专利名称:启动子miR390及其应用的制作方法启动子按其作用方式和功能可以分为三类组成型启动子、诱导型启动子和组织特异性启动子。组成型启动子在所有组织中都能启动表达,有表达的持续性,没有时空特异性,如CaMV35S启动子等。该类启动子得到了大量研究和应用,在基因工程中发挥重要作用。但由于其表达不分时空,会导致外缘基因表达的过量积累,会影响植物正常的生长发育。因此,寻找诱导型或组织特异性的启动子,对于基因功能研究和转基因育种都具有重要作用。
本发明的一个目的是提供一种具有组织特异启动子功能的DNA片段。本发明所提供的DNA片段,为如下1)、2)或3)所示1)序列表中序列1所示的DNA片段;2)在严格条件下与1)限定的DNA序列杂交且具有相同功能的DNA片段;3)与1)限定的DNA序列具有90%以上的同源性且具有相同功能的DNA片段。扩增上述DNA片段全长或其任意片段的引物对也属于本发明的保护范围。所述引物对中,一条引物序列如序列表中序列2所示,另一条引物序列如序列表中序列3所示。含有上述DNA片段的重组载体、重组菌、转基因细胞系或表达盒也属于本发明的保护范围。上述DNA片段在启动目的基因在植物的根冠中表达中的应用也属于本发明的保护范围。上述应用中,所述植物为单子叶植物;所述单子叶植物为水稻。上述DNA片段在作为启动子中的应用也属于本发明的保护范围。上述DNA片段在植物的遗传育种中的应用也属于本发明的保护范围。实验证明,本发明的miR390DNA片段是一启动子,且该启动子有很强的特异表达活性,该启动子在单子叶植物水稻根冠特异表达。本发明启动子为特异表达的基因功能研究和植物的转基因育种提供了有利工具,具有重要意义。图1为PCR扩增得到miR390的启动子。图2为表达载体的酶切鉴定。图3为PmiR390_1391载体示意图。图4为转基因水稻的PCR鉴定。3图5为miRNA390启动子在根中的⑶S活性。
本发明公开了启动子miR390及其应用。该启动子是如下1)、2)或3)所示DNA片段1)序列表中序列1所示的DNA片段;2)在严格条件下与1)限定的DNA序列杂交且具有相同功能的DNA片段;3)与1)限定的DNA序列具有90%以上的同源性且具有相同功能的DNA片段。实验证明,本发明的miR390DNA片段是一启动子,且该启动子有很强的特异表达活性,特异的在植物的根冠处表达。本发明启动子为特异表达的基因功能研究和植物的转基因育种提供了有利工具,具有重要意义。
启动子miR390及其应用制作方法
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