专利名称：核受体结合剂的制作方法配体活化的转录因子的核激素受体超家族存在于多种组织中，负责这些组织中的许多效应。核受体(NR)超家族目前包括大约48种不同的蛋白质(其中27种是配体调节的)， 其中大部分被认为作为配体活化的转录因子起作用，其通过调节基因表达产生许多不同的生物响应。该家族的成员包括内源性的小的亲脂性分子的受体，例如类固醇激素、类视色素、维生素D和甲状腺激素。核受体(NR)超家族包括类固醇核受体亚家族,包括盐皮质激素受体(MR)(或醒固酮受体)、雌激素受体(ER)、ERa (ER- a )和ERP (ER-β)、雄激素受体(AR)、黄体酮受体(PR)、糖皮质激素受体(GR)等。在结构上也密切相关的是雌激素相关受体(ERR)ERR-a、ERR-β和ERR-Y。类固醇核受体在机体内执行重要功能，其中一些与电解质的转录稳态和水平衡、生长、发育及伤口愈合、生殖力、应激响应、免疫功能和认知功能有关。这些效应可通过细胞溶质、线粒体或核事件介导。因此，调节(即拮抗、激动、部分拮抗、部分激动)类固醇核受体活性的化合物是许多方法中具有特定效用的重要药剂，以及用于治疗和预防由类固醇核受体活性调节的多种疾病和病症。雌激素和抗雌激素的生物学作用通过两种不同的胞内受体、雌激素受体a (ER-a)和雌激素受体β (ER-β)来显现。例如，ER-β存在于，除其它组织外，脑、骨、免疫系统、胃肠道、肺、卵巢、子宫内膜、前列腺、脉管系统、泌尿生殖道、唾液腺等。ER-β在这些组织中的作用已通过ER-β敲除小鼠中观察到的表型得到确认。这些组织中的病理学可通过施用ER-β选择性配体进行治疗。代谢疾病例如肥胖症、胰岛素抗性和II型糖尿病的流行已在过去的十年间急剧增加。例如，估计在2008年全球有4亿人肥胖或超重，并且大约2/3的美国人超重或肥胖，使肥胖症成为严重的健康危险和社会的经济负担。肥胖症并不是独立的疾病，因为其出现导致各种并发症，包括2型糖尿病(T2DM)、高血压、动脉粥样硬化和其它心血管疾病、骨质疏松症和临床抑郁症[Lavie 等，2009J Am Coll Cardiol53:1925-32 ;Fabricatore 等2006Annu Rev Clin Psychol2:357_77]。目前还没有对付这种大流行问题的有效药物治疗。尽管外科操作可减轻体重50-90%，但是因为外科手术的危险和相关的副作用其是受限的。目前在市场上最好的药物通常每年最多减轻体重约5-10%。仅仅FDA批准的两类药物可用来治疗超重适应症1.苯丙胺类和西布曲明，其对下丘脑起作用以控制CNS中的食欲刺激。2.奥利司他，其是阻滞脂肪的胃肠吸收并降低能量摄取的脂酶抑制剂[Cooke等2006NatRev Drug Discov5:919-31]。与这些药物相关的常见副作用包括心动过速、高血压、大便失禁和/或心脏瓣膜病变，使抗肥胖症药物研发变得至关重要。因此，本领域需要更多有效且安全的药物来治疗疾患例如肥胖症和其它相关的疾病和代谢病症。肥胖症是异质性疾病，其当能量摄取超过能量消耗时发生。尽管肥胖症的病因学仍不确定，但是数种机理例如下丘脑中进食行为信号的改变、瘦素水平、由白脂肪组织(WAT)分泌的脂肪因子、神经肽和控制行为的神经递质、与年龄相关的激素变化、动物脂肪的炎性信号、应激等引发肥胖症出现[Yu等2009Forum Nutr61:95-103 ;Rother等2009Dtsch Med Wochenschrl34:1057-9 ;Reisin 等 2009Med Clin North Am93:733-51]。绝经期后肥胖症、男性更年期内脏型肥胖症的发病率的增加和代谢疾病发病率的性别差异表明核激素受体(NR)超家族在调节体重中的重要性[Allende-Vigo MZ2008P RHealth Sci J27:190-5 ;Geer 等 2009Gend Med6Suppll: 60-75]。