新颖的n－苄基哌嗪化合物、它们的制备方法和含有它们的药物组合物制作方法

S·拉比达勒, J－P·蒂耶芒, B·特斯塔, R·切凯利, A·勒里丹, C·阿尔佩, M·斯佩丁, E·申克尔

2003年2月19日

2002年7月16日

2001年7月16日

瑟维尔实验室

A61P25/28GK1397554SQ0212418

哌嗪 苄基 新颖 化合物 它们

1.式(I)化合物 其中R1代表直链或支链(C1-C6)烷基，R2代表羟基、直链或支链(C1-C6)烷氧基或氨基(可选地被一个或两个直链或支链(C1-C6)烷基取代)，n代表1至12的整数，含1和12，R3代表-氢原子，-直链或支链(C1-C12)烷基，可选地被苯基(本身可选地被一个或多个相同或不同的取代基取代，取代基选自卤原子和直链或支链(C1-C6)烷基、直链或支链(C1-C6)烷氧基、羟基和三卤代甲基)、(C3-C7)环烷基、羧基或(C1-C6)烷氧基-羰基取代，-(C3-C7)环烷基，-嘧啶基，可选地被一个或两个吡咯烷基取代，或-苯基，可选地被一个或多个相同或不同的取代基取代，取代基选自卤原子和直链或支链(C1-C6)烷基、直链或支链(C1-C6)烷氧基、羟基和三卤代甲基，其旋光异构体及其与可药用酸或碱的加成盐2.根据权利要求1的式(I)化合物，其中R1代表甲基3.根据权利要求1的式(I)化合物，其中R3是被苯基取代的烷基，优选苄基，嘧啶基、优选被甲氧基取代的苯基或氢原子4.根据权利要求1的式(I)化合物，其中n是1至7的整数5.根据权利要求4的式(I)化合物，其中n是66.根据权利要求1的式(I)化合物，其中R2代表羟基7.根据权利要求1的式(I)化合物，它是7-{6-[(4-苄基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}庚酸及其加成盐8.根据权利要求1的式(I)化合物，它是7-{6-{[4-(嘧啶-2-基)-1-哌嗪基]甲基}-2，3-二甲氧基苯氧基}庚酸、4-{6-[(哌嗪-1-基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}丁酸、7-{6-[(4-(2-甲氧基苯基)-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}庚酸、4-{6-[(4-(2-甲氧基苯基)-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}丁酸及其加成盐9.制备根据权利要求1的式(I)化合物的方法，其特征在于使用式(II)化合物作为原料 其中R1是如式(I)所定义的，使式(II)化合物在甲醛的存在下与式(III)的取代哌嗪反应 其中R’3是如R3所定义的，被羧基取代的烷基除外，得到式(IV)化合物 其中R1和R’3是如上所定义的，使式(IV)化合物与式(V)化合物反应X-(CH2)n-COR’2(V)其中X代表卤原子，R’2代表直链或支链(C1-C6)烷氧基，得到式(I/a)化合物一式(I)化合物的特例 其中R1、R’2、R’3和n是如上所定义的，如果需要的话，将该式(I/a)化合物转化为-对应的式(I/b)一元或二元酸-式(I)化合物的特例 -或对应的式(I/c)酰胺 其中R1、R3和n是如式(I)所定义的，R”2代表可选被一个或两个直链或支链(C1-C6)烷基取代的氨基，将该式(I/a)、(I/b)和(I/c)化合物如果必要的话，按照常规的纯化工艺纯化，合适的话分离成它们的异构体，且如果需要的话，转化为与可药用酸或碱的加成盐10.药物组合物，包含根据权利要求1至8中任一项的化合物作为活性成分以及一种或多种惰性无毒的可药用赋形剂或载体11.根据权利要求10的组合物，包含一种根据权利要求1至8中任一项的活性成分，用于在任意需要临时中断血液循环的手术干预之前，预防或治疗急性与慢性细胞缺血、急性或慢性脑、心或外周缺血意外，无论随后发生再灌注与否；用于治疗慢性神经变性疾病；和用于改善待移植器官的贮藏和再灌注后移植物的功能恢复

本发明涉及新颖的N-苄基哌嗪化合物、它们的制备方法和含有它们的药物组合物现有技术例如阐述如下-法国专利说明书1 302 958和805 M分别涉及N-三烷氧基苄基哌嗪的制备和2，3，4-三甲氧基苄基哌嗪作为具有血管舒张活性的药物的用途，-Hiroshi Ohtaka等，Chem.Pharm.Bull.(化学与药学通报)，35，2774-3275(1987)和Chem.Pharm.Bull.(化学与药学通报)，37，11，2124-3122(1989)的文章提到具有血管舒张活性的曲美他嗪化合物和1-[双(4-氟苯基)甲基]-4-(2-羟基-3，4-二甲氧基苄基)哌嗪的合成，-Tsuneo Kawashima等，J.Pharmacobio-Dyn，14，449-459(1991)的文章涉及KB-2796的新代谢产物的分离和鉴别，包括1-[双(4-氟苯基)甲基]-4-(2-羟基-3，4-二甲氧基苄基)哌嗪，-欧洲专利说明书EP 533 579描述N-苄基哌嗪化合物具有抗缺氧和抗缺血活性，-最后，欧洲专利说明书EP 617 027描述N-苄基哌嗪化合物用于治疗由氧化代谢机能障碍引起的神经元疾病除了是新颖的以外，本发明化合物还具有尤其创新的药理活性和尤其创新的治疗性质它们尤其能够保护线粒体免受低氧的应激反应，维持缺氧的器官内的ATP合成，例如保护置于缺血情形下的离体心脏最后，有些能够穿过血脑屏障这些性质因此使它们可用于在任意需要局部或全身(止血带、钳)地临时中断血液循环的手术干预之前，预防或治疗急性与慢性细胞缺血、急性或慢性脑、心或外周缺血意外，无论随后发生再灌注与否；用于治疗慢性神经变性疾病(例如老年性痴呆、潜伏或既定的阿尔茨海默氏病、脑老化、肌萎缩性侧索硬化、多发性硬化或帕金森氏病)；和用于改善待移植器官的贮藏和再灌注后移植物的功能恢复本发明化合物还具有显著高于已经描述过的相似结构化合物的代谢稳定性，因而提供更好的生物利用度本发明尤其涉及式(I)化合物 