二苯并[a,kI]呫吨衍生物用作抗肿瘤药物制作方法

许遵乐, 谭端明, 庞冀燕, 蔡敏, 陈家堃, 汪波, 刘汉标

2002年8月21日

2002年1月16日

2002年1月16日

中山大学

A61K31/352GK1364460SQ0211474

二苯 kI 衍生物 用作

1.如结构通式I所示的1-氧代-13c-烷氧基-1，13c-二氢二苯并[a，kl]呫吨及其衍生物用作抗肿瘤药物， 结构通式I中的R1为1～12个碳的烷基中的任一种，以及H，CH2CH2Cl，CH2CH2Br和(CH2CH2X)nY中的任一种，其中X＝NH，O；Y＝H，CH3，CH2CH3，Oac；n＝1～10；结构通式I中的R2和R5为H，CH3，CH2CH3，CH2OH，CH2OAc，CH2OCH3，CH2CH2OH，COOH，COOCH3，COOCH2CH3，CONH2，CONHCH3，CONHCH2Ph，CONHPh，OH，OAc，OCH3，OCH2CH3，NHAc，NHCOPh中的任一种，R2和R5可以相同或者不同；结构通式I中的R3和R6为H，Cl，Br，NO2，CH3，CH2CH3，CH(CH3)2，C(CH3)3和Ac中的任一种，R3和R6可以相同或者不同；结构通式I中的R4和R7为H，OH，OAc，OCH3，OCH2CH3和OCH2Ph中的任一种，R4和R7可以相同或者不同2.根据权利要求1的应用，其特征是所述的抗肿瘤药物为抗肝癌药物

本发明属于医药技术领域，结构通式I的1-氧代-13c-烷氧基-1，13c-二氢二苯并[a，kl]呫吨及其衍生物用作抗肿瘤药物后来H.P.Schneider等人报道(Schneider，H.P.；Streich，E.；Schurr，K.；et al，Chem.Ber.，1984，117，2660)3，3’，6，6’-四叔丁基取代的1在碱性的甲醇溶液中可被铁氰化钾直接一步氧化生成四叔丁基取代的2(通式I中R1＝CH3，R2＝R3＝R5＝R6＝t-Bu，R4＝R7＝H)，产率也不高，只有38％(见式2) 这类结构的化合物当时是在研究氧化反应规律过程中得到的产物，并未用于抗肿瘤的药理试验我们在进行模拟氧化酶的研究中，发现氧气在某些铜胺络合物的催化下，可以把1氧化成2，产率高达94％(Tan D-M，Li H-H，Wang B，Liu H-B，Xu Z-L，Chin.J. Chem.，2001，1991)，溶剂甲醇参与了反应，产物中的甲氧基来自甲醇分子当反应在其它醇中进行时，得到带有相应烷氧基的产物，产物94～58％(见式3) R＝CH3，CH2CH3，CH2CH2CH3，CH(CH3)2，CH2CH(CH3)2，CH2(CH2)2CH3CH2CH2Cl，CH2CH2OCH3，CH2CH2OCH2CH3et al从对称取代和不对称取代的联萘酚出发，在不同的醇溶剂(R1OH)中用铜胺络合物-氧气体系进行氧化反应，就可以得到通式I的化合物(见式4)通式I中的R1来自反应物之一的醇(R1OH)对于一些常见的低级醇，如甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇等醇的反应，可以加入大量的醇进行反应，醇既作反应物又充当溶剂当用粘度较大或者固体的醇反应时，还可以加入丙酮、二甲基甲酰胺或二甲基亚砜等极性非质子溶剂作为稀释剂和增溶剂 根据所用的醇的不同，可以得到一系列不同R1取代基的化合物IR1可以为1～12个碳的烷基，以及H，CH2CH2Cl，CH2CH2Br和(CH2CH2X)nY[其中X＝NH，O；Y＝H，CH3，CH2CH3，OAc，n＝1～10]中的任一种当在反应底物联萘酚的3位和3’位上有取代基(R2和R5)时，R2和R5出现在产物I的2位和8位根据原料的不同，R2和R5可以为H，CH3，CH2CH3，CH2OH，CH2OAc，CH2OCH3，CH2CH2OH，COOH，COOCH3，COOCH2CH3，CONH2，CONHCH3，CONHCH2Ph，CONHPh，OH，OAc，OCH3，OCH2CH3，NHAc，NHCOPh中的任一种R2和R5可以相同或者不同同理，底物联萘酚的6位和6’位上的取代基R3和R6出现在产物的5位和11位其中R3和R6可以为H，Cl，Br，NO2，CH3，CH2CH3，CH(CH3)2，C(CH3)3和Ac中的任一种R3和R6可以相同或者不同同理，底物联萘酚的7位和7’位上的取代基R4和R7出现在产物的6位和12位其中R4和R7可以为H，OH，OAc，OCH3，OCH2CH3和OCH2Ph中的任一种R4和R7可以相同或者不同体外药理试验表明，上述结构通式I所示的1-氧代-13c-烷氧基-1，13c-二氢二苯并[a，kl]呫吨及其衍生物用作抗肿瘤药物，具有明显的抗肿瘤活性(结果见表1)，具有良好的抗肿瘤药物开发应用前景结构通式I中的R1为1～12个碳的烷基中的任一种，以及H，CH2CH2Cl，CH2CH2Br和(CH2CH2X)nY中的任一种，其中X＝NH，O；Y＝H，CH3，CH2CH3，Oac；n＝1～10；结构通式I中的R2和R5为H，CH3，CH2CH3，CH2OH，CH2OAc，CH2OCH3，CH2CH2OH，COOH，COOCH3，COOCH2CH3，CONH2，CONHCH3，CONHCH2Ph，CONHPh，OH，OAc，OCH3，OCH2CH3，NHAc，NHCOPh中的任一种，R2和R5可以相同或者不同；结构通式I中的R3和R6为H，Cl，Br，NO2，CH3，CH2CH3，CH(CH3)2，C(CH3)3和Ac中的任一种，R3和R6可以相同或者不同；结构通式I中的R4和R7为H，OH，OAc，OCH3，OCH2CH3和OCH2Ph中的任一种，R4和R7可以相同或者不同表1为部分化合物的体外抗肿瘤活性试验结果表1中化合物Ia对人肝癌细胞的IC50为0.785μg/mL，而对正常人体肝上皮细胞的IC50为3.45μg/mL对肝癌细胞的毒性是对正常细胞毒性的4.4倍，差别十分明显因此，化合物I可望在治疗恶性肿瘤，尤其是肝癌、肺癌、子宫癌、乳腺癌、胃癌、肠癌、食道癌、鼻咽癌、膀胱癌、皮肤癌、白血病等恶性肿瘤的方面提供高效而低毒的药物表1.部分化合物的体外抗肿瘤活性试验结果 实施例1、合成I的通用方法一定量的联萘酚或者取代联萘酚加入到反应的醇溶剂中(必要时可以加入其它溶剂助溶，如丙酮、二甲基甲酰胺、二甲亚砜等)再加入由等摩尔量的乙醇胺与CuCl2·2H2O组成的催化剂，在氧气的存在下反应反应结束后减压蒸去溶剂，加入乙酸乙酯萃取有机物，再加入稀氨水洗去铜胺络合物所得的有机物用重结晶或者柱层析的方法提纯，得到相应的产物I2、Ia的合成CuCl2·2H2O 1.7g(10mmol)溶于200mL甲醇中，搅拌下加入0.61g乙醇胺(10mmol)，配成铜胺溶液再加入2.86g联萘酚(10mmol)，加热至65℃，常压下通O2搅拌薄层色谱跟踪反应至原料消失(约5小时)减压蒸去约一半甲醇，冷却到室温，析出黄色晶体，为产物Ia分离出晶体，依次用甲醇、清水、稀盐酸和清水洗涤，于50～70℃下烘干母液中加入200ml乙酸乙酯和500ml稀氨水进行抽提，分去水层，乙酸乙酯层用清水洗涤后用无水硫酸钠干燥，再通过一个氧化铝层析柱，洗脱剂用石油醚—乙酸乙酯10∶1，得到另一批产物Ia产率共94％mp.165-167℃，νmax3064(Ar-H)，2931，1700(s，C＝O)，1454，1053，807，751cm-1.δH2.83(s，3H，OCH3)，6.26(d，J＝9.9Hz，1H，2-H)，7.06(d，J＝7.3Hz，1H，4-H)，7.09(dd，3J＝8.2Hz，4J＝1.0Hz，1H，6＝H)，7.19(d，J＝9.9Hz，1H，3-H)，7.32(d，J＝8.9Hz，1H，9-H)，7.37(dd，J4H-5H＝7.3Hz，J5H-6H＝8.2Hz，1H，5-H)，7.40-7.44(m，2H，10-H，13-H)，7.79-7.82(m，1H，11-H)，7.89(d，J＝8.9Hz，1H，8-H)，8.10-8.13(m，1H，12-H)其它化合物的合成见参考文献(Tan D-M，Li H-H，Wang B，Liu H-B，Xu Z-L，Chin.J.Chem.，2001，1991)2、药物体外抗癌试验(MTT比色法)把3×104/ml的肝癌细胞株7402接种于96孔培养板中，每孔加入200ul，用10％MEM培养基培养温箱中培养24h后去掉培养液，加入新配制培养液，并分别加入一系列浓度的待测药物的DMSO溶液，每孔加入200ul，每剂量组设三个平行样板，培养48h后每孔加入2mg/ml的MTT溶液20ul，培养4h完全吸出孔内培养液，各加入150ul的DMSO，震荡10分钟使结晶物溶解用酶联检测仪检测各孔OD值(λ＝570nm)；以OD值对药物浓度的对数作图，从图上求出令半数细胞死亡的药物浓度即IC50结果见前表