很多 NR在调节代谢疾病的出现中起关键作用。胆汁酸NR例如法尼酯X受体(FXR)、组成性雄甾烷受体(CAR)和孕甾烷X受体(PXR)的活化促进重量减轻并且还增加胰岛素敏感性[Thomas等2008Nat Rev DrugDiscov7:678-93 ；Cariou B 等 2007Trends Pharmacol Sci28:236-43]。同样，雌激素相关受体(ERRa、ERRP和ERR Y )在增加能量消耗、减少脂肪生成和体重增长方面上起重要作·用[Ariazi EA等2006Curr Top Med Chem6:203-15]。属于过氧化物酶体增殖子活化受体(PPAR)的NR的其它成员和雌激素受体(ER)还在维持血糖和体脂肪方面上起作用，使NR成为预防/治疗肥胖症和代谢疾病的有吸引力的祀[Kintscher U等2009Curr Opin InvestigDrugslO:381-7 ；Beekum O 等 Obesity(Silver Spring)17:213-9 ；Billin AN2008ExpertOpin Investig Drugsl7:1465-71 ；Barros RP 等 2006Trends MolMedl2:425-31]。ER-β在一些情况下通过与ER-α杂二聚化起ER-α的拮抗剂的作用。例如，ER-β的激动剂可阻滞ER-α在组织例如前列腺和乳房中的增殖性影响，在这些组织中已知ER-α促进瘤形成。ER-β除了其抗ER-α介导的生长抑制之外还自主地抑制增殖并促进前列腺癌和其它癌症的分化。据信ER-β还拮抗前列腺组织中AR的增殖效应。前列腺肥大和增生/发育异常可能起因于雄激素刺激增殖和/或ER- β受局部合成的雌激素活化失败的组合。这种肥大或增生/发育异常经常引起多种前列腺病例如ΒΡΗ、前列腺炎性萎缩(瘤形成的前体)、ΡΙΝ和CaP。可期待外源性ER-β激动剂提供前列腺的抗增殖作用，从而有益于这些前列腺疾病的预防或治疗。此外，与治疗许多此类疾病的同工型非选择性配体相比，可期待ER-β选择剂的副作用下降。因此，起雌激素受体配体作用的化合物可用于治疗多种疾患和病症。例如在美国专利公布No. 2009/0030036中公开了选择性雌激素受体调节剂(雌激素受体配体，例如ER^激动剂)。激素是脂肪功能的重要调控剂，并且流行病学研究表明雌激素调控代谢和脂肪分布。ER-α和ER-β (两种介导雌二醇作用的受体)在脂肪组织中的存在牵涉到配体在脂肪功能中的直接作用。而且，人褐色脂肪组织(BAT)的发现中观察到的性别和年龄差异指向这样的可能性，即循环雌二醇水平可以是针对BAT形成的重要贡献者[Cypess AM等.2009NEngl J Med360:1509-17]。对于个体ER敲除(KO)小鼠的研究指出这些同工型在维持脂质和葡萄糖稳态中的重要性[Harris HA2007Mol Endocrinol21:1-13]。ER-αΚΟ小鼠显示胰岛素抗性，而高脂肪饮食喂养的ER-β KO小鼠证明了比野生型小鼠更高的肥胖症等级[Foryst-Ludwig A等2008PLoS Genet4:el000108]。尽管这些研究中的一些设想体重的雌激素控制由ER-β介导，但是仍不清楚哪种同工型介导雌二醇对体脂肪、葡萄糖和胆固醇的有益效应[Pallottini V 等 2008Infect Disord Drug Targets8:52-60 ;Liang YQ 等2002Int J Obes Relat Metab Disord26:1103-9]。