专利名称：含有韩国米酒浓缩液、具有抗氧化和美白效果的组合物的制作方法由于生活方式的快速改变和环境污染等的影响，现代人经受各种各样的压力。压力之下，人体内活性氧(ROS)的产生增加了。活性氧被称为是促进老化的一个诱因。特别是由于活性氧的脂质过氧化反应产生的包含脂质过氧化物的过氧化物，通过诱导细胞产生氧化损伤，从而引起各种功能紊乱和疾病。几种因素参与决定人体肤色。其中，产生黑色素的黑素细胞的活性、血管的分布、 皮肤的厚度、类胡萝卜素和胆红素等色素的有无等都很重要。黑色素过量，可能会导致活斑、雀斑、老年斑和色素沉着过度等。此外，随着户外休闲时间的增加，也需要加强预防由于紫外线引起的黑色素沉着。
[技术问题]本发明旨在提供含有浓缩浊酒的、用于皮肤外部涂敷的组合物。本发明还旨在提供含有浓缩浊酒的抗氧化组合物。本发明还旨在提供含有浓缩浊酒的美白组合物。[技术方案]本发明的组合物含有作为活性成分的浓缩浊酒。[有益效果]本发明的组合物表现了抗氧化和美白效果，因此可广泛应用于化妆品、功能性食品或药物领域。[最佳方式]本发明涉及含有作为活性成分的、浓缩浊酒(makgeolli，韩国米酒)的组合物。通过不同的反复试验，本发明的发明人已经发现浓缩浊酒具有抗氧化和美白效果。可通过过滤或离心浊酒，再将得到的滤液或上清液进行浓缩，即可得到浓缩浊酒。本发明中使用的浊酒没有特别的限制，例如可以按照下面步骤进行制备。浊酒一般的制备步骤包括大米的抛光/清洗一浸泡/脱水一汽蒸并冷却一麦芽化/粗液的制备 —一次发酵一二次发酵一成熟一过滤。详情如下在大米的抛光/清洗阶段，用抛光机对大米进行抛光并去除杂质。在浸泡/脱水阶段， 用水浸泡大米，接着将水除去。在汽蒸阶段，将含有合适含量的水的大米用100°c或更高温度的热蒸汽蒸。在麦芽化/粗液制备阶段，汽蒸过的大米在人工培养的真菌的作用下进行麦芽化。在一次发酵阶段，将麦芽化的大米浸在水中开始发酵。在二次发酵阶段，将酵母、 水和大米淀粉加入到发酵粗液中，约5-6小时后浊酒便制备好了。在成熟阶段，将在二次发酵阶段制备的浊酒在25°C或更低的温度下进行成熟。在过滤阶段，可通过筛子过滤成熟的浊酒。这种浓缩浊酒的方法没有特别限制。例如，可通过过滤和/或离心浊酒，从滤液中分离残渣，然后再减压浓缩分离的滤液来实现浓缩。本发明的组合物可以是包含作为活性成分的浓缩浊酒、用于皮肤外部涂敷的组合物。该组合物具有抗氧化和/或美白效果。在一个示例性实施例中，所述组合物可以是抗氧化组合物。特别地，包含于所述组合物中的浓缩浊酒通过抑制活性氧(ROS)的生成来发挥抗氧化效果。活性氧是指具有强反应性的不稳定氧自由基。各种物理、化学和环境因素包括酶的因素、还原代谢、化学品、污染物和光化学反应均可产生活性氧。已知它们非特异性地和不可逆转地损伤细胞成分，例如脂质、蛋白质、糖和DNAs，从而引起老化以及包括癌症在内的各种疾病。活性氧过量会产生毒性，即氧化应激。因此，通过抑制活性氧的生成和去除活性氧，本发明的组合物表现出了其抗氧化效果。在另一个示例性实施例中，所述组合物可以是美白组合物。特别地，包含于所述组合物中的浓缩浊酒通过抑制黑色素的生成和/或改善色素沉着来发挥美白作用。