苯并呋喃酮衍生物在制药中的应用制作方法

张嫡群, 任雷鸣, 付焱, 袁志芳, 王志云, 张兰桐

2003年10月1日

2002年5月28日

2002年5月28日

河北医科大学

A61P25/04GK1445221SQ0211798

苯并呋喃 衍生物 制药 应用

1.下述通式为(I)化合物 其中R3表示CH3或＝CH22.按照权利要求1的化合物，其中R1、R2、R3分别表示编号 R1R2R31 CH3CH2COCH3-CH3或＝CH22 CH3CH2COHCH3或＝CH23 CH3CH2COCH3CO CH3或＝CH24 CH3CH2COCH3CH2CO CH3或＝CH25 CH3CH2COCH3CH2CH3或＝CH26 H CH3CH3或＝CH27 H HCH3或＝CH28 H CH3CO CH3或＝CH29 H CH3CH2CO CH3或＝CH210 H CH3CH2CH3或＝CH211 CH3COCH3CH3或＝CH212 CH3COHCH3或＝CH213 CH3COCH3CO CH3或＝CH214 CH3COCH3CH2CO CH3或＝CH215 CH3COCH3CH2CH3或＝CH216 CH3CH3CH3或＝CH217 CH3HCH3或＝CH218 CH3CH3CO CH3或＝CH219 CH3CH3CH2CO CH3或＝CH220 CH3CH3CH2CH3或＝CH221 CH3CH2CH3CH3或＝CH2编号 R1R2R322 CH3CH2H CH3或＝CH223 CH3CH2CH3COCH3或＝CH224 CH3CH2CH3CH2COCH3或＝CH225 CH3CH2R2＝CH3CH2CH3或＝CH23.权利要求1或2中任意一项的化合物在制备镇痛药物中的应用