发明概述在一个实施方案中，本发明提供a)治疗与高脂肪饮食消费相关的疾患、延缓所述疾患出现、降低所述疾患的发病率或降低所述疾患的严重度的方法；b)预防与高脂肪饮食消费相关的疾患的方法；c)治疗与绝经期后肥胖症相关的疾患、延缓所述疾患出现、降低所述疾患的发病率或降低所述疾患的严重度的方法；d)预防与绝经期后肥胖症相关的疾患的方法；e)增加受试者能量消耗的方法；f)增加瘦体重的方法；g)治疗代谢病症、延缓其出现、降低其发病率或降低其严重度的方法；h)增加肌肉重量的方法；i)治疗脂肪肝疾患、延缓其出现、降低其发病率或降低其严重度的方法；j)预防脂肪肝疾患的方法；和10治 疗非酒精性脂肪肝(NASH)疾患、延缓所述疾患出现、降低所述疾患的发病率或降低所述疾患的严重度的方法；所述方法包括向需要其的受试者施用治疗有效量的雌激素受体_β配体化合物。在一个实施方案中，本发明提供a)治疗与高脂肪饮食消费相关的疾患、延缓所述疾患出现、降低所述疾患的发病率或降低所述疾患的严重度的方法；b)预防与高脂肪饮食消费相关的疾患的方法；c)治疗与绝经期后肥胖症相关的疾患、延缓所述疾患出现、降低所述疾患的发病率或降低所述疾患的严重度的方法；d)预防与绝经期后肥胖症相关的疾患的方法；e)增加受试者能量消耗的方法；f)增加瘦体重的方法；g)治疗代谢病症、延缓其出现、降低其发病率或降低其严重度的方法；h)增加肌肉重量的方法，i)治疗脂肪肝疾患、延缓其出现、降低其发病率或降低其严重度的方法；j)预防脂肪肝疾患的方法；和10治疗非酒精性脂肪肝(NASH)疾患、延缓所述疾患出现、降低所述疾患的发病率或降低所述疾患的严重度的方法；所述方法包括向需要其的受试者施用治疗有效量的本发明化合物。在一个实施方案中，本发明提供治疗与高脂肪饮食消费相关的疾患、延缓所述疾患出现、降低所述疾患的发病率或降低所述疾患的严重度的方法，所述方法包括向需要其的受试者施用治疗有效量的由式XI结构所表示的雌激素受体配体化合物 ^V(R3)PI I I (OR")(Ri)n mmXT其中Rp R2、R3 各自独立地是氢、醛、COOH、-C(=NH)-0H、CHNOH、CH=CHC02H、CH=CHCO2R, _CH=CH2、羟烷基、卤素、羟基、烷氧基、氰基、硝基、CF3> NH2、4-Ph-0Me、4-Ph_0H、SH、COR、COOR、OCOR、烯基、烯丙基、2-甲基烯丙基、炔基、炔丙基、0S02CF3> 0S02CH3> NHR、NHCOR、N(R)2、磺酰胺、SO2R、烷基、环烷基、卤代烷基、芳基、苯基、苄基、被保护的羟基、OCH2CH2NR4R5, Z-Alk-Q, Z-Alk-NR4R5, Z-Alk-杂环或 OCH2CH2-杂环，其中所述杂环是 3-7 元饱和或不饱和、取代或未取代的杂环； R是烷基、环烷基、氢、卤代烷基、二卤代烷基、三卤代烷基、CH2F, CHF2, CF3> CF2CF3^芳基、苯基、苄基、-Ph-CF3、-Ph-CH2F, -Ph-CHF2, -Ph-CF2CF3^ 卤素、烯基、CN、NO2 或 OH ；R’ 是氢、Alk 或 C0R;R"是氢、Alk 或 COR ;R4和R5独立地是氣、苯基、节基、I至6个碳原子的烧基、3至7兀环烧基、杂环烧基、芳基或杂芳基；Z 是 O、NH、CH2 或^Q 是 S03H、CO2H, CO2R, NO2、四唑、SO2NH2 或 SO2NHR ；h 是 0、1、2 或 3;i 是 0、1、2、3 或 4;η 是 1、2、3 或 4;m 是 I 或 2 ;P 是 0、1、2、3、4 或 5 ;且Alk是1-7个碳的直链烷基、1-7个碳的支链烷基或3-8个碳的环烷基；或其异构体、可药用盐、药品、多晶型物、晶体、N-氧化物、酯、水合物或其任意组八