其中R1代表直链或支链(C1-C6)烷基，R2代表羟基、直链或支链(C1-C6)烷氧基或氨基(可选地被一个或两个直链或支链(C1-C6)烷基取代)，n代表1至12的整数，含1和12，R3代表-氢原子，-直链或支链(C1-C12)烷基，可选地被苯基(本身可选地被一个或多个相同或不同的取代基取代，取代基选自卤原子和直链或支链(C1-C6)烷基、直链或支链(C1-C6)烷氧基、羟基和三卤代甲基)、(C3-C7)环烷基、羧基或(C1-C6)烷氧基-羰基取代，-(C3-C7)环烷基，-嘧啶基，可选地被一个或两个吡咯烷基取代，或-苯基，可选地被一个或多个相同或不同的取代基取代，取代基选自卤原子和直链或支链(C1-C6)烷基、直链或支链(C1-C6)烷氧基、羟基和三卤代甲基，其旋光异构体及其与可药用酸或碱的加成盐在可药用酸中，可以作为非限制性实例提到盐酸、氢溴酸、硫酸、膦酸、乙酸、三氟乙酸、乳酸、丙酮酸、丙二酸、琥珀酸、戊二酸、富马酸、酒石酸、马来酸、柠檬酸、抗坏血酸、草酸、甲磺酸、樟脑酸等在可药用碱中，可以作为非限制性实例提到氢氧化钠、氢氧化钾、三乙胺、叔丁胺等本发明还涉及式(I)化合物的制备方法，其特征在于使用式(II)化合物作为原料 其中R1是如式(I)所定义的，使式(II)化合物在甲醛的存在下与式(III)的取代哌嗪反应 其中R’3是如R3所定义的，被羧基取代的烷基除外，得到式(IV)化合物 其中R1和R’3是如上所定义的，使式(IV)化合物与式(V)化合物反应X-(CH2)n-COR’2(V)其中X代表卤原子，R’2代表直链或支链(C1-C6)烷氧基，得到式(I/a)化合物-式(I)化合物的特例 其中R1、R’2、R’3和n是如上所定义的，如果需要的话，将该式(I/a)化合物转化为-对应的式(I/b)一元或二元酸-式(I)化合物的特例 -或对应的式(I/c)酰胺 其中R1、R3和n是如式(I)所定义的，R”2代表可选被一个或两个直链或支链(C1-C6)烷基取代的氨基，将该式(I/a)、(I/b)和(I/c)化合物如果必要的话，按照常规的纯化工艺纯化，合适的话分离成它们的异构体，且如果需要的话，转化为与可药用酸或碱的加成盐优选的本发明化合物是其中R1代表甲基，R2代表羟基，R3代表苄基、嘧啶基、优选被甲氧基取代的苯基或氢原子的那些n值优选为1至7n尤其是6优选的本发明化合物是-7-{6-[(4-苄基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}庚酸及其加成盐，-7-{6-{[4-(嘧啶-2-基)-1-哌嗪基]甲基}-2，3-二甲氧基苯氧基}庚酸及其加成盐，-4-{6-[(哌嗪-1-基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}丁酸及其加成盐，-7-{6-[(4-(2-甲氧基苯基)-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}庚酸及其加成盐，-4-{6-[(4-(2-甲氧基苯基)-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}丁酸及其加成盐本发明还涉及药物组合物，包含作为活性成分的至少一种式(I)化合物，单独或者与一种或多种惰性无毒赋形剂或载体组合在根据本发明的药物组合物中，尤其可以提到适合于口服、肠胃外、鼻、皮肤给药的片剂或糖锭剂、舌下片、明胶胶囊剂、锭剂、栓剂、霜剂、软膏剂、皮肤凝胶剂等有用的剂量因患者的年龄与体重、障碍的性质与严重性和给药的途径而异，并且可以是口服、鼻、直肠或肠胃外给药一般地，用于治疗的单位剂量为0.1至500mg/24小时，分1至3次给药下列实施例阐述本发明但决不限制发明所用原料是已知产物，或者按照已知工艺制备实施例所述化合物的结构是按照常用的分光光度技术(红外、NMR、质谱等)测定的实施例17-{6-[(4-苄基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}-庚酸乙酯二盐酸盐在冷却至0℃的反应釜内，将2.2g 60％氢化钠悬浮在250ml无水四氢呋喃中在室温下向前述混合物中滴加17.1g 6-[(4-苄基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯酚的150ml无水THF溶液，然后是14.6ml 7-溴庚酸乙酯的50ml无水THF溶液将反应混合物在回流下加热15天，然后在部分真空下浓缩至干将粗残余物溶于二乙醚，滤出在0℃下冷却12小时后所得沉淀，然后用冷二乙醚(4℃)洗涤将醚溶液在部分真空下浓缩至干，得到粗残余物，经过二氧化硅柱色谱法纯化，用二氯甲烷/甲醇(98/2至90/10)梯度洗脱，得到预期产物的碱形式，转化为对应的二盐酸盐熔点180℃元素微分析C％ H％ N％计算值60.947.764.90实测值60.687.725.00实施例27-{6-[(4-苄基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}-庚酸二盐酸盐将10g实施例1所得化合物加入到含有4g氢氧化钠的250ml乙醇溶液中使全部混合物维持6小时，不搅拌蒸发除去溶剂后，残余物经过二氧化硅柱色谱法纯化，用二氯甲烷/甲醇(95/5至0/100)梯度洗脱得到预期产物的碱形式，转化为对应的二盐酸盐熔点190℃元素微分析C％ H％ N％计算值59.667.425.15实测值59.067.675.26实施例3{6-[(4-苄基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}乙酸乙酯二盐酸盐用氯乙酸乙酯代替7-溴庚酸乙酯，按照实施例1所述方法得到预期产物熔点162℃元素微分析C％ H％ N％计算值57.496.835.59实测值57.626.875.62实施例4{6-[(4-苄基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}乙酸二盐酸盐从实施例3所述化合物开始，按照实施例2所述方法得到预期产物熔点175℃元素微分析C％ H％ N％计算值55.826.395.92实测值55.316.375.86实施例54-{6-[(4-苄基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}丁酸乙酯二盐酸盐用4-溴丁酸乙酯代替7-溴庚酸乙酯，按照实施例1所述方法得到预期产物熔点164℃元素微分析C％ H％ N％计算值58.987.235.29实测值59.327.185.06实施例64-{6-[(4-苄基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}丁酸二盐酸盐从实施例5所述化合物开始，按照实施例2所述方法得到预期产物熔点200℃元素微分析C％ H％ N％计算值57.496.835.59实测值57.487.005.61实施例78-{6-[(4-苄基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}辛酸乙酯二盐酸盐用8-溴辛酸乙酯代替7-溴庚酸乙酯，按照实施例1所述方法得到预期产物熔点177℃元素微分析C％ H％ N％计算值61.537.92 4.78实测值61.407.92 4.79实施例88-{6-[(4-苄基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}辛酸二盐酸盐从实施例7所述化合物开始，按照实施例2所述方法得到预期产物熔点180℃元素微分析C％ H％N％计算值60.327.595.02实测值60.127.585.04实施例910-{6-[(4-苄基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}癸酸甲酯二盐酸盐用10-溴癸酸甲酯代替7-溴庚酸乙酯，按照实施例1所述方法得到预期产物熔点145℃元素微分析C％H％ N％计算值 62.098.07 4.67实测值 62.158.17 4.67实施例1010-{6-[(4-苄基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}癸酸二盐酸盐从实施例9所述化合物开始，按照实施例2所述方法得到预期产物熔点156℃元素微分析C％H％N％计算值 61.53 7.92 4.78实测值 61.32 8.06 4.90实施例1111-{6-[(4-苄基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}十一烷酸甲酯二盐酸盐用11-溴十一烷酸甲酯代替7-溴庚酸乙酯，按照实施例1所述方法得到预期产物熔点177℃元素微分析C％H％ N％计算值 62.63 8.21 4.57实测值 61.97 8.27 4.81实施例1211-{6-[(4-苄基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}十一烷酸二盐酸盐从实施例11所述化合物开始，按照实施例2所述方法得到预期产物熔点185℃元素微分析C％ H％ N％计算值62.09 8.07 4.67实测值61.97 8.06 4.71实施例137-{6-{[4-(嘧啶-2-基)-1-哌嗪基]甲基}-2，3-二甲氧基苯氧基}庚酸乙酯二盐酸盐用6-{[4-(嘧啶-2-基)-1-哌嗪基]甲基}-2，3-二甲氧基苯酚代替6-[(4-苄基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯酚，按照实施例1所述方法得到预期产物熔点128℃元素微分析C％ H％ N％计算值55.81 7.2110.01实测值56.11 7.409.96实施例147-{6-{[4-(嘧啶-2-基)-1-哌嗪基]甲基}-2，3-二甲氧基苯氧基}庚酸二盐酸盐从实施例13所述化合物开始，按照实施例2所述方法得到预期产物熔点115℃元素微分析C％H％N％计算值54.246.8310.54实测值54.336.9010.63实施例157-{6-[(哌嗪-1-基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}庚酸乙酯二盐酸盐用6-[(4-叔丁氧羰基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯酚代替6-[(4-苄基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯酚，按照实施例1所述方法得到预期产物实施例167-{6-[(哌嗪-1-基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}庚酸二盐酸盐从实施例15所述化合物开始，按照实施例2所述方法得到预期产物熔点160℃元素微分析C％H％ N％计算值52.987.566.18实测值53.067.496.28实施例177-{6-[(4-苯基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}庚酸乙酯二盐酸盐用6-{[(4-苯基)-1-哌嗪基]甲基}-2，3-二甲氧基苯酚代替6-[(4-苄基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯酚，按照实施例1所述方法得到预期产物实施例187-{6-[(4-苯基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}庚酸二盐酸盐从实施例17所述化合物开始，按照实施例2所述方法得到预期产物熔点132℃元素微分析C％H％N％计算值58.987.23 5.29实测值58.967.32 5.25实施例197-{6-[(4-环己基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}庚酸乙酯二盐酸盐用6-[(4-环己基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯酚代替6-[(4-苄基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯酚，按照实施例1所述方法得到预期产物实施例207-{6-[(4-环己基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}庚酸二盐酸盐从实施例19所述化合物开始，按照实施例2所述方法得到预期产物熔点182℃元素微分析C％ H％N％计算值58.318.28 5.23实测值57.928.41 5.24实施例217-{6-[(4-正庚基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}庚酸乙酯二盐酸盐用6-[(4-正庚基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯酚代替6-[(4-苄基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯酚，按照实施例1所述方法得到预期产物实施例227-{6-[(4-正庚基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}庚酸二盐酸盐从实施例21所述化合物开始，按照实施例2所述方法得到预期产物熔点152℃元素微分析C％ H％ N％计算值58.79 8.775.08实测值58.84 8.804.87实施例237-{6-[(4-环丙基甲基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二-甲氧基苯氧基}庚酸乙酯二盐酸盐用6-[(4-环丙基甲基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯酚代替6-[(4-苄基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯酚，按照实施例1所述方法得到预期产物实施例247-{6-[(4-环丙基甲基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}庚酸二盐酸盐从实施例23所述化合物开始，按照实施例2所述方法得到预期产物熔点170℃元素微分析C％ H％ N％计算值58.48 8.105.68实测值58.20 8.115.53实施例255-{6-[(4-苄基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}戊酸乙酯二盐酸盐用5-溴戊酸乙酯代替7-溴庚酸乙酯，按照实施例1所述方法得到预期产物实施例265-{6-[(4-苄基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}戊酸二盐酸盐从实施例25所述化合物开始，按照实施例2所述方法得到预期产物熔点181℃元素微分析C％ H％ N％计算值58.257.045.43实测值58.287.075.47实施例276-{6-[(4-苄基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}己酸乙酯二盐酸盐用6-溴己酸乙酯代替7-溴庚酸乙酯，按照实施例1所述方法得到预期产物实施例286-{6-[(4-苄基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}己酸二盐酸盐从实施例27所述化合物开始，按照实施例2所述方法得到预期产物熔点173℃元素微分析C％ H％ N％计算值58.987.235.29实测值59.057.335.36实施例294-{6-[(哌嗪-1-基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}丁酸乙酯二盐酸盐用6-[(4-叔丁氧羰基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯酚代替6-[(4-苄基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯酚，用4-溴丁酸乙酯代替7-溴庚酸乙酯，按照实施例1所述方法得到预期产物实施例304-{6-[(哌嗪-1-基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}丁酸二盐酸盐从实施例29所述化合物开始，按照实施例2所述方法得到预期产物熔点141℃元素微分析C％ H％ N％计算值49.646.866.81实测值49.246.915.81实施例314-{6-[(4-苯基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}丁酸乙酯二盐酸盐用6-[(4-苯基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯酚代替6-[(4-苄基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯酚，用4-溴丁酸乙酯代替7-溴庚酸乙酯，按照实施例1所述方法得到预期产物实施例324-{6-[(4-苯基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}丁酸二盐酸盐从实施例31所述化合物开始，按照实施例2所述方法得到预期产物熔点129℃元素微分析C％ H％ N％计算值56.686.625.75实测值56.686.755.81实施例337-{6-[(4-(2-甲氧基苯基)-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}庚酸乙酯二盐酸盐用6-{[4-(2-甲氧基苯基)-1-哌嗪基]甲基}-2，3-二甲氧基苯酚代替6-[(4-苄基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯酚，按照实施例1所述方法得到预期产物实施例347-{6-[(4-(2-甲氧基苯基)-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}庚酸二盐酸盐从实施例33所述化合物开始，按照实施例2所述方法得到预期产物熔点141℃元素微分析C％ H％ N％计算值57.967.215.01实测值57.707.225.02实施例354-{6-[(4-(2-甲氧基苯基)-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}丁酸乙酯二盐酸盐用6-[(4-(2-甲氧基苯基)-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯酚代替6-[(4-苄基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯酚，用4-溴丁酸乙酯代替7-溴庚酸乙酯，按照实施例1所述方法得到预期产物实施例364-{6-[(4-(2-甲氧基苯基)-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}丁酸二盐酸盐从实施例35所述化合物开始，按照实施例2所述方法得到预期产物熔点153℃元素微分析C％ H％ N％计算值55.716.625.41实测值55.836.625.37实施例374-{6-[(4-(嘧啶-2-基)-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}丁酸乙酯二盐酸盐用6-[(4-(嘧啶-2-基)-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯酚代替6-[(4-苄基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯酚，用4-溴丁酸乙酯代替7-溴庚酸乙酯，按照实施例1所述方法得到预期产物实施例384-{6-[(4-(2-嘧啶-2-基)-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}丁酸二盐酸盐从实施例37所述化合物开始，按照实施例2所述方法得到预期产物熔点174℃元素微分析C％ H％ N％计算值51.546.1811.45实测值51.955.8811.41实施例397-{6-[(4-(4-氯苄基)-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}庚酸乙酯二盐酸盐用6-{[4-(4-氯苄基)-1-哌嗪基]甲基}-2，3-二甲氧基苯酚代替6-[(4-苄基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯酚，按照实施例1所述方法得到预期产物实施例407-{6-[(4-(4-氯苯基)-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}庚酸二盐酸盐从实施例39所述化合物开始，按照实施例2所述方法得到预期产物熔点187℃元素微分析C％ H％ N％计算值56.116.80 4.85实测值55.986.86 5.03实施例414-{6-[(4-(4-氯苯基)-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}丁酸乙酯二盐酸盐用6-[(4-(4-氯苄基)-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯酚代替6-[(4-苄基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯酚，用4-溴丁酸乙酯代替7-溴庚酸乙酯，按照实施例1所述方法得到预期产物实施例424-{6-[(4-(4-氯苯基)-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}丁酸二盐酸盐从实施例41所述化合物开始，按照实施例2所述方法得到预期产物实施例434-{6-[(4-环己基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}丁酸乙酯二盐酸盐用6-[(4-环己基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯酚代替6-[(4-苄基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯酚，用4-溴丁酸乙酯代替7-溴庚酸乙酯，按照实施例1所述方法得到预期产物实施例444-{6-[(4-环己基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}丁酸二盐酸盐从实施例43所述化合物开始，按照实施例2所述方法得到预期产物熔点211℃元素微分析C％ H％ N％计算值55.987.765.68实测值55.747.705.70实施例454-{6-[(4-正庚基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}丁酸乙酯二盐酸盐用6-[(4-正庚基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯酚代替6-[(4-苄基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯酚，用4-溴丁酸乙酯代替7-溴庚酸乙酯，按照实施例1所述方法得到预期产物实施例464-{6-[(4-正庚基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}丁酸二盐酸盐从实施例45所述化合物开始，按照实施例2所述方法得到预期产物实施例474-{6-[(4-环丙基甲基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}丁酸乙酯二盐酸盐用6-[(4-环丙基甲基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯酚代替6-[(4-苄基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯酚，用4-溴丁酸乙酯代替7-溴庚酸乙酯，按照实施例1所述方法得到预期产物实施例484-{6-[(4-环丙基甲基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}丁酸二盐酸盐从实施例47所述化合物开始，按照实施例2所述方法得到预期产物实施例493-{6-[(4-苄基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}丙酸乙酯二盐酸盐用3-溴丙酸乙酯代替7-溴庚酸乙酯，按照实施例1所述方法得到预期产物实施例503-{6-[(4-苄基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}丙酸二盐酸盐从实施例49所述化合物开始，按照实施例2所述方法得到预期产物实施例517-{6-[(4-(2，6-二吡咯烷基-嘧啶-4-基)-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}庚酸乙酯四盐酸盐用6-{[4-(2，6-二吡咯烷基-嘧啶-4-基)-1-哌嗪基]甲基}-2，3-二甲氧基苯酚代替6-[(4-苄基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯酚，按照实施例1所述方法得到预期产物实施例527-{6-[(4-(2，6-二吡咯烷基-嘧啶-4-基)-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}庚酸四盐酸盐从实施例51所述化合物开始，按照实施例2所述方法得到预期产物实施例534-{6-[(4-(2，6-二吡咯烷基-嘧啶-4-基)-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}丁酸乙酯四盐酸盐用6-{[4-(2，6-二吡咯烷基-嘧啶-4-基)-1-哌嗪基]甲基}-2，3-二甲氧基苯酚代替6-[(4-苄基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯酚，用4-溴丁酸乙酯代替7-溴庚酸乙酯，按照实施例1所述方法得到预期产物实施例544-{6-[(4-(2，6-二吡咯烷基-嘧啶-4-基)-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}丁酸四盐酸盐从实施例53所述化合物开始，按照实施例2所述方法得到预期产物实施例557-{6-[(4-正-(6-乙氧羰基)己基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}庚酸乙酯二盐酸盐用6-{[4-正-(6-乙氧羰基)己基-1-哌嗪基]甲基}-2，3-二甲氧基苯酚代替6-[(4-苄基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯酚，按照实施例1所述方法得到预期产物实施例567-{6-[(4-正-(6-羧基)己基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}庚酸二盐酸盐从实施例55所述化合物开始，按照实施例2所述方法得到预期产物实施例574-{6-[(4-(3-乙氧羰基)丙基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}丁酸乙酯二盐酸盐用6-{[4-(3-乙氧羰基)丙基-1-哌嗪基]甲基}-2，3-二甲氧基苯