本发明涉及苯并呋喃酮衍生物的用途，尤其涉及在制药领域中的用途金佛草地上部分粉碎，用95％乙醇室温浸提，得浸提物，分别用乙醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇提取上述浸提物，其中氯仿部分合并浓缩后，置硅胶柱上分离用梯度洗脱，合并相同成分的洗脱液，浓缩，分别得白色斜方结晶(I)(britannilactone，mp.175～177℃，0.03％)和针状结晶(II)(1-O-Acetylbritanniactone，mp.124～126℃，0.01％) 由此我们研究了一系列化合物，该系列化合物均含有苯并呋喃酮结构，且具有镇痛活性该类系列化合物的结构通式如下 苯并呋喃酮衍生物结构编号R1R2R31 CH3CH2CO CH3-CH3或＝CH22 CH3CH2CO H CH3或＝CH23 CH3CH2CO CH3COCH3或＝CH24 CH3CH2CO CH3CH2CO CH3或＝CH25 CH3CH2CO CH3CH2CH3或＝CH26 HCH3CH3或＝CH27 HH CH3或＝CH28 HCH3COCH3或＝CH29 HCH3CH2COCH3或＝CH210 HCH3CH2CH3或＝CH2 11 CH3CO CH3CH3或＝CH212 CH3CO H CH3或＝CH213 CH3CO CH3CO CH3或＝CH214 CH3CO CH3CH2CO CH3或＝CH215 CH3CO CH3CH2CH3或＝CH216 CH3CH3CH3或＝CH217 CH3H CH3或＝CH218 CH3CH3CO CH3或＝CH219 CH3CH3CH2CO CH3或＝CH220 CH3CH3CH2CH3或＝CH221 CH3CH2CH3CH3或＝CH222 CH3CH2H CH3或＝CH223 CH3CH2CH3CO CH3或＝CH224 CH3CH2CH3CH2CO CH3或＝CH225 CH3CH2R2＝CH3CH2CH3或＝CH2本发明的关键在于发明人通过长期大量关于苯并呋喃酮衍生物的镇痛作用的实验研究，至今未见记载或报道本发明通过小鼠醋酸扭体实验、热板实验、甩尾实验及福尔马林舔足实验证明，苯并呋喃酮衍生物100mg/kg的剂量具有较强的镇痛作用苯并呋喃酮衍生物的镇痛作用有以下特点①镇痛作用起效快(0.5小时即有效应)，维持时间长(约3小时)；镇痛期间，呈现双峰，第一峰值出现于1小时，第二峰值出现于2.5小时②镇痛机制包括神经性和炎性镇痛两种，10～50mg/kg剂量抑制炎性痛，高剂量(100mg/kg)时对炎性痛和神经痛均可抑制③镇痛活性物质对光不稳定，自然光线下放置10天活性逐渐下降，20天活性全部消失避光可保证镇痛物质长期(已观察6个月)稳定苯并呋喃酮衍生物的镇痛药理学实验简述如下苯并呋喃酮衍生物对各种动物疼痛模型的治疗作用实验(1)首先建立小鼠的醋酸扭体实验模型(化学刺激所致的疼痛)将雄性小鼠分组，每组10只，实验前禁食12小时，饮水不限实验分阿司匹林组0.2g/kg、苯并呋喃酮衍生物治疗组100mg/kg、太极通天液组(相当于人用量的40倍)、对照组以上各组均灌胃给药，容积0.2ml/10g体重于给药后1小时，腹腔注射0.6％乙酸溶液0.2ml/只，以腹部内陷、躯体扭歪、后肢伸直、臀部高起为扭体反应阳性，观察20分钟内扭体小鼠只数及扭体次数以组间t检验比较各给药组与对照组差异的显著性结果显示，苯并呋喃酮衍生物灌胃给药均有显著的镇痛作用，小鼠扭体次数显著减少(2)建立小鼠热板法实验(热刺激所致的疼痛)雌性小鼠，体重18-22g，实验前禁食12小时，饮水不限实验开始前，将小鼠放到预先加热到55±0.5℃的热板测痛仪上，以小鼠舔后足为痛反应指标，挑选痛阈潜伏期在5-30s的小鼠用于实验取挑选出的小鼠，随机分为空白对照组、苯并呋喃酮衍生物组和阿司匹林组，每组10只苯并呋喃酮衍生物按100mg/kg给药，阿司匹林组给药0.2g/kg，空白对照组给予0.01％的吐温-80溶液以上各组均灌胃给药，容积0.2ml/10g体重以t检验比较各组给药后不同时间痛阈值差异的显著性小鼠在实验前先测定基础痛阈值，灌胃给药后分别于30min、60min、90min、120min、150min、180min，置小鼠于55±0.5℃的热板上，测定热痛反应时间将测定结果与自身的基础痛阈值进行比较苯并呋喃酮衍生物显著延长了热板小鼠的痛阈值，而且出现了两个峰值，一个位于1小时，另一个峰值位于2.5小时，阿司匹林无镇痛作用(3)建立小鼠甩尾法实验取小鼠，雌雄各半，体重18-22g实验前禁食12小时，自由饮水实验以48±0.5℃恒温水浴为热致痛源，将小鼠固定后，将尾尖至尾尖以上5cm的尾段放入热水中，记录小鼠尾部入水到甩出水面或剧烈摆动的反应时间，挑选甩尾反应时间在5-10秒以内的小鼠用于试验取挑选出的小鼠，随机分3组，每组10只，雌雄各半苯并呋喃酮衍生物按100mg/kg给药，阿司匹林组给药0.2g/kg，空白对照组给予0.01％的吐温-80溶液以上各组均灌胃给药，容积0.2ml/10g体重苯并呋喃酮衍生物灌胃给药后30min，60min，90min，120min，150min，180min，置鼠尾于48±0.5℃的水浴中，测定痛阈值将测定结果与自身的基础痛阈值进行比较以组间t检验比较各组给药后不同时间痛阈值差异的显著性苯并呋喃酮衍生物显著延长了小鼠的痛阈值，而且镇痛作用出现了两个峰