口 ο在一个实施方案中，本发明提供预防与高脂肪饮食消费相关的疾患的方法，所述方法包括向需要其的受试者施用治疗有效量的由本文上面描述的式XI结构所表示的雌激素受体配体化合物或其异构体、可药用盐、药品、多晶型物、晶体、N-氧化物、酯、水合物或其任意组合。在一个实施方案中，本发明提供治疗与绝经期后肥胖症相关的疾患、延缓所述疾患出现、降低所述疾患的发病率或降低所述疾患的严重度的方法、所述方法包括向需要其的受试者施用治疗有效量的由本文上面描述的式XI结构所表示的雌激素受体配体化合物或其异构体、可药用盐、药品、多晶型物、晶体、N-氧化物、酯、水合物或其任意组合。在一个实施方案中，本发明提供预防与绝经期后肥胖症相关的疾患的方法、所述方法包括向需要其的受试者施用治疗有效量的由本文上面描述的式XI结构所表示的雌激素受体配体化合物或其异构体、可药用盐、药品、多晶型物、晶体、N-氧化物、酯、水合物或其任意组合。在一个实施方案中，本发明提供增加受试者能量消耗的方法，所述方法包括向需要其的受试者施用治疗有效量的本文上面描述的式XI化合物或其异构体、可药用盐、药品、多晶型物、晶体、N-氧化物、酯、水合物或其任意组合。在一个实施方案中，本发明提供增加瘦体重的方法，所述方法包括向需要其的受试者施用治疗有效量的本文上面描述的式XI化合物或其异构体、可药用盐、药品、多晶型物、晶体、N-氧化物、酯、水合物或其任意组合。在一个实施方案中，本发明提供治疗代谢病症、预防延缓其出现、降低其发病率或降低其严重度的方法，所述方法包括向需要其的受试者施用治疗有效量的由本文上面描述的式XI结构所表示的雌激素受体配体化合物或其异构体、可药用盐、药品、多晶型物、晶体、N-氧化物、酯、水合物或其任意组合。在一个实施方案中，本发明提供增加肌肉重量的方法，所述方法包括向需要其的受试者施用治疗有效量的本文上面描述的式XI化合物或其异构体、可药用盐、药品、多晶型物、晶体、N-氧化物、酯、水合物或其任意组合。在一个实施方案中，本发明提供治疗脂肪肝疾患、延缓其出现、降低其发病率或降低其严重度的方法，所述方法包括向需要其的受试者施用治疗有效量的本文上面描述的式XI化合物或其异构体、可药用盐、药品、多晶型物、晶体、N-氧化物、酯、水合物或其任意组
口 ο在一个实施方案中，本发明提供预防脂肪肝疾患的方法，所述方法包括向需要其 的受试者施用治疗有效量的本文上面描述的式XI化合物或其异构体、可药用盐、药品、多晶型物、晶体、N-氧化物、酯、水合物或其任意组合。在一个实施方案中，本发明提供治疗、预防非酒精性脂肪肝、延缓其出现或降低其发病率的方法，所述方法包括向需要其的受试者施用治疗有效量的本文上面描述的式XI化合物或其异构体、可药用盐、药品、多晶型物、晶体、N-氧化物、酯、水合物或其任意组合。在一个实施方案中，本发明提供选择性雌激素受体配体化合物，其中所述化合物是4-氰基-6，8- 二羟基-2-(4-羟苯基)异喹啉-I (2H)-酮或其异构体、可药用盐、药品、多晶型物、晶体、N-氧化物、酯、水合物或其任意组合。在一个实施方案中，本发明提供选择性雌激素受体配体化合物，其中所述化合物是4-氰基-6，8- 二羟基-2-(4-羟苯基)异喹啉-I (2H)-酮或其异构体、可药用盐、药品、多晶型物、晶体、N-氧化物、酯、水合物或其任意组合。在一个实施方案中，本发明提供选择性雌激素受体配体化合物，其中所述化合物是4-溴-6，8- 二羟基-2-(4-羟苯基)异喹啉-I (2H)-酮或其异构体、可药用盐、药品、多晶型物、晶体、N-氧化物、酯、水合物或其任意组合。附图简述图 I 描述了 12b(A)、12f(B)、12h(C)、12p(D)、12s(E)、12u(F)、12y(G)、12z(H)和雌二醇(最后一个方框)与ER-α (虚线)和ER-β (实线)的结合常数。图2 描述了 ER-α 和 ER-β 在 O. I、I、10、100 和 IOOOnM 剂量下受 121 激活。图3描述了 ER-β选择性SERM的体外和体内表征。(A) 14m和12u的结构。(B)ER-β SERM、14m和12u的结合和反式激活特征配体结合测定(第2_6列)和反式激活测定(第7-8列)。(C) 14m和12u弱诱导Ishikawa细胞增殖。