 乙酰基-P-L-G-L-L-L-L-Dox；SEQ.ID.NO161 Dmg-P-L-G-L-Y-L-Dox；SEQ.ID.NO162Dmg-P-R-G-Phg-Y-L-Dox；SEQ.ID.NO163 乙酰基-G-P-L-G-L-R-L-Dox；SEQ.ID.NO1644-(2-(5，6，7，8-四氢萘基))丁基-G-Hof-Y-L-Dox；SEQ.ID NO165乙酰基-P-L-G-Hof-(N-甲基哌嗪丙基-G)-L-Dox；SEQ.ID.NO166 四唑乙酰基-P-L-G-Hof-Y-L-Dox；SEQ.ID.NO167 四唑乙酰基-P-L-G-(O-苄基-S)-Y-L-Dox；SEQ.ID.NO168 四唑乙酰基-P-L-G-Hof-Y-Nle-Dox；SEQ.ID.NO169 P-L-G-(O-苄基-S)-Y-L-Dox；SEQ.ID.NO170 乙酰基-P-L-G-Hof-(高Y)-L-Dox；SEQ.ID.NO171 乙酰基-P-氮杂Hof-G-氮杂Hof-Y-L-Dox；SEQ.ID.NO172乙酰基-P-L-G-(O-烯丙基-S)-Y-L-Dox；SEQ.ID.NO173乙酰基-P-L-G-(4-硝基-Hof)-Y-L-Dox；SEQ.ID.NO174 乙酰基-P-L-G-Hof-氮杂Hof-L-Dox；SEQ.ID.NO175 乙酰基-P-L-G-(O-甲基-S)-Y-L-Dox；SEQ.ID.NO176 乙酰基-γ-E-P-L-G-(O-苄基-S)-Y-L-Dox；SEQ.ID.NO177 乙酰基-γ-E-P-L-G-(O-苄基-S)-Y-N1e-Dox；SEQ.ID.NO178 3-吡啶羰基-P-L-G-Hof-Y-L-Dox；SEQ.ID.NO179 2-吡嗪羰基-P-L-G-Hof-Y-L-Dox；SEQ.ID.NO180 乙酰基-P-L-G-Hof-(N，N-二甲基-K)-Nle-Dox；SEQ ID.NO182 乙酰基-P-L-G-Hof-Y-Hol-Dox；SEQ.ID.NO183 乙酰基-P-L-G-Thr(O-苄基)-Y-L-Dox；SEQ.ID.NO184 乙酰基-γ-E-P-L-G-Hof-Y-Nle-Dox；〔34〕在另一种优选实施方案中，本发明提供一种化合物，选自SEQ.ID.NO39乙酰基-G-P-L-G-L-F-Dox；SEQ.ID.NO40乙酰基-G-P-L-G-F-F-Dox；SEQ.ID.NO54乙酰基-G-P-L-G-L-Y-Dox；SEQ.ID.NO56 乙酰基-G-P-L-G-Bip-F-Dox；SEQ.ID.NO57 乙酰基-G-P-L-G-Nle-F-Dox；SEQ.ID.NO63 乙酰基-G-P-L-G-Tha-F-Dox；SEQ.ID.NO64 乙酰基-G-P-L-G-Phg-F-Dox；SEQ.ID.NO70 乙酰基-G-P-L-G-F-Bip-Dox；SEQ.ID.NO71 乙酰基-G-P-L-G-L-Bip-Dox；SEQ.ID.NO72 乙酰基-G-P-L-G-(2Nal)-Bip-Dox；SEQ.ID.NO73 乙酰基-G-P-L-G-F-A-Dox；SEQ.ID.NO74 乙酰基-G-P-L-G-Bip-A-Dox；SEQ.ID.NO75 乙酰基-G-P-L-G-L-A-Dox；SEQ ID.NO76乙酰基-G-P-L-G-(O-苄基-Y)-F-Dox；SEQ.ID.NO79 乙酰基-G-P-L-G-L-(4-吡啶基-A)-Dox；SEQ.ID.NO80 乙酰基-G-P-L-G-L-R-Dox；SEQ ID.NO81 乙酰基-G-P-L-G-L-W-Dox；SEQ.ID.NO90乙酰基-G-P-L-G-L-(O-苄基-Y)-Dox；SEQ.ID.NO93 乙酰基-G-P-L-G-L-E-Dox；SEQ.ID.NO94 乙酰基-G-P-L-G-Bip-E-Dox；SEQ.ID.NO146乙酰基-P-L-G-L-Y-G-Dox；SEQ.ID.NO147 乙酰基-P-L-G-Hof-Y-G-Dox；SEQ.ID.NO148乙酰基-P-L-G-L-Y-(β-高-L)-Dox；SEQ.ID.NO149 乙酰基-P-L-G-Hof-Y-(β-高-L)-Dox；SEQ.ID.NO150 乙酰基-P-L-G-L-Y-(β-Ala)-Dox；SEQ.ID.NO151 乙酰基-P-L-G-L-Y-Ahx-Dox；SEQ.ID.NO152 乙酰基-P-L-G-L-Y-Aph-Dox；SEQ.ID.NO153 乙酰基-P-L-G-L-Y-Amh-Dox；SEQ.ID.NO181乙酰基-P-L-G-Hof-Y-Hos-Dox；〔35〕在第二种实施方案中，本发明提供一种药物组合物，包含式(I)或(Ia)的化合物和可药用载体。
〔36〕在第三种实施方案中，本发明提供一种患有癌症的哺乳动物的治疗方法，包含给予患有癌症的哺乳动物治疗有效量的式(I)或(Ia)的化合物。
〔37〕在一种优选的实施方案中，本发明提供一种患有癌症的哺乳动物的治疗方法，其中，该癌症是乳腺癌、卵巢癌、脑癌、胃癌、肺癌、结肠癌、前列腺癌、或肝癌，或其中该癌症是白血病、淋巴瘤、癌、肉瘤、或黑色素瘤。
〔38〕在第四种实施方案中，本发明提供一种向患有癌症的哺乳动物的细胞中递送一种化合物的方法，包含让患有癌症的哺乳动物的细胞与式(I)或(Ia)的一种化合物接触，其中，该接触是在一种包含基质酶的肽酶的存在下进行的。
〔39〕在一种优选的实施方案中，本发明提供一种方法，其中，该癌症是乳腺癌、卵巢癌、脑癌、胃癌、肺癌、结肠癌、前列腺癌、或肝癌，或其中该癌症是白血病、淋巴瘤、癌、肉瘤、或黑色素瘤。
在第五种实施方案中，本发明提供式(I)的一种化合物，ECP-A(I)包含与一种抗肿瘤剂A连接的一种可酶切肽ECP。
在一种优选的实施方案中，本发明提供式(I)的一种化合物，其中，该抗肿瘤剂是一种anthracycline、长春花生物碱、博莱霉素、丝裂霉素、紫杉烷、细胞毒性核苷酸、喋啶、或鬼臼毒素。
在一种优选的实施方案中，本发明提供式(I)的一种化合物，其中，该抗肿瘤剂是一种anthracycline。
在一种优选的实施方案中，本发明提供式(I)的一种化合物，其中，该抗肿瘤剂是anthracycline多柔比星。
在一种优选的实施方案中，本发明提供式(I)的一种化合物，其中，该氨基酸顺序选自下列组成的一组PLGL、PLGLL、PLGLAL、PLGLYL、PLGLYAL、PLGLAAL、PLGLLSL、PLGLLAL、PLGLLYL、GPLGL、GPLGLL、PLGHof、PLG-(O-苄基)-S、PLGHofYL、PLG-(O-苄基)-SYL、PLGHofEL、和GPLGLAL。
在一种优选的实施方案中，本发明提供式(I)的一种化合物，其中，该氨基酸顺序选自下列组成的一组PLGL、PLGLL、PLGLAL、PLGLYL、PLGLLAL、PLGLLYL、PLGLYAL、GPLGL、GPLGLL和GPLGLAL。
在一种优选的实施方案中，本发明提供式(I)的一种化合物，其中，该可酶切肽包含一种肽酶认识的氨基酸顺序，其中该肽酶是一种基质酶。