黑色素是一类酚醛聚合物物质，作为由黑素细胞产生的黑色素和蛋白质的复合物。黑色素通过阻挡阳光中的紫外线来保护皮肤，同时通过清除自由基来保护皮肤中的蛋白质和基因。但是响应皮肤内部或外部与压力相关的刺激产生的黑色素是稳定的，并且留下来直到通过角质化去除。当黑色素的浓度高于所需浓度时，会诱导色素沉着过度造成美容上不良效果，如活斑、雀斑等。因此，通过抑制黑色素的生成和改善色素沉着过度，本发明的组合物表现出了皮肤美白效果。在一个示例性实施例中，所述组合物可可以是用于皮肤外部涂敷的组合物，更特别地是化妆品组合物。组合物中浓缩浊酒的含量没有具体限制。例如，其占组合物总重量的质量百分比可以是0. 001-90wt%，特别是0. 01-30wt%，更特别是0. l_10wt%。上述浓缩浊酒的含量范围是通过反复试验得出的。本发明用于皮肤外部涂敷的组合物可制成，例如润肤乳液、收敛乳液、滋养乳液、 眼霜、滋养霜、按摩霜、洁面霜、洁面泡沫、洁面水、粉剂、精华、面膜等，但并不仅局限于此。在一个示例性实施例中，本发明的组合物可以是含有作为活性成分的浓缩浊酒的抗氧化组合物和/或美白组合物。例如，该组合物可以是功能性食品组合物或药物组合物， 但并不仅局限于此。可以将功能性食品组合物制成粉剂、颗粒剂、片剂、胶囊、饮剂等。如有需要，功能性食品组合物还可以含有一种或多种添加剂。添加剂可以包括柚子、苹果、桔子、柠檬、菠萝、香蕉、梨等的果汁(浓缩果汁、果汁粉等)；维生素(水溶性和油溶性维生素如维生素A、核黄素、维生素氏、维生素B12、抗坏血酸钠、维生素 、泛酸钙、叶酸、 维生素H、维生素D3、重酒石酸胆碱、维生素E和β -胡萝卜素等)；香料(柠檬香料、桔子香料、草莓香料、柚子香料和香草香精等)；氨基酸、核酸及其盐(谷氨酸、谷氨酸钠、甘氨酸、丙氨酸、天门冬氨酸、天门冬氨酸钠和肌苷酸等)；植物纤维(聚葡萄糖、果胶、黄原胶、葡甘露聚糖和海藻酸等)；矿物质(氯化钠、乙酸钠、硫酸镁、氯化钾、氯化镁、碳酸镁、氯化钙、磷酸二氢钾、磷酸二氢钠、甘油磷酸钙、柠檬酸亚铁钠、柠檬酸铁铵、柠檬酸铁、硫酸锰、硫酸铜、 碘化钠、山梨酸钾、锌、锰、铜、碘和钴等)及其它。
药物组合物还可以含有药物佐剂，如防腐剤、稳定剂、润湿剂或乳化剤、用于渗透控制的盐和/或缓冲剂以及其它治疗上有用的物质，并可以根据本领域已知的方法将其制成各种ロ服或肠胃外给药的剂型。用于ロ服给药的剂型包括例如片剂、丸剤、硬和软胶囊、液体、悬浮剂、乳液、糖浆剂和颗粒剂等。除了有效成分外，这些剂型还包括稀释剂(如乳糖、葡萄糖、蔗糖、甘露醇、山梨醇、纤维素和甘氨酸)和润滑剂(如硅石、云母、硬脂酸及其镁盐或钙盐和聚乙ニ醇)。片剂还包括粘合剤，如硅酸铝镁、淀粉糊、明胶、黄蓍胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠和聚乙烯吡咯烷酮。根据需求场合，还可以含有药物添加剤，如崩解剂、吸附剂、着色剂、香料和甜味剂等，例如淀粉、琼脂、海藻酸及其钠盐。片剂可通过一般的混合、造粒或包衣的方法制得。 用于肠胃外给药的剂型包括用于皮肤外部涂敷的剂型、注射剂等。外用于皮肤外部涂敷的剂型可以是软膏，注射剂可以是等渗溶液或悬浮液。本领域的技术人员可以确定活性成分的给药剂量。