⑶14m和12u不增加子宫重量。数据以平均土S.E.表示。RBA-相对结合亲和性；ER-α -雌激素受体a ;ER_i3_雌激素受体β ；s. c.-皮下。图4描述了 14m对饮食诱发的肥胖症的影响。(A)两周一次体重。(B)喂养消费。小图A的下面一张显示分别接受媒介物和14m的高脂肪饮食喂养的动物的体重的差异百分t匕。小图A插页显示H.F.和正常饮食的代表性小鼠。值以平均土S.E.表示。H.F.-高脂肪；N. D.-正常饮食；B. Wt-体重；*-p〈0. 05的显著性，来自正常饮食喂养的媒介物治疗的动物；#-p〈0. 05的显著性，来自高脂肪饮食喂养的媒介物治疗的动物。
图5描述了 14m和12u对高脂肪饮食诱发的肥胖症的影响。(A)表示成与第O天的体重差异的两周一次体重。(B) 14m和12u降低脂肪量(最上面的小图)并且增加肌肉量(最下面的小图)。数据以体重的脂肪和瘦体重百分比表示。N. D.-正常饮食；H. F.-高脂肪饮食；*-p〈0. 05的显著性，来自正常饮食喂养的媒介物治疗的动物；#-p〈0. 05的显著性，来自高脂肪饮食喂养的媒介物治疗的动物。图6描述了 14m对脂肪量和代谢疾病标志物减少的影响。⑷示出14m对体脂肪(左小图)和骨矿物质含量(BMC，右小图)的影响。体脂肪含量以体重的脂肪百分比表示。(B)、(C)、(E)和(F)示出14m对代谢疾病标志物的影响白脂肪组织(WAT ;小图B);胆固醇(小图C);瘦素(小图E);和炎症标志物MIP-I β(小图F)。⑶示出14m对葡萄糖耐量试验后的血清葡萄糖水平的影响。图7描述了研究完成后，小鼠的研究完成时的白脂肪组织(WAT)重量、褐色脂肪组织(BAT)重量和腓肠肌(GASTR0C)重量。与正常饮食相比，维持高脂肪饮食显著增加了 WAT的重量并且减少了腓肠肌的重量。与媒介物处理的组相比，高脂肪饮食喂养的组中14m和 12u防止WAT重量的增加并且增加了腓肠肌肌肉重量。(*来自正常饮食+媒介物的显著性，#来自高脂肪饮食+媒介物的显著性)。图8描述了代表性肝切片，获自正常饮食喂养的小鼠、用高脂肪饮食喂养且用媒介物治疗的小鼠以及用高脂肪饮食喂养且用14m治疗的小鼠。14m的施用使脂滴在肝中的积聚减少。(实施例23. 7)。N. D.-正常饮食；H. F.-高脂肪饮食。图9描述了研究完成后的小鼠睾丸重量(小图A)、血清睾酮(T)水平(小图B)和血清促卵泡激素(FSH)水平(小图C)(实施例23. 8)。在处死后立即测定水平。14m和12u不影响血清睾酮水平。14m不影响血清睾酮和促卵泡激素(FSH)水平。治疗12周后，临处死之前测定总睾酮和FSH的血清水平。14m不抑制这些内分泌激素，表明其作用不是通过ERa介导的。


图10描述了 12u对治疗高脂肪饮食诱发的肥胖症的影响。㈧两周一次体重。(B)脂肪量。N. D.-正常饮食。(C) WAT、BAT、肝重。H. F.-高脂肪饮食;*-ρ〈0· 05的显著性，来自正常饮食喂养的媒介物治疗的动物；#-ρ〈0. 05的显著性，来自高脂肪饮食喂养的媒介物治疗的动物。
图11描述了 12u对切除卵巢的小鼠的身体成分变化的影响。(A)两周一次体重⑶喂养消费(C)脂肪量(左小图)和瘦体重(右小图)。(D)白脂肪组织(WAT)和子宫重量。OVX-卵巢切除术；*-p〈0. 05的显著性，来自正常饮食喂养的媒介物治疗的动物；#-p<0. 05的显著性，来自高脂肪饮食喂养的媒介物治疗的动物。