在一种优选的实施方案中，本发明提供式(I)的一种化合物，其中，该肽酶是一种包含MMP-2、MMP-9、或MMP-14的基质酶。
在一种优选的实施方案中，本发明提供式(I)的一种化合物，其中该药剂是多柔比星，且其中该可酶切肽包含一种选自下列组成的一组的氨基酸顺序PLGL、PLGLL、PLGLAL、PLGLYL、PLGLLAL、PLGLLYL、PLGLYAL、GPLGL、GPLGLL和GPLGLAL。
在一种优选的实施方案中，本发明提供式(I)的一种化合物，其中该药剂是多柔比星，且其中该可酶切肽包含一种选自基质酶MMP-2、MMP-9、或MMP-14组成的一组的肽酶所认识的氨基酸顺序。
在另一种优选的实施方案中，本发明提供一种药物组合物，其中包含式(I)的化合物和可药用载体。
在另一种优选的实施方案中，本发明提供一种向患有癌症的哺乳动物的细胞中递送一种化合物的方法，包含让患有癌症的哺乳动物的细胞与式(I)的化合物接触，其中，该接触是在一种肽酶包含一种基质酶的存在下进行的。
在另一种优选的实施方案中，本发明提供一种向患有癌症的哺乳动物的细胞中递送式(I)的一种化合物的方法，其中，该癌症是乳腺癌、卵巢癌、脑癌、胃癌、肺癌、结肠癌、前列腺癌、或肝癌，或其中该癌症是白血病、淋巴瘤、癌、肉瘤、或黑色素瘤。
在另一种优选的实施方案中，本发明提供一种向患有癌症的哺乳动物的细胞中递送式(I)的一种化合物的方法，其中，该抗癌剂是一种anthracycline、长春花生物碱、博莱霉素、丝裂霉素、紫杉烷、细胞毒性核苷酸、喋啶、或鬼臼毒素。
在另一种优选的实施方案中，本发明提供一种向患有癌症的哺乳动物的细胞中递送式(I)的一种化合物的方法，其中该抗癌剂是一种anthracycline、长春花生物碱、博莱霉素、丝裂霉素、紫杉烷、细胞毒性核苷酸、喋啶、或鬼臼毒素，且其中该药剂是anthracycline多柔比星。
也包括在本发明中的是以上提出的化合物，其中，该可酶切肽是一种包含MMP-2、MMP-9、和/或MMP-14在内的基质酶选择性认识的，而且并非人纤维形成细胞活化蛋白(FAPα)这种酶选择性认识的。
也包括在本发明中的是以上提出的化合物，其中，氨基酸Laa不是脯氨酸或脯氨酸类似物，其中α氮上的取代基和α碳上的取代基形成一个环状基团。
也包括在本发明中的是以上提出的化合物，先决条件是，氨基封端基团Cap不是一种多羟基链烷酰，即，其中羟基链烷酰封端基团局限于那些在链烷酰基团上有一个羟基取代基者。
也包括在本发明中的是以上提出的化合物，其中，可酶切肽是一种包含MMP-2、MMP-9、和/或MMP-14在内的基质酶选择性认识的，而且并非Trouase这种酶选择性认识的。
也包括在本发明中的是以上提出的化合物，先决条件是，氨基酸Xa2是一种天然氨基酸。
也包括在本发明中的是以上提出的化合物，先决条件是，Cap不是一种非天然氨基酸或琥珀酰。
也包括在本发明中的是以上提出的化合物，其中，可酶切肽是一种包含MMP-2、MMP-9、和/或MMP-14在内的基质酶选择性认识的，而且并非前列腺特异性抗原(PSA)选择性认识的。
也包括在本发明中的是以上提出的化合物，先决条件是，ECP不包含选自下列的二肽键-Tyr-Ser-、-Tyr-Thr-、-Phe-Ser-、-Gln-Ser-、-Gln-Thr-、和-Asn-Ser-。
也包括在本发明中的是以上提出的化合物，先决条件是，ECP不是-Gly-Gly-Arg-Leu-。
也包括在本发明中的是以上提出的化合物，先决条件是，ECP不是-Gly-Val-Phe-Arg-。
