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一种生物碱化合物及其制备方法和应用制作方法

  • 专利名称
    一种生物碱化合物及其制备方法和应用制作方法
  • 发明者
    吴斌
  • 公开日
    2012年7月18日
  • 申请日期
    2011年12月21日
  • 优先权日
    2011年12月21日
  • 申请人
    浙江大学
  • 文档编号
    C12R1/645GK102584615SQ20111043323
  • 关键字
  • 权利要求
    1. 一种生物碱化合物,其结构式如式(I)所示2.如权利要求I所述的生物碱化合物的制备方法,其特征在于,包括以下步骤(1)将经活化的拟盘多毛孢属真菌Z233(pestal0ti0psissp. Z233)接种到培养液中, 于20-30°C发酵培养10-40天;(2)发酵培养后,分离得到菌丝体和发酵液;将菌丝体置于有机溶剂中浸提,分离得到浸提液,然后用乙酸乙酯或氯仿对浸提液进行萃取,萃取液经浓缩后得到菌丝体提取物;或者,用乙酸乙酯或氯仿对发酵液进行萃取,萃取液经浓缩后得到发酵液提取物;(3)对菌丝体提取物或发酵液提取物进行层析分离、纯化处理,制得权利要求I所述的生物碱化合物;其中,步骤(I)中,所述拟盘多毛孢属真菌Z233的ITS基因序列如SEQ ID No. I所示; 该菌株在PDA上培养时,菌丝体绒状松软,早期呈轮纹状;培养8d后,菌丝体上产生分生孢子盘,分布于整个菌落;分生孢子盘呈球形,顶端有墨汁状黏液即产生的分生孢子;分生孢子成熟后直立或稍弯曲,广梭形,具5个细胞,中间3个细胞有色,分隔处不具显著缢缩;顶部细胞短而无色,基部细胞较小;有鞭毛3根;步骤(2)中,所述的有机溶剂为甲醇、乙醇、乙酸乙酯和丙酮中的一种或两种3.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,步骤⑴中,所述的培养液为PDA液体培养基或麦芽汁培养基4.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,步骤(I)中,所述的发酵培养时间为 15-25 天5.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,步骤(3)中,所述的层析分离为正相硅胶柱层析分离,洗脱剂为石油醚/乙酸乙酯混合液6.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,步骤(3)中,所述的纯化方法为重结晶、反相硅胶柱层析分离或高效液相色谱分离7.根据权利要求6所述的制备方法,其特征在于,所述反相硅胶柱层析分离的洗脱剂为甲醇/水混合液8.如权利要求I所述的生物碱化合物在制备抗肿瘤药物、肿瘤预防保健食品中的应用
  • 技术领域
    本发明涉及海洋活性成分领域,尤其涉及一种生物碱化合物及其制备方法和应用
  • 背景技术
  • 专利详情
  • 全文pdf
  • 权力要求
  • 说明书
  • 法律状态
专利名称:一种生物碱化合物及其制备方法和应用的制作方法铜藻(Sargassum horneri)为马尾藻属大型海藻,藻株高大,枝叶繁茂,是中国暖温带海域和浅海植被优势种。铜藻的化学成分有一定研究,主要有2,4-羟基-2,4-乙烯基-胆甾醇,岩藻甾醇,5 α,8α-过氧麦角甾_6,2,2_ 二烯_3 β -醇,β-谷甾醇等(袁清香、付玲,铜藻Sargassu Horneri的化学成分研究,广东化工,2006年33卷5期)。关于拟盘多毛孢属真菌(Pestalotiopsis)的化学成分目前研究较多。国内学者车永胜等对该属化学成分进行了系统的研究,2011年从该属中分离得到pestaloquinols A 和 B (Gang Ding, Fan Zhang, Hong Chen, Liangdong Guo, Zhongmei Zou, and Yongsheng Che Pestaloquinols A and B, Isoprenylated Epoxyquinols from Pestalotiopsis sp. J. Nat. Prod.,2011,74(2),pp 286-291)。Jing Xu 等于 2009 年从该属中分离得到一系列色原酮化合物(Jing Xu, Julian Kjer,Jandirk Sendker,Victor Wray, Huashi Guan, RuAngelie Edrada,Wenhan Lin, Jun Wu and Peter Proksch Chromones from the Endophytic Fungus Pestalotiopsis sp.Isolated from the Chinese Mangrove Plant Rhizophora mucronata, J. Nat. Prod.,2009,72 (4),pp 662-665)。但生物减化合物很少从该属中分离得到。该属种化合物活性明显,车永胜等从Pestalotiopsis fici中分离得到新颖的抗肿瘤化合物(Ling Liu, Yan Li,Shuchun Liu, Zhihui Zheng, Xulin Chen, Hua Zhang, Liangdong Guo and Yongsheng Che, Chloropestolide A, an Antitumor Metabolite with an Unprecedented Spiroketal Skeleton from Pestalotiopsis fici, Org. Lett. ,2009,11 (13), pp 2836-2839)。Chen 等人于 2010 年报道海洋来源的拟盘多毛抱属真菌(Pestalotiopsis sp. J63)产生木质素降解酶(Hui-Ying Chen, Dong-Sheng Xue, Xiao-Yu Feng and Shan-Jing Yao, Screening and Production of Ligninolytic Enzyme by a Marine-Derived Fungal Pestalotiopsis sp. J63, Applied Biochemistry and Biotechnology Volume 165,Numbers 7-8,1754-1769.)。
本发明提供了一种生物碱化合物,该化合物为铜藻附生拟盘多毛孢属真菌Z233 发酵培养物中提取获得的天然活性物质,具有抗肿瘤活性。一种生物碱化合物,其结构式如式(I)所示本发明公开了一种生物碱化合物及其制备方法和应用。该生物碱化合物的分子式为C15H21NO4,其制备方法包括将经活化的拟盘多毛孢属(Pestalotiopsis sp.)真菌Z233接种到培养液中,于20-30℃发酵培养10-40天;发酵培养后,分离得到菌丝体和发酵液;菌丝体经有机溶剂浸提、萃取、浓缩后得到菌丝体提取物;或者,发酵液经萃取、浓缩后得到发酵液提取物;对菌丝体提取物或发酵液提取物进行层析分离、纯化处理,制得生物碱化合物。本发明从铜藻附生拟盘多毛孢属真菌Z233的发酵培养物中提取、分离获得一种具有新颖结构的生物碱化合物,该化合物具有较好抗肿瘤活性,可用于制备抗肿瘤药物、肿瘤预防保健食品,具有良好的开发前景。

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