图12描述了 ER-β配体通过配体结合域(LBD)对PPAR-Y功能的影响。(A).HEK-293细胞用O. 25 μ g PPRE_LUC、5ng CMV-海肾LUC和所示受体(对于左小图为PPAR-Y和ER-β ;对于右小图为PPAR-a和ER-β)转染。在转染24小时后细胞用所示配体处理并且在转染后48小时收获细胞,然后测量萤火虫荧光素酶活性并对海肾荧光素酶归一化。(B).ER-i3 LBD中的H475对其功能是重要的。使用定向诱变试剂盒将ER-β LBD中的Η475突变成丙氨酸(A)。如小图A所述在ΗΕΚ-293细胞中用野生型ER-β配体或ER-β Η475Α的滴定进行反式激活测定。(C). ER-β Η475Α不抑制PPAR-Y反式激活。HEK-293细胞用O. 25 μ g PPRE-LUC、5ng CMV-海肾 LUC 和 50ng 所示受体(PPAR- Y 或 PPAR- Y 和野生型ER-β或PPAR-Y和ER-β H475A)转染。在转染24小时后细胞用所示配体处理并且在转染后48小时收获细胞,然后测量萤火虫荧光素酶活性并对海肾荧光素酶归一化。(D).ER-β配体独立地抑制PGC-I共激活的PPAR-Y但不是PPAR-α反式激活。！fepG2细胞用O. 25 μ g PPRE-LUC、5ng CMV-海肾LUC、O. 5 μ gPGC-1或载体主链和IOOng所示受体(对于最上小图为PPAR-Y或PPAR-Y和野生型ER-β或PPAR-Y和ER-β H475A ;对于最下小图为PPAR- α或PPAR- α和ER- β )转染。在转染24小时后细胞用所示配体处理并且在转染后48小时收获细胞，然后测量萤火虫荧光素酶活性并对海肾荧光素酶归一化。(E). SHP-I是ER-β特异性靶基因。ΗΕΚ-293细胞用O. 25 μ g SHP_LUC、5ng CMV-海肾LUC和50ng所示受体(对于左小图为FXR和ER-a ;对于右小图为FXR和ER-β )转染。在转染24小时后细胞用所示配体处理并且在转染后48小时收获细胞，然后测量萤火虫荧光素酶活性并对海肾荧光素酶归一化。PPAR-过氧化物酶体增殖子和活化受体；ER-雌激素受体；H-组氨酸;A-丙氨酸；RLU-相对荧光素酶活性单位；Τι·ο-曲格列酮；PGC-1-PPAR-Y共激活剂；SHP-小异二聚体伴侣；FXR-法尼醇X受体.
图13描述了 12y(
图13A)和12u(
图13B)对附着在内皮细胞上的巨噬细胞的影 响。
图14描述了 12b对角叉菜胶诱发的浮肿体积(即角叉菜胶诱发的未处理的爪浮肿作为急性炎症模型)的影响。
图15描述了测量本发明的NRBA引起的快速(非基因组的)主动脉环松弛的治疗方案。
图16描述了如
图15中14m、12u和12y生成的浓度-响应曲线。
图17描述了用于测量去氧肾上腺素(PE)引起的去氧肾上腺素主动脉环收缩的剂量响应影响减弱的响应治疗方案。
图18描述了如
图17中12y、12z和141生成的浓度-响应曲线。
图19描述了测量本发明的NRBA对主动脉环长期孵育的影响的方案，以及141的示例图。图20描述了(A) ER- β配体141对RASMC增殖的抑制。细胞增殖使用WST-I量热测定进行估算。测量450nm处的吸光度并表示为在第O天(GO)仅含有细胞的对照孔的吸收度百分比。(B)胞内ROS的荧光检测。ARPE-19细胞的亚汇合单层在存在或不存在ICI下用相应药物预处理，之后暴露于tBH的氧化性应激。从原始荧光数据减去仅用染料处理的细胞的值。在单独氧化剂存在下相对于含有染料的细胞报告荧光。每种药物治疗以一式二份进打且以+/_s. e. m.标绘。图21描述了 12b和12u对LNCaP (前列腺癌)细胞增殖的影响。图22描述了 12b和12u对C-26 (结肠癌)细胞增殖的影响。图23描述了 10、14和21天后，12b和12u对LNCaP-基质细胞异种移植肿瘤生长的影响。图24描述了 12u和14m对非酒精性脂肪肝(NASH)的标志物的影响；12u和14m减少了高脂肪饮食诱发的血清转氨酶释放。发明详述在一个实施方案中，NRBA是指影响雌激素受体活性的化合物。