也包括在本发明中的是以上提出的化合物，先决条件是，ECP不是-Ala-Pro-Gly-Leu-。
也包括在本发明中的是以上提出的化合物，先决条件是，ECP不是2-噻吩基丙氨酸-Gly-Ala-Leu-。
也包括在本发明中的是以上提出的化合物，先决条件是，ECP不是2-萘基丙氨酸-Gly-Ala-Leu-。
也包括在本发明中的是以上提出的化合物，先决条件是，ECP不是-Gly-Leu-Gly-Leu-。
本文中使用的“抗肿瘤剂”系指对肿瘤细胞有细胞毒性效应的药剂；这些即包括像烷基化剂、微管蛋白结合剂、和抗增殖剂这样的化合物，也包括那些在癌细胞生长时可能产生负面影响的蛋白质例如肿瘤坏死因子、干扰素、和各种生长因子。适合于本发明中使用的特定“抗肿瘤剂”包括但不限于anthracyclines、博莱霉素、长春花生物碱(例如长春新碱和长春花碱)、丝裂霉素、细胞毒性核苷酸、紫杉烷(例如紫杉醇和taxotere(见DeGroot))、喋啶、鬼臼毒素、和叶酸衍生物(见Lu)。这样的化合物可以进行修饰，例如用普通熟练技术人员众所周知的手段在其结构上的不同点上修饰，以提高该化合物的潜在疗效或使其与肽的连接变得容易。
本发明中使用的、属于anthracyclines的“抗肿瘤剂”，意在包括多柔比星、多柔比星衍生物、和比柔比星类似物，其实例包括但不限于多柔比星(阿霉素)、柔红霉素(道诺霉素)、表柔比星、地托比星、伊达比星、伊索比星、和去甲柔红霉素、以及米托蒽醌。优选的anthracycline是多柔比星，在本文中称之为“Dox”或“dox”。
可酶切肽包含膜结合和/或细胞分泌的肽酶能认识和切断的氨基酸顺序，所述肽酶是技术上众所周知能认识特定氨基酸顺序并使所述顺序在特定氨基酸之间切断的肽切断酶(见例如Ames和Quigley等人，Knauper等人，MeGeehan等人，Nagase等人，Nakajima等人，Odake等人)。这样的酶包括诸如但不限于基质金属蛋白酶或者“MMP” (本文中也称之为基质酶)，例如MMP-2、MMP-9、MMP-14、丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、弹性蛋白酶、基质溶素、人胶原酶、组织蛋白酶、granzymes、二肽基肽酶、血纤维蛋白溶酶、血纤维蛋白溶酶原活化剂、溶菌酶、和诸如氨基肽酶P、氨基肽酶A、氨基肽酶N。有适合于与本文中的细胞毒性剂连接的适用MMP底物选择性的肽，包括诸如但不限于那些有以下氨基酸顺序者PLGL、PLGLL、PLGLAL、PLGLYL、PLGLLAL、PLGLALL、PLGLLLL、PLGLLYL、PLGLYAL、PLGLAAL、PLGLLSL、GPLGL、GPLGLY、GPLGLL、GPLGLAL、DPLGL、PEOGL、PQGL、和PLGL-Dpa-AR和类似顺序(Nagase)。这些氨基酸顺序中每一种都任选地包括本文中所述的各种修饰氨基酸中任何一种，例如羟基脯氨酸，而且这些顺序中每一种都任选地用本文中所述的氨基或羧基末端修饰法中任何一种例如乙酰基修饰。因此，除了所列举的特定氨基酸顺序外，本发明也提供含有一种或多种天然的、修饰的、或非天然的氨基酸以及一种或多种末端修饰的对应版本，例如，本发明提供包含氨基酸顺序PLGLYL以及HypPLGLYL、AcPLGLYL、和AcHypPLGLYL的肽。
本发明中使用的“基质酶”意在按种属把基质金属蛋白酶或MMP描述为认识本发明化合物的可酶切肽的一类酶。优选的MMP是MMP-2、MMP-9、和/或MMP-14。基质酶没有描述neprilysin这种酶。