值，一个位于1小时，另一个峰值位于2.5小时，阿司匹林无效(4)福尔马林舔足试验取小鼠，雌雄各半，体重25-30g，随机分4组，每组10只实验前禁食12小时，饮水不限苯并呋喃酮衍生物分成二个剂量组，100mg/kg组和200mg/kg组，阿司匹林组给药0.2g/kg，空白对照组给予0.01％的吐温-80溶液以上各组均灌胃给药，容积0.2ml/10g体重，小鼠给药45分钟之后，将5％的福尔马林溶液10μL注射于动物的后足掌皮下，用记时器记录动物0-5min和15-35min的时间内，小鼠舔其后足注射部位的累积时间结果显示，苯并呋喃酮衍生物按100mg/kg、200mg/kg，阿司匹林按0.2g/kg给小鼠灌胃，给药后45分钟苯并呋喃酮衍生物100mg/kg抑制了第二时相的疼痛反应；苯并呋喃酮衍生物给予200mg/kg后，第一时相和第二时相反应均被抑制阿司匹林仅抑制第二时相的疼痛反应(5)时效关系试验雄性小鼠，体重18-22g，随机分为6组，每组10只实验前禁食12小时，饮水不限各组小鼠按100mg/kg剂量灌胃给予苯并呋喃酮衍生物，给药容积为0.2g/10g各组小鼠给药后0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、4.0小时，腹腔注射0.6％乙酸0.2ml/只，观察记录20min内的扭体次数空白对照动物给予0.01％的吐温80溶液结果显示，动物给予苯并呋喃酮衍生物后0.5小时即显示出镇痛效果，1小时时达到第一个峰值，随后镇痛效应逐渐下降；第2.5小时后镇痛作用又增强，达到第二个峰值，此时(2.5小时)的镇痛作用甚至超过1小时的镇痛效果(6)量效关系实验采用小鼠扭体实验法，我们观察了苯并呋喃酮衍生物50，100，150和200mg/kg灌胃给药后30分钟时的镇痛效果结果表明，苯并呋喃酮衍生物50～200mg/kg均具有明显的镇痛作用，并具有明显的量效关系(7)稳定性实验包括冷藏样品稳定性和样品室温稳定性实验冷藏稳定性，即将苯并呋喃酮衍生物装于磨口瓶中，储藏于4℃冰箱中冷藏放置室温稳定性，即将同一批制得的苯并呋喃酮衍生物分别分装于无色磨口瓶和棕色磨口瓶中，于室温下放置以上样品分别于0、3、5、10、15、30、40、50、60、90、120、150、180天取样，按100mg/kg的给药量配制溶液，进行小鼠的醋酸扭体实验结果显示，180天内药物的镇痛活性不变苯并呋喃酮衍生物在室温下避光保存90天，药物的镇痛作用无变化；但是，室温自然光线下放置20天后，药物的镇痛作用消失苯并呋喃酮衍生物对依赖性成瘾反应的实验选雄性小鼠70只，体重18-20g，随机分对照组、吗啡组，苯并呋喃酮衍生物各组吗啡组鼠在3天内皮下注射吗啡9次，吗啡剂量如下1、2、4、8、15、25、35、45、45mg/kg/次，苯并呋喃酮衍生物组小鼠灌胃给予苯并呋喃酮衍生物(3天内9次)，剂量如下50、75、100、125、150、200、225、225mg/kg/次对照组同法皮下注射生理盐水末次给药后2小时，各组鼠腹腔注射丙烯吗啡50mg/kg，记录给丙烯吗啡后10min内小鼠跳跃反应发生率与跳跃次数(小鼠跳跃可视为吗啡或药物成瘾后戒断症状)结果表明；苯并呋喃酮衍生物无药物依赖性无成瘾反应急性毒性试验取小鼠20只，雌雄各半，体重18-20g将苯并呋喃酮衍生物2500mg/kg当日分成两次灌胃给药，然后正常饲养7天，无一死亡解剖后观察，未见内脏器官有明显病理变化临床实例全部病例均系门诊患者，采用病、证结合双重诊断标准，头痛参照国际头痛协会(HS)于1988年制定的头痛分类及诊断标准(1)治疗组30例，男9例，女21例，年龄17～60岁，病程1～10年头痛发作程度及频率，重型5例，中型13例，轻型12例经颅多普勒超生检查，双侧脑血管扩张7例，右侧脑血管扩张4例，左侧脑血管扩张5例，椎基底动脉供血不足6例，血管痉挛8例(2)正天丸组30例，男11例，女19例，年龄17～60岁，病程1～10年头痛发作程度及频率，重型4例，中型12例，轻型14例经颅多普勒超生检查，双侧脑血管扩张7例，右侧脑血管扩张5例，左侧脑血管扩张4例，椎基底动脉供血不足5例，血管痉挛9例两组在病程、性别、年龄、病情轻重、经颅多普勒等检查，经统计学处理，两组具有良好的可比性采用分组对照方法，将受试对象随机分为治疗组和对照组，每组30例，治疗组口服欧亚旋覆花内酯，每日3次，每次0.15克，对照组口服正天丸(南方制药厂生产，批号980401)，每日3次，每次6克两组在治疗前一周及治疗期间禁止服用其他对血管舒缩功能有影响的药物7天为一疗程，观察1疗程头痛强度按Bussone(1987)分5级0为无疼痛；1为轻度疼痛；2为中度疼痛；3为严重疼痛；4为剧烈疼痛疗效标准临床痊愈，头痛及伴随症状消失；显效，疼痛强度减轻2级，伴随症状减轻、或发作次数、或疼痛持续时间减少2/3以上；有效，疼痛强度减轻1级，或发作间隔时间延长、或疼痛持续时间缩短不足2/3；无效，疼痛强度减轻不足1级，或疼痛持续时间缩短不足1/3，或疼痛加重，持续时间延长结果见表1，两组疗效经Ridit检验，u＝2.41，差异有显著性意义(P＜0.05)表1.欧亚旋覆花内酯与正天丸对头痛的疗效组别 例数痊愈 显效 有效 无效 总有效率％冲剂 30 17(56.7) 9(30)3(10)1(3.3)96.7正天丸 30 9(30) 8(26.7) 9(30)4(13.3) 86.