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二酮哌嗪类化合物及其制备方法和用途

  • 专利名称
    二酮哌嗪类化合物及其制备方法和用途
  • 发明者
    何山, 严小军, 顾斌斌, 丁立建
  • 公开日
    2014年9月10日
  • 申请日期
    2014年5月20日
  • 优先权日
    2014年5月20日
  • 申请人
    宁波大学
  • 文档编号
    A61P35/00GK104031051SQ201410213098
  • 关键字
  • 权利要求
    1.一种二酮哌嗪类化合物,其特征在于其结构有两个苯丙氨酸缩合而成,并有苯环部分双键的水解和乙酰化,具体结构如化合物I和2所示, (1)化合物I 2.—种权利要求1所述的二酮哌嗪类化合物的制备方法,其特征在于具体包括如下步骤 (O发酵生产 将球孢枝孢菌iCladosporiumsphaerospermum,保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号是CCTCC NO M 2014098)划线接种到含有2216-E固体培养基的平板上,于28°C培养箱中培养活化I天后,将活化的单克隆菌落接种到装有2216-E液体培养基的装液量为40%的三角锥形瓶中发酵培养,在温度为28°C,摇床转速为150 r/min的条件下发酵8天,获取发酵液; (2)浸膏的获得 将发酵液用离心机离心去除菌体,获取发酵上清液,然后用活化的大孔树脂吸附过滤发酵上清液,接着用80%乙醇对其洗脱,最后用旋转蒸发仪蒸干洗脱液,获取粗浸膏; (3)化合物的分离精制 a.将正己烷、乙酸乙酯、甲醇和纯水按体积比1111的比例混合后作为高速逆流色谱仪(HSCCC)的第一两相体系,将正己烷、乙酸乙酯、甲醇和纯水按体积比2121的比例混合后作为高速逆流色谱仪(HSCCC)的第二两相体系; b.取300毫克粗浸膏溶于6毫升第一两相体系中,离心获取上清液,然后在HSCCC梯度洗脱模式下先在第一两相体系的下相的洗脱下获取化合物I (14.3毫克),接着在第二两相体系的下相的洗脱下获取化合物2 (25.4毫克),化合物结构如下所示,(I)化合物I 3.根据权利要求2所述的一种二酮哌嗪类化合物的制备方法,其特征在于所述的2216-E固体培养基的配制方法如下将蛋白胨0.5g,酵母膏0.lg,硫酸铁0.01g,固体琼脂2g,溶于10ml海水中,调PH值至7.24.根据权利要求2所述的一种二酮哌嗪类化合物的制备方法,其特征在于所述的2216-E液体培养基的配制方法如下将蛋白胨5g,酵母膏lg,硫酸铁0.lg,溶于100ml海水中,调PH值至7.25.权利要求1所述的二酮哌嗪类化合物1、2在制备抗肿瘤药物中的用途6.根据权利要求5所述的用途,其特征在于所述的抗肿瘤药物是指所述的酮哌嗪类化合物1、2在制备抑制肿瘤细胞增殖抑制剂或肿瘤细胞杀伤剂中的用途
  • 技术领域
    [0001]本发明涉及一种二酮哌嗪类化合物,尤其是涉及一种用球孢枝孢菌制备二酮哌嗪类化合物的方法以及该类化合物在制备细胞增殖抑制剂或抗肿瘤剂中的用途
  • 专利摘要
    本发明公开了二酮哌嗪类化合物及其制备方法和用途,其结构特点是有两个苯丙氨酸缩合而成,并有苯环部分双键的水解和乙酰化,具体结构如化合物1和2所示,其制备步骤如下1)将球孢枝孢菌保藏号CCTCC?NOM2014098划线接种到2216-E固体培养基上,于28℃培养箱中培养活化1天后接种到2216-E液体培养基中在温度为28℃,摇床转速为150r/min的条件下发酵8天获取发酵液;2)将发酵液用离心机离心去除菌体,用活化的大孔树脂吸附过滤发酵上清液后用乙醇洗脱后,蒸干洗脱液获取粗浸膏;3)将粗浸膏经HSCCC分离纯化得到化合物1和2,优点是具有细胞增殖抑制以及直接杀伤癌细胞等抗肿瘤活性。
  • 发明内容
  • 专利说明
    二酮哌嗪类化合物及其制备方法和用途
  • 专利详情
  • 全文pdf
  • 权力要求
  • 说明书
  • 法律状态
二酮哌嗪类化合物及其制备方法和用途[0002]二酮哌嗪类化合物(Diketopiperazines, DKPs)的基本结构是由2个氨基酸缩合而成的环二肽(DKP),因其骨架具有稳定的六元环结构,且有2个氢键给体和2个氢键受体,使得DKPs在药物化学中成为一个重要的药效团,且它们的研究也为多肽化学方向研究奠定了基础。目前已经发现许多有活性的DKP。如Ambewelamide A、AmbewelamideB、phenylahistin 和 verticillin A 具有抗肿瘤活性(参见文献如 Chu M, TruumeesI, Rothofsky ML, Patel MG, Gentile F,Das PR, Puar MS, Lin SL(1995) Inhibit1n ofc-fos proto-oncogene induct1n by Sch52900and Sch52901, novel diketopiperazinesproduced by Gl1cladium sp.J Antib1t (Tokyo) 48:1440-1445 ;如 Kanoh K, Kohno S,Katada J, Hayashi Y, Muramatsu M, Uno I (1999a) Anti tumor activity of phenylahistin invitro and in viv0.B1sci B1technol B1chem63:1130-1133 ;Kanoh K, Kohno S, KatadaJ, Takahashi J, Uno I (1999b) (-)-等;)Gl1toxin 和 sirodesmin PL 具有抗菌、抗病毒和免疫抑制活性(参见文献如 Sutton P, Newcombe NR, Waring P, Miillbacher A(1994)In vivo immunosuppressive activity of gl1toxin, a metabolite produced by humanpathogenic fung1.1nfect Tmmun62:1192-1198 ; 如 Sutton P, Waring P, Mil llbacherA(1996)Exacerbat1n of invasive aspergillosis by the immunosuppressive fungalmetabolite, gl1toxin.Tmmunol Cell B1l74:318-322 ;ffaring P, Beaver J(1996)Gl1toxin and related epipolyth1d1xopiperazines.Gen Pharmaco127:1311-1316)等。[0003]该类化合物是一类较常见的真菌代谢产物,其结构特点是都是有两个氨基酸酰胺化环合衍生而得。本发明人研究发现球孢枝孢菌Cladosporiumsphaerospermum液体发酵产物经超声破碎后的粗提物有很好的细胞坏死活性,遂对其活性成分进行了研究,结果发现了三个含硫二酮哌嗪类化合物具有抗肿瘤活性,目前尚未见对该化合物的化学结构及细胞增殖抑制活性的报道,因此市场上也尚未见有与此相关的药物。
[0004]本发明所要解决的技术问题是提供一种结构独特的具有细胞增殖抑制以及直接杀伤癌细胞等抗肿瘤活性的二酮哌嗪类化合物及其制备方法和用途。[0005]本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为:一种二酮哌嗪类化合物,其结构有两个苯丙氨酸缩合而成,并有苯环部分双键的水解和乙酰化,具体结构如化合物I和2所示,[0006](I)化合物 I[0007]

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