本发明中使用的“基质酶可切断键”意在描述该可酶切肽中一种能在离体试验中由本发明中所定义的基质酶发生蛋白水解断裂的酰胺键。其意图是，本发明中所定义的基质酶优选对基质酶可切断键是选择性的。也要理解的是，该可酶切肽的蛋白水解降解可以在该化合物在活体中给药之后在该可酶切肽的任何一个键上发生。
可酶切肽必须含有最低限度数目的、对应肽酶能认识和切断的氨基酸、其取代物或修饰物(例如PLGL、AA)。替而代之，这些肽的氨基酸顺序，除那些对于经由肽酶发生的切断来说最低限度需要的以外，还可以包含一种或多种氨基酸(例如，依次包含氨基酸P、L、G和L的肽可以有氨基酸顺序PLGLL，而包含氨基酸顺序AA的肽实际上可以有顺序AAPV)。这样的额外氨基酸，由于本发明公开文书中给出的、普通熟练技术人员众所周知的种种理由，例如为了进一步降低这些肽与其连接的化合物对非肽酶分泌细胞的有效性，是包括在这些肽的氨基和/或羧基末端上的。此外，在引发肽酶切断事件之后仍留在该细胞毒性剂上的氨基酸顺序必须由能在与肿瘤有关的肽酶切断之后由细胞氨基肽酶去除或加工的顺序(例如LL-Dox或LAL-Dox)组成。
与基质金属蛋白酶MMP-2、MMP-9、和/或MMP-14能认识和切断的可酶切肽连接的本发明化合物，据信能认识特定的氨基酸顺序，并能使在切断部位含有甘氨酸或肌氨酸的所述顺序切断。因此，本发明的可酶切肽在切断部位含有二肽-Gly-Xp1-或-Sar-Xp1-，其中，Xp1是一种能与Gly或Sar形成一个游离基质酶或基质金属蛋白可酶切的键的氨基酸。Xp1的优选实例包括但不限于Leu、Hof、氮杂Hof、Ser(O甲基)、和Ser(O苄基)。除以上二肽外，相信MMP-2、MMP-9、和/或MMP-14还能认识并切断氨基酸顺序-Paa-Xaa-Gly-Xp1-和Paa-Xaa-Sar-Xp1，其中Paa是一种脯氨酸、脯氨酸衍生物、或脯氨酸模拟物，且Xaa是一种氨基酸。Paa的优选实例包括但不限于Pro和Hyp。
除以上公开的基质金属蛋白酶(MMP)MMP-2、MMP-9、和MMP-14外，本发明对于基质酶MMP-13和MMP-8的用途而言意在也将其用于一种细胞毒性肽连接体打靶思路。酶/氨基酸识别序列配对包括，例如，MMP-13识别序列PLGL(见诸如Knauper等人)，和MMP-8识别序列AAPF或AAPM；在这些已经用琥珀酰或甲氧基琥珀酰进行N-末端修饰的情况下尤其如此(见诸如Nakajima等人)。这些描述的内容也列为本文参考文献。
这样的肽，以及其它可酶切肽，包括在其顺序中含有有取代的、修饰的、非天然的或天然的氨基酸的肽，以及在其氨基或羧基末端上修饰的肽，是从其成分氨基酸、用普通熟练技术人员众所周知的种种方法制备的，因而是用容易得到的材料和设备实施的(见诸如The Practice ofPeptide Synthesis(第二版)，M.Bodanskzy和A.Bodanskzy，Springer-Verlag，纽约州纽约市(1994)，其内容列为本文参考文献)。这些包括例如但不限于用Fmoc实验方案的固相合成(见例如Change和Meieinhofer，Int.J.Pept.Protein Res.11246-9(1978))。描述肽合成的其它文献包括例如但不限于Miklos Bodansky，PeptideChemistry，A Practical Texbook，1988，Springer-Verlag，纽约；PeptideSynthesis Protocols，Michael W.Pennington和Ben M.Dunn编辑，1994，Humana Press，新泽西州托托瓦。