酚代替6-[(4-苄基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯酚，用4-溴丁酸乙酯代替7-溴庚酸乙酯，按照实施例1所述方法得到预期产物实施例584-{6-[(4-(3-羧基)丙基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}丁酸二盐酸盐从实施例57所述化合物开始，按照实施例2所述方法得到预期产物实施例597-{6-[(4-(3-乙氧羰基)丙基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}庚酸乙酯二盐酸盐用6-{[4-(3-乙氧羰基)丙基-1-哌嗪基]甲基}-2，3-二甲氧基苯酚代替6-[(4-苄基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯酚，按照实施例1所述方法得到预期产物实施例607-{6-[(4-(3-羧基)丙基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}庚酸二盐酸盐从实施例59所述化合物开始，按照实施例2所述方法得到预期产物实施例614-{6-[(4-正-(6-乙氧羰基)己基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}丁酸乙酯二盐酸盐用6-{[4-正-(6-乙氧羰基)己基-1-哌嗪基]甲基}-2，3-二甲氧基苯酚代替6-[(4-苄基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯酚，用4-溴丁酸乙酯代替7-溴庚酸乙酯，按照实施例1所述方法得到预期产物实施例624-{6-[(4-正-(6-羧基)己基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}丁酸二盐酸盐从实施例61所述化合物开始，按照实施例2所述方法得到预期产物实施例637-{6-[(4-苄基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}-N，N-二乙基庚酰胺二盐酸盐将4.95g实施例2所述化合物溶于100ml二氯甲烷加入2.17g二环己基碳二亚胺，然后是2.1ml N，N-二乙胺和1.28g N，N-二甲氨基吡啶搅拌24小时后，将溶液过滤，然后浓缩至干，所得粗残余物经过二氧化硅柱色谱法纯化，用乙酸乙酯/甲醇(100/0至80/20)梯度洗脱，得到预期产物的碱形式，转化为对应的二盐酸盐实施例644-{6-[(4-苄基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}-N，N-二乙基丁酰胺二盐酸盐从实施例6所述化合物开始，按照实施例63所述方法得到预期产物熔点198℃元素微分析C％ H％ N％计算值60.417.797.55实测值60.177.797.50实施例653-{6-[(4-苄基-1-哌嗪基)甲基]-2，3-二甲氧基苯氧基}丙酰胺二盐酸盐从实施例50所述化合物得到预期产物，是在含氨介质中反应的本发明化合物的药理学研究A本发明化合物抗缺血活性的研究所用模型是由管腔内闭合产生的暂时病灶性脑缺血模型，它模拟人类栓子性脑血管意外梗塞的位置是皮质和皮质下(R.Bordet等，J CerebBlood Flow Metab.(脑血流与代谢杂志)，20，2000，1190-1196和1999，19，1309-1345)该模型是这样构建的，在成年雄性Wistar大鼠中，单侧闭合中颈动脉1小时，然后再灌注23小时本试验的目的是研究本发明化合物的抗缺血作用为了手术，用300mg/kg水合氯醛麻醉动物在手术期间监测体温，利用温控式加热毯维持在37℃主要程序是通过动脉口的管腔内闭合，中断向右中脑动脉(MCA)的血液循环60分钟后，停止闭合，将动物放回笼中24小时后，在麻醉下处死动物迅速取出它们的脑，冷冻，通过三维立体定位局部解剖，在低温恒温器内得到12片50μm厚的切片，间隔1μm切片用速甲酚紫(rapidcresyl violet)染色脑切片的未染色区被定义为梗塞区利用图象分析程序分别计算每片切片的未经校正的梗塞区和总半球区为了补偿脑水肿的后果，计算经过校正的总梗塞体积在闭合前3分钟将产物静脉内给药，剂量为1mg/kg该模型中，本发明化合物、尤其是实施例2化合物显著减少皮质和纹状体的梗塞尺寸，说明具有神经保护作用B星形胶质细胞培养物缺氧实验方案按照Booher和Sensenbrenner所述技术(Neurobiology(神经生物学)，1972，2，97-105)从新生大鼠获得星形胶质细胞培养物按照Plateel等所述缺氧模型(J.Neurochem.(神经化学杂志)，1995，65，2138-2145)，培养三至六周后使用为了重新组成ATP储备，在缺氧开始前24小时改变培养基加入已经脱除O2并且含有给定浓度供试分子的培养基后，在厌氧培养室内缺氧生存24小时利用冷光测定ATP浓度，以皮摩尔ATP/毫克蛋白质表示该模型中，对于从27％至79％的缺氧程度，实施例2化合物能够恢复ATP从35％至87％，而曲美他嗪对该参数没有作用在1μM下观察到最大作用C本发明化合物对皮质和白质的神经保护作用所用模型是影响皮质神经元和在下白质的小鼠神经变性模型(S.L.Tahraoui等，Brain Pathol.