在一个实施方案中，NRBA显示作为雌激素受体激动剂的活性，或在另一个实施方案中，显示作为雌激素受体拮抗剂的活性，或在另一个实施方案中，显示作为雌激素受体部分激动剂的活性，或在另一个实施方案中，显示作为雌激素受体部分拮抗剂的活性。在一些实施方案中，NRBA是雌激素受体配体化合物。在一个实施方案中，雌激素受体配体化合物是选择性雌激素受体调节剂(SERM)。在一个实施方案中，雌激素受体配体化合物是选择性雌激素受体β调节剂(β-SERM或ER-β SERM或ER-β选择性SERM)。在一个实施方案中，雌激素受体配体化合物是雌激素受体激动剂。在一个实施方案中，雌激素受体配体化合物是雌激素受体β (ER-β)激动剂。在一个实施方案中，雌激素受体配体化合物是雌激素受体β (ER-β)拮抗剂。在一个实施方案中，雌激素受体配体化合物对ER-β具有选择性。在一个实施方案中，雌激素受体配体化合物不与ER-α交叉反应。在一个实施方案中，雌激素受体配体化合物不与至多ΙΟμΜ浓度的ER-α交叉反应。在一个实施方案中，雌激素受体配体化合 物不与至多I μ M浓度的ER-α交叉反应。在一个实施方案中，雌激素受体配体化合物结合ER-β的选择性为结合ER-a的选择性的至少5倍。在一个实施方案中，雌激素受体配体化合物结合ER-β的选择性为结合ER-a的选择性的至少10倍。在一个实施方案中，雌激素受体配体化合物结合ER-β的选择性为结合ER-α的选择性的至少50倍。在一个实施方案中，雌激素受体配体化合物结合ER-β的选择性为结合ER-α的选择性的至少100倍。在一个实施方案中，雌激素受体配体化合物是β -SERM激动剂。在一个实施方案中，雌激素受体配体化合物充当ER-β的激动剂。在一个实施方案中，雌激素受体配体化合物充当ER-β的拮抗剂。在一个实施方案中，雌激素受体配体化合物充当ER-a的激动剂。在一个实施方案中，雌激素受体配体化合物充当ER-a的拮抗剂。在一个实施方案中，雌激素受体配体化合物充当ER-β和ER-a两者的激动剂。在一个实施方案中，雌激素受体配体化合物充当ER-β和ER-a两者的激动剂的选择性为充当ER-β的激动剂的选择性的至少5倍。在一个实施方案中，雌激素受体配体化合物充当ER-β和ER-α两者的激动剂的选择性为充当ER-β的激动剂的选择性的至少10倍。在一个实施方案中，雌激素受体配体化合物充当ER-β和ER-a两者的激动剂的选择性为充当ER- β的激动剂的选择性的20-30倍并且EC5tl低于ΙΟηΜ。在一个实施方案中，NRBA以组织依赖性方式施加其对雌激素受体(例如，ER- a、ER-β或ERR)的影响。在一些实施方案中，本发明的NRBA可在某些组织(例如，骨、脑和/或心)中作为雌激素受体激动剂起作用，并且在其它组织类型例如乳房和/或子宫内膜(uterine lining)中作为拮抗剂起作用。在一个实施方案中，使用本领域已知的ERa和/或ERP反式激活测定法或者在其它实施方案中使用本文所述测定法测定时，本发明的NRBA对ER α和/或ERP会具有至多约10 μ M的IC5tl或EC5(i。在一些实施方案中，NRBA显示约5 μ M或低于约5 μ M的EC5tl或IC50值(分别作为激动剂或拮抗剂)。已发现本发明的代表性化合物对雌激素受体显示激动剂或拮抗剂活性。在于ERa和/或ERi3反式激活测定法中测定时，在一些实施方案中本发明化合物对ERa和/或ERi3显示约5 μ M或低于约5 μ M的拮抗剂或激动剂IC5tl或EC5tl，或在一些实施方案中，至多约500ηΜ，或在其它实施方案中，至多约50ηΜ，或在其它实施方案中，至多约ΙΟηΜ，或在其它实施方案中，至多约InM。