如上所述，可酶切肽包含一种氨基酸顺序，用来作为能使该肽切断的肽酶的识别部位。构成可酶切肽的氨基酸可以包括天然的、修饰的、或非天然的氨基酸，其中，天然的、修饰的、或非天然的氨基酸可以呈D构型或L构型中任意一种。天然氨基酸包括下列氨基酸丙氨酸、半胱氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、苯丙氨酸、甘氨酸、组氨酸、异亮氨酸、赖氨酸、亮氨酸、甲硫氨酸、天冬酰胺、脯氨酸、谷氨酰胺、精氨酸、丝氨酸、苏氨酸、缬氨酸、色氨酸、和酪氨酸。本文中使用的天然氨基酸有下列缩略语。
一字母代码三字母代码名称A Ala 丙氨酸C Cys 半胱氨酸D Asp 天冬氨酸E Glu 谷氨酸F Phe 苯丙氨酸G Gly 甘氨酸H His 组氨酸I Ile 异亮氨酸
K Lys赖氨酸L Leu亮氨酸M Met甲硫氨酸N Asn天冬酰胺P Pro脯氨酸Q Gln谷氨酰胺R Arg精氨酸S Ser丝氨酸T Thr苏氨酸U Scy硒代半胱氨酸V Val缬氨酸W Trp色氨酸Y Tyr酪氨酸可酶切肽也可以包含适合于取代到本发明的可酶切肽中的种种非天然的或修饰的氨基酸。一份有限的非天然氨基酸清单公开于Roberts和Vellaccio，The Peptides，Vol.5，341-449(1983)，Academic Press，纽约，而且为该目的而列为本文参考文献。本发明中使用的非天然的或修饰的氨基酸的实例包括但不限于三字母代码名称Aaaα-氨基酸Aad2-氨基己二酸Aanα-天冬酰胺Abu2-氨基丁酸γAbu 4-氨基丁酸Aca2-氨基癸酸Acp6-氨基己酸Agnα-谷氨酰胺Ahe2-氨基庚酸Ahx6-氨基己酸Aibα-氨基异丁酸(2-氨基丙氨酸)3-Aib 3-氨基异丁酸β-Ala β-丙氨酸aHyl 别羟基赖氨酸aIle 别异亮氨酸Amh 4-氨基-7-甲基庚酸Aph 4-氨基-5-苯基戊酸Apm 2-氨基庚二酸App γ-氨基-β-羟基苯戊酸Asu 2-氨基辛二酸Aze 2-羧基氮杂环丁烷Bal β-丙氨酸Bas β-天冬氨酸Bip 联苯丙氨酸Bly 3，6-二氨基己酸(β-赖氨酸)Bua 丁酸Bux 4-氨基-3-羟基丁酸Cap γ-氨基-β-羟基环己烷戊酸Cba 环丁基丙氨酸Cha 环己基丙氨酸Chg 环己基甘氨酸Cit N5-氨基羰基鸟氨酸Cpa 环戊基丙氨酸Cta 环丙基丙氨酸Cya 3-磺基丙氨酸或半胱磺酸Dab 2，4-二氨基丁酸Dap 二氨基丙酸Dbu 2，4-二氨基丁酸Dpa 二苯基丙氨酸Dmg N，N-二甲基甘氨酸Dpm 二氨基庚二酸Dpr 2，3-二氨基丙酸Edc S-乙基硫代半胱氨酸EtAsnN-乙基天冬酰胺EtGlyN-乙基甘氨酸Faf 4-氮杂苯丙氨酸Fph 4-氟苯丙氨酸Ggu γ-谷氨酸或(γ-E)或(γ-Glu)Gla γ-羧基谷氨酸Glc 羟基乙酸(乙醇酸)Glp 焦谷氨酸Har 高精氨酸Hca 高半胱磺酸Hcy 高半胱氨酸Hhs 高组氨酸Hiv 2-羟基异戊酸Hof 高苯丙氨酸Hol 高亮氨酸或高-LHop 高脯氨酸或高-PHos 高丝氨酸Hse 高丝氨酸Hva 2-羟基戊酸Hyl 5-羟基赖氨酸Hyp 4-羟基脯氨酸Inc 2-羧基八氢吲哚Iqc 3-羧基异喹啉Iva 异缬氨酸Lac 2-羟基丙酸(乳酸)Maa 巯基乙酸Mba 巯基丁酸MeGly N-甲基甘氨酸或肌氨酸Mhp 