(脑病理学)，2001，11，56-71)该模型基于新生小鼠脑内注射S-溴-尿嘧啶丙氨酸或鹅膏蕈氨酸盐，前者是一种作用于AMPA-红藻氨酸盐受体的谷氨酸能激动剂，后者是一种NMDA-型受体激动剂所有注射都是在上午10.00与13.00之间进行的预先麻醉动物，在操作期间保持在加热灯下每个实验组包含5至12只雌雄瑞士小鼠，来自至少2只不同的母鼠出生后第5天(P5)，利用安装在50μl注射器上的25G计量针头脑内注射10μg鹅膏蕈氨酸盐或15μg S-溴-尿嘧啶丙氨酸，注射器连接于校准的装置，每揿释放1μl药团将针头插入右半球额顶区皮肤平面下2mm(人字缝前2mm和中线外2mm)给以两个1μl药团(1μl进入室周白质，1μl进入皮质)两次间隔30秒钟，其间针头保持固定，目的是使产物扩散该兴奋毒性侵袭后立即腹膜内给以供试化合物(3、10或30mg/kg)或载体(注射体积＝5μl)5天后(P10)通过断头术处死动物，立即取出它们的脑，固定在福尔马林中，然后封装在石蜡中对所有的脑制备系列15μm冠状切片，用甲酚紫染色，从而可以精确和可再现的方式确定皮质与白质组织学损伤的前-后轴由两名对实验组不了解的独立观察人员测定组织学损伤的尺寸结果以平均数表示该模型中，实施例2的化合物尤其减少白质和皮质中的损伤尺寸，说明具有重要的神经保护作用作为对比的曲美他嗪(TMZ)具有非常低的神经保护作用 D代谢稳定性用于估计代谢稳定性的模型是在离体大鼠和人微粒体中开发和验证的(M.Bertrand等，European Journal of Pharmaceutical Sciences(欧洲药物科学杂志)，2000，Vol 11，Suppl.2，S61-S72)代谢生物利用度(MF％)的预测基于代谢稳定性的体外测量，利用肝微粒体并假定完全吸收简言之，在大鼠与人肝微粒体(0.33mg蛋白质/ml)的存在下，将10-7M产物温育0、5、15、30和60分钟在每个时间点，通过LC-MS-MS测量未改变的产物的量体外固有廓清率(Clint)相当于未改变的产物残留浓度对温育时间的曲线(LN线性化之后)然后利用因数0.045mg蛋白质/kg肝和大鼠肝重11g和人肝重1.2kg，将该体外固有廓清率折算为全生物体内固有廓清率(vivoClint)利用静脉平衡模型实现体内固有廓清率向肝廓清率(HepCl)的转化(HepCl＝vivoClint*HBF/(vivoClint+HBF)，其中HBF(肝血流)对大鼠相当于22ml/min，对人相当于1500ml/min然后利用下式从肝萃取系数推导MF％MF％＝1-HepCl/HBF该方法在体外与体内数据之间获得良好的相关性该模型中，本发明化合物证明具有非常好的代谢稳定性E抗编程性细胞死亡作用通过加入过氧化氢(H2O2)诱发编程性细胞死亡而进行对心肌细胞原代培养物的抗编程性细胞死亡作用的体外研究所产生的自由基诱发编程性细胞死亡这类似于在缺血-再灌注中所观察到的情形(R.Von Harsdorf，Circulation(循环)，99，2934-2941)从新生大鼠心脏中分离心肌细胞，按35000个细胞/cm2的密度铺开加入H2O2(0.075mmol/升)达30分钟诱发编程性细胞死亡过程然后将心肌细胞置于培养基中达24小时通过各种技术使编程性细胞死亡的细胞可见，例如发生在编程性细胞死亡过程中的基因组DNA的片段化如下两种技术所示(见上参考文献)1 TUNEL试验能够标记表现其DNA片段化的细胞核2 通过“DNA梯形化”技术证明DNA的片段化通过琼脂糖凝胶电泳检测基因组DNA的180bp特征性片段磷脂酰丝氨酸(PS)从细胞核膜内部迁移到外部(外表化)是编程性细胞死亡的早期症状利用膜联蛋白-V-FITC(异硫氰酸荧光素)通过荧光标记使其可见，通过与细胞总数对比进行量化该体外模型中，实施例2化合物保护心肌细胞免受编程性细胞死亡该作用自身表现在经历编程性细胞死亡的细胞百分率减少和细胞存活率增加所以，该产物是一种心保护产物F对海马CA1与CA3区的神经保护作用红藻氨酸是现有最有力的外源性兴奋毒素之一，它诱发急性或亚急性癫痫样障碍的能力证明了这一点所观察到的与红藻氨酸给药有关的组织病理学改变不同于由损伤导致的脑缺血，该损伤首先从海马的CA1区发展到CA3区(C.Montecot等，Neuroscience(神经科学)84，791-800)目的是研究对主要在海马CA3区诱发的损伤的保护作用，而血液循环没有减少将红藻氨酸对清醒大鼠腹膜内给药，剂量为12mg/kg然后观察动物约2小时，在此期间，在一段潜伏期后出现癫痫样惊厥在2小时结束时，给以10mg/kg地西泮终止惊厥7天后处死动物，分离它们的脑，制备8片15μm厚的横切片，间隔150μm由两名对实验组不了解的独立观察人员通过对比显微镜检查分析这些切片根据神经元损伤的严重性给出0至3的评分每个半球的评分相加，得到损伤评分在红藻氨酸给药前3分钟，将产物通过腹膜内途径给药，剂量为20mg/kg该模型中，实施例2化合物的单一注射保护海马CA1与CA3区神经元免受由红藻氨酸诱发的损伤，因而证明具有强大的神经保护作用药物组合物制备1000片片剂的配方，每片含有10mg剂量实施例2化合物................................................10g羟丙基纤维素..................................................2g小麦淀粉.....................................................10g乳糖........................................................100g硬脂酸镁......................................................3g滑石..........................................................3g