本发明的組合物对于成人的日给药剂量可以是l-500mg/kg，特别是30-200mg/kg，尽管给药剂量根据包括受试者的年齢和生理条件、有无并发症等在内的不同因素而不同。每天给药一次或两次。然而，上述给药剂量不以任何方式限制本发明的范围。浓缩浊酒占組合物总质量的百分比可以是10_90wt%，特别是20_50wt%，但并不特别限制于此。浓缩浊酒的用量是根据实际情况考虑来決定的，制备片剂或软胶囊吋，可含有 10-60%的粉剂和功能性成分，制备硬胶囊时，可含有10-90%的粉剂和功能性成分。本发明可提供含有10-90%的浓缩浊酒的功能性食品組合物或药物组合物。

用滤布过滤市售的浊酒(5kg)，并离心去除滤液中的杂质。分离的滤液再在减压条件下进行浓縮，得到浓缩浊酒(50g)。[测试实施例1]浓缩浊酒的抗氧化效果(DPPH测试)
基于有机根1，1- ニ苯基-2-苦基胼(DPPH)的减少产生的吸光度的变化来測定(抗氧剂被氧化)抗氧化效果。将吸光度降低至对照组的50%时的浓度(IC5tl)确定为抗氧化效果。将100 μ M DPPH溶液(在乙醇中，190 μ L)与实施例1中制备的浓缩浊酒或对照组 (体积均为10 μ L)混合。将产生的混合液在37°C保持30min，測定540nm处的吸光度。将已被广泛用于合成抗氧化剂的水溶性维生素E用作对照組。DPPH的测试结果见表1。表 1
样品IC50 (ppm)浓缩浊酒7. 45水溶性维生素E8. 64
由表1可知，浓缩浊酒比水溶性维生素E具有更好的抗氧化效果。
[测试实施例2]使用荧光物质测定的活性氧生成抑制效果
使用人角质形成細胞HaCaT細胞株。将所述細胞接种到96孔黑板上，用于荧光测试， 每孔2. OxlO4个細胞，使用含有青霉素/链霉素的杜尔贝科改良fegle培养基(DMEM，胎牛血清10%)，将细胞在37°C和5%0)2的条件下培养1天，接着用测试样品进行处理。使用含有青霉素/链霉素、不含血清(胎牛血清)的杜尔贝科改良fegle培养基(DMEM)，将细胞在 37°C和5% CO2的条件下培养1天，然后用如表2所示的测试样品进行处理。培养M小时后，用HEPES -缓冲控制盐溶液(HCSS)清洗去除剩余的培养基，加入 20 μ M 2，，7，- 二氯二氢-荧光素二乙酸酯(DCFH-DA, Molecular Probes, Inc.，100 μ L), 再将所述细胞在37°C和5%0)2的条件下培养20min，然后用HCSS清洗。加入HCSS( 100 μ L)， 用不同浓度的样品处理后，使用荧光酶标仪(fluorescence plate reader) (Ex = 485nm, Em = 530nm)测定活性氧(ROS)和氧化二氯荧光素(DCF)的荧光强度。接着，使用荧光酶标仪(Ex = 485nm, Em = 530nm)测定经紫外线B (30mJ/cm2)照射结束时以及3小时后的荧光强度。用水溶性维生素E作对照组。每个测试样品的活性氧生成抑制效果(对照组的百分率)见表2。表

本发明公开了含有作为活性成分的韩国米酒的浓缩液的组合物。该组合物展示了抗氧化和美白效果，因此可广泛应用于化妆品、功能性食品或药物领域。