4-甲基-3-羟基脯氨酸Mpa 巯基丙酸Nle 正亮氨酸Npa 3-哌啶甲酸Nty 正酪氨酸Nva 正缬氨酸Oaa ω-氨基酸Orn 鸟氨酸Pen 青霉胺(3-巯基缬氨酸)Phg 2-苯基甘氨酸Pip 2-羧基哌啶Sar 肌氨酸(N-甲基甘氨酸)Spa 2-氨基-3-(4-磺基苯基)丙酸Spg 1-氨基-1-羧基环戊烷Sta 抑制素(4-氨基-3-羟基-6-甲基庚酸)Tha 3-噻吩基丙氨酸Tml ε-N-三甲基赖氨酸Tza 3-噻唑基丙氨酸Tzc 噻唑烷-4-羧酸Und 未定义的Xaa 任何氨基酸Wil α-氨基-2，4-二氧代嘧啶丙酸2Nal 2-萘基丙氨酸可酶切肽也可以包含各种修饰氨基酸，其中，该氨基酸的胺或羟基官能已经用下列基团进行了化学修饰烷基、链烯基、苯基、苯基烷基、杂环基、杂环烷基、碳环基、或碳环烷基。化学修饰取代基的实例包括但不限于甲基、乙基、丙基、丁基、烯丙基、苯基、苄基、吡啶基、吡啶基甲基、和咪唑基。“The Peptides”Vol 3，3-88(1981)公开了许多适合于氨基酸修饰的侧链官能团，而且为了该目的而列入本文中。修饰氨基酸的实例包括但不限于N-甲基化氨基酸、N-甲基甘氨酸、N-乙基甘氨酸、N-乙基天冬酰胺、N，N-二甲基赖氨酸、N′-(2-咪唑基)赖氨酸、O-甲基酪氨酸、O-苄基酪氨酸、O-吡啶基酪氨酸、O-吡啶基甲基酪氨酸、O-甲基丝氨酸、O-叔丁基丝氨酸、O-烯丙基丝氨酸、O-苄基丝氨酸、O-甲基苏氨酸、O-叔丁基苏氨酸、O-苄基苏氨酸、O-甲基天冬氨酸、O-叔丁基天冬氨酸、O-苄基天冬氨酸、O-甲基谷氨酸、O-叔丁基谷氨酸、和O-苄基谷氨酸。
可酶切肽也可以包含一种修饰氨基酸，即4-氮杂羟基苯基丙氨酸(4-氮杂Hof或氮杂Hof)、4-氨基甲基丙氨酸、4-吡啶基丙氨酸、4-氮杂苯基丙氨酸、吗啉基丙基甘氨酸、哌嗪基丙基甘氨酸、N-甲基哌嗪基丙基甘氨酸、4-硝基羟基苯基丙氨酸、4-羟基苯基甘氨酸、或2-(4，6-二甲基嘧啶基)赖氨酸。
可酶切肽也可以包含一种称为Paa的氨基酸，即脯氨酸这种天然氨基酸，或可以是一种模拟脯氨酸的修饰的或非天然的氨基酸。本文中使用“脯氨酸模拟物”有如下通式 式中R5选自H、卤素、C1-C6烷基、-OH、C1-C6烷氧基、羟甲基、苯氧基、和苄氧基；R6选自H、C1-C6烷基、-OH、C1-C6烷氧基；n是2、3、4、或5。优选的脯氨酸模拟物有如下通式 式中R5选自H、卤素、C1-C6烷基、-OH、C1-C6烷氧基、和苄氧基；n是2、3、4、或5。更优选的n是3或4。脯氨酸模拟物的实例是4-羟基脯氨酸、3-甲基脯氨酸、4-甲基脯氨酸、5-甲基脯氨酸、4，4-二甲基脯氨酸、4-氟脯氨酸、4，4-二氟脯氨酸、4-溴脯氨酸、4-氯脯氨酸、4-羟甲基脯氨酸、3-羟基脯氨酸、3-羟基-5-甲基脯氨酸、3，4-二羟基脯氨酸、3-苯氧基脯氨酸、2-氮杂环丁烷羧酸、4-甲基-2-氮杂环丁烷羧酸、2-哌啶酸、5-羟基-2-哌啶酸、和4，5-二羟基-2-哌啶酸。脯氨酸模拟物的优选实例是4-羟基脯氨酸、2-氮杂环丁烷羧酸、和2-哌啶酸。Paa的实例包括但不限于Pro、4-羟基脯氨酸、二羟基脯氨酸、2-羧基氮杂环丁烷、高-Pro、环己基甘氨酸、4-氟苯基丙氨酸、3-哌啶甲酸、和噻唑烷-4-羧酸。
可酶切肽有这样的氨基酸顺序，其中，该氨基酸中的一种或多种任选地有同系的或同功能的氨基酸取代，使得细胞分泌肽酶对这些肽的识别和切断没有受到有害影响。例如且非限制性地，可以(在任意方向上)进行下列氨基酸取代A-G；R-K-Orn；N-Q；D-E；I-V-L-M-Nle；F-W-Y；和S-T。