在一些实施方案中，术语“IC5tl”是指使靶(例如，ERa或ERP )活性降至最高水平的一半的NRBA浓度。在一些实施方案中，术语“EC5(I”是指产生最大效应的一半的NRBA浓度。在本发明的一些实施方案中，本发明化合物是双酚试剂。在本发明的一些实施方案中，本发明化合物是单酚试剂或非酚试剂。在本发明的一些实施方案中，本发明化合物是被取代的异喹啉。在本发明的一些实施方案中，本发明化合物是被取代的异喹啉酮。在本发明的一些实施方案中，本发明化合物是被取代的二氢异喹啉酮。在本发明的一些实施方案中，NRBA具有对ER-β的选择性。在本发明的一些实施方案中，NRBA是ER-β的激动剂。在本发明的一些实施方案中，NRBA是ER-β的部分激动剂。在本发明的一些实施方案中，NRBA是ER-β的拮抗剂。在本发明的一些实施方案中，NRBA具有抗氧化剂活性。在一些实施方案中，抗氧化剂活性与核受体结合活性无关。在一些实施方案中，本发明的NRBA在细胞中显示非基因组信号传导。在一些实施方案中，本发明的NRBA显示线粒体信号传导。
·
在一个实施方案中，本发明提供NRBA或其前药、类似物、异构体、代谢物、衍生物、可药用盐、药品、多晶型物、晶体、不纯物、N-氧化物、酯、水合物或其任意组合，其由式I结构表不
X

片〇、八Jk a
(R1)n (R2)m
I其中A是5-14元饱和或不饱和、取代或未取代的碳环或杂环(所述碳环或杂环任选地是稠环系统)或其组合；其中所述饱和或不饱和的碳环或杂环任选地被I至5个独立地选自以下的取代基取代=R3或0R” ；且X是O或S ;或A不存在，N与环碳形成双键且X是OH或OCH2CH2-杂环，其中所述杂环是3_7元饱和或不饱和的取代或未取代的杂环；R!、R2 和 R3 独立地是氢、醛、COOH、-C(=NH)-0H、CHNOH、CH=CHC02H、CH=CHCO2R, -CH=CH2j5烷基、卤素、羟基、烷氧基、氰基、硝基、CF3> NH2、4-Ph-0Me、4-Ph_0HSH、COR、COOR、OCOR、烯基、烯丙基、2-甲基烯丙基、炔基、炔丙基、0S02CF3> 0S02CH3> NHR、NHCOR、N(R)2JII酰胺、S02R、烷基、卤代烷基、芳基、苯基、苄基、被保护的羟基、OCH2CH2NR4R5,Z-Alk-Q,Z-Alk-NR4R5,Z-Alk-杂环或OCH2CH2-杂环，其中所述杂环是3_7元饱和或不饱和、取代或未取代的杂环；R是烷基、氢、卤代烷基、二卤代烷基、三卤代烷基、CH2F、CHF2、CF3、CF2CF3、芳基、杂芳基、苯基、苄基、-Ph-CF3、-Ph-CH2F, -Ph-CHF2, -Ph-CF2CF3^ 卤素、烯基、CN、NO2 或 OH ；R’ 是氢、Alk 或 C0R;
R’’ 是氢、Alk 或 COR;R4和R5独立地是氣、苯基、节基、I至6个碳原子的烧基、3至7兀环烧基、杂环烧基、芳基或杂芳基；Z 是 O、NH、CH2 或^Q 是 S03H、CO2H, CO2R, NO2、四唑、SO2NH2 或 SO2NHR ；η是1-3的整数；m是1-2的整数；且Alk是1-7个碳的直链烷基、1-7个碳的支链烷基或3至8个碳的环烷基。
在一些实施方案中，式I的NRBA是雌激素受体配体化合物。在一个实施方案中，雌激素受体配体化合物是选择性雌激素受体调节剂(SERM)。在一个实施方案中，雌激素受体配体化合物是选择性雌激素受体β调节剂(β-SERM)。在一个实施方案中，雌激素受体配体化合物是雌激素受体激动剂。在一个实施方案中，雌激素受体配体化合物是雌激素受体β (ERP)激动剂。在一个实施方案中，雌激素受体配体化合物是雌激素受体β (ER3)拮抗剂。在一个实施方案中，NRBA由式I的结构表示


本发明涉及用于预防和/或治疗代谢病症、绝经期后肥胖症和与高脂肪饮食消费相关的疾患(包括肥胖症、体重增长、脂肪量形成、骨矿物质含量下降、白脂肪组织重量增长、增加的胆固醇水平、增加的瘦素水平、胰岛素抗性、II型糖尿病、增加的血糖水平、炎性疾病、心血管疾病、脂肪肝疾患(脂肪在肝中的积聚)、减少的解偶联蛋白-1(UCP-1)水平和增加的脂肪生成)的方法。