进而，可酶切肽任选地在不与该抗肿瘤剂连接的那一端用技术上称为封端基团的东西修饰，例如，该可酶切肽的N-末端用一种N-末端封端基团或一种“氨基封端基团”修饰。这样的修饰有许多理由，例如，提高该肽在血浆中对非选择性酶引起的酶降解的血浆稳定性，或提高溶解度。
氨基封端基团是技术上已知的，而且以种种方式存在，例如包含1～20个碳原子的各种酰基、硫代酰基、烷基、磺酰基、磷酰基、和膦酰基基团；其中，这些基团上的取代基可以是烷基、芳基、烷芳基等中任意一种，而且可以含有杂原子O、S、和N作为取代基或链中成分。许多氨基封端基团是熟悉肽合成技术的人员所认识的。Gross和Meinhoffer编辑The Peptides，Vol.3；3-88(1981)，Academic Press，New York，和Greene与Wuts，Protective Groups in Organic Synthesis，315-405(1991)，J.Wiley&Sons，Inc.，New York，公开了许多可用于本发明的适用胺保护基团，而且为此目的将其列为本文参考文献。
除以上外，更优选的“氨基封端基团”可以是链烷酰基、羟基化链烷酰基、多羟基化链烷酰基、芳酰基、羟基化芳酰基、多羟基化芳酰基、环烷酰基、杂环酰基、聚乙二醇、糖基化物、糖类、羧基糖类、氨基酸、二羧酸、和冠醚类；每一种都经由一个酰胺键连接到肽的N-末端。氨基封端基团的实例包括但不限于乙酰基(Ac)、新戊酰基、甲氧乙酰基、丙二酰基、琥珀酰基(Suc)、戊二酰基、苯甲酰基、甲氧琥珀酰基(MeO-Suc)、吡啶羰基、吡嗪羰基、苄氧羰基(Cbz)、和叔丁氧羰基。替而代之，含有胺官能的氨基封端基团例如各种羧基糖类和含有碱性胺的氨基酸可以经由脲键连接到该肽连接体的N-末端上。
作为已知为氨基封端基团的一类化合物的聚乙二醇，是通式为H3CO-(CH2CH2O)t-CH2C(＝O)-的乙烯氧基化合物，式中t是1～10。优选的聚乙二醇是其中t为1、2、3、或4者；更优选的是其中t为1或2者。除非另有说明，否则“聚乙二醇”或“PEG”或“Peg”均系指式H3COCH2CH2OCH2CH2OCH2C(＝O)-的氨基封端基团。作为氨基封端基团的聚乙二醇可以进行修饰，以便包括式H2N-(CH2CH2O)t-CH2C(＝O)-的氨基聚乙二醇，式中t为1、2、3、或4；以及式H3CC(＝O)HN-(CH2CH2O)t-CH2C(＝O)-的乙酰胺基聚乙二醇，式中t为1、2、3、或4；以及式HO2CCH2O(CH2CH2O)t-CH2C(＝O)-的羧甲基聚乙二醇，式中t为1、2、3、或4。
进而，氨基封端基团可以任选地是一种用链烷酰基、二羧酸、三羧酸、或二羧酸酯修饰的氨基酸。实例包括但不限于，例如在丝氨酸或γ-谷氨酸的氨基末端上修饰的乙酰基(Ac)、甲氧乙酰基、丙二酰基、琥珀酰基(Suc)、戊二酰基、3-羟基-3-甲基戊二酰基(HMG)、柠檬酰基、甲氧琥珀酰基(MeO-Suc)、甲氧丙二酰基、或甲氧戊二酰基。例如，乙酰基丝氨酸(Ac-Ser)、甲氧琥珀酰基丝氨酸(MeO-Suc-Ser)、和琥珀酰基丝氨酸(Suc-Ser)。
将肽连接到抗肿瘤剂上，从而衍生本发明中提供的化合物；所述连接可以经由该肽的氨基末端或羧基末端进行。这里使用的“连接”系指一种肽与一种生物活性剂的连接。这样的连接可以直接、经由该肽与该药剂之间的共价键合、用普通熟练技术人员众所周知的手段和试剂进行。该肽与该药剂之间的共价键合包括在该抗肿瘤剂上的游离氨基与该肽