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蛋白酪氨酸激酶抑制剂在诱导间充质干细胞向心源性细胞分化中的应用制作方法

  • 专利名称
    蛋白酪氨酸激酶抑制剂在诱导间充质干细胞向心源性细胞分化中的应用制作方法
  • 发明者
    黃基喆, 张杨洙
  • 公开日
    2013年6月5日
  • 申请日期
    2011年8月17日
  • 优先权日
    2010年9月16日
  • 申请人
    药剂细胞株式会社
  • 文档编号
    C12N5/02GK103140579SQ201180044610
  • 关键字
  • 权利要求
    1.诱导间充质干细胞向心源性细胞分化的方法,其特征在于,该方法包括用PTK(蛋白酪氨酸激酶)抑制剂处理间充质干细胞2.根据权利要求1所述的方法,其中,所述蛋白酪氨酸激酶抑制剂是下列化学式I的化合物, 化学式I3.根据权利要求2所述的方法,其中,R1^R2> R3、R4、R5及R6分别独立地为H、C1^4烷基或Cu烧氧基;R7为选自Cu烧基、C^4烧氧基、轻基、竣基及齒素原子组成的组中的一种以上的取代基取代的或未取代的苯基4.根据权利要求2所述的方法,其中,R1,R2,R3>R4^R5及R6分别独立地为H或(^_4烷氧基;R7为选自CV4烧基、Cu烧氧基或齒素原子取代的或未取代的苯基5.根据权利要求1所述的方法,其中,所述PTK抑制剂是N-(3-溴苯)-6,7- 二乙氧基喹唑啉-4-胺6.根据权利要求1所述的方法,其中,所述间充质干细胞是从骨髓、组织、胚胎、脐带血或体液获得7.根据权利要求1所述的方法,其中,所述PTK抑制剂的处理是将间充质干细胞在含有PTK抑制剂的培养基中培养而进行的8.根据权利要求7所述的方法,其中,所述培养进行5天至15天9.根据权利要求1所述的方法,其中,所述心源性细胞是心肌细胞特异性标记的表达相比间充质干细胞增加的心源性细胞10.根据权利要求9所述的方法,其中,所述心肌细胞特异性标记选自由cTnT(心脏肌钙蛋白T)、MLC (肌球蛋白轻链)及MHC (肌球蛋白重链)组成的组中11.根据权利要求1所述的方法,其中,所述心源性细胞是Cx43(接合素43)的表达相比间充质细胞增加的心源性细胞12.根据权利要求1所述的方法,其中,所述心源性细胞是Ca2+增强型关联蛋白的表达相比间充质干细胞增加的心源性细胞13.根据权利要求12所述的方法,其中,所述Ca2+增强型关联蛋白是SERCA2a或LTCC14.含有PTK(蛋白酪氨酸激酶)抑制剂的诱导间充质干细胞向心源性细胞分化的组合物15.根据权利要求14所述的组合物,其中,所述PTK抑制剂是化学式I的化合物, 化学式I16.根据权利要求15所述的组合物,其中,RpRyRyRpR5及R6分别独立地为烷基或Cu烧氧基;R7为选自Cu烧基、C^4烧氧基、轻基、竣基及齒素原子组成的组中的一种以上的取代基取代的或未取代的苯基17.根据权利要求15所述的组合物,其中,RpRyRyRpR5及R6分别独立地为H或C1^烧氧基;R7为选自CV4烧基、C^4烧氧基或齒素原子取代的或未取代的苯基18.根据权利要求14所述的组合物,其中,所述PTK抑制剂是N-(3-溴苯)-6,7- 二乙氧基喹唑啉-4-胺19.含有根据权利要求1至13中的任意一项所述的方法诱导由间充质干细胞分化的心源性细胞的用于心脏病治疗的医药组合物20.根据权利要求19所述的医药组合物,其中,所述心脏病是心肌梗塞、心力衰竭或心律失常
  • 技术领域
    本发明涉及蛋白酪氨酸激酶(PTK)抑制剂在诱导间充质干细胞向心源性细胞分化中的应用及含有通过PTK抑制剂诱导从间充质干细胞分化的心源性细胞的心脏病治疗用医药组合物
  • 背景技术
  • 专利详情
  • 全文pdf
  • 权力要求
  • 说明书
  • 法律状态
专利名称:蛋白酪氨酸激酶抑制剂在诱导间充质干细胞向心源性细胞分化中的应用的制作方法许多不同细胞类型曾被考虑为针对缺血性心脏的干细胞治疗剂的候选,但是至今还未发现在电机械融合方面理想的细胞类型(Segers, V.F.&Lee, R.T.Nature451, 937-942 (2008))。实际上,纯粹的间充质干细胞(mesenchymal stemcells, MSCs)向心肌细胞的分化在人体内以极低的比例观察到,且移植的干细胞和心肌的电机械融合能力还不确定(Chang, M.G., et al.Circulationll3, 1832-1841 (2006))。事实上,本发明的发明人在此前通过增加间充质干细胞的优点进行了很多研究(Song, S.ff., et al.Stem Cells27,1358-1365(2009);Chang, ff., et al.Stem Cells27, 2283-2292(2009) ; Song, H.,et al.Stem Cells25, 1431-1438(2007)),提高了移植细胞的生存率或梗塞心脏的功能,但是发现间充质干细胞的移植并不能减少梗塞后猝死的发生。在功能提高的情况下仍然无法改善生存率的原因是移植的干细胞和心肌的异源性而无法达到电机械融合
发明目的本发明的目的在于,为了将间充质干细胞用作心肌梗塞、心力衰竭、心律失常等的细胞治疗剂,提供能够诱导间充质干细胞向移植后能够与心肌进行电机械融合的细胞-心源性细胞分化的方法。技术方案为了避免移植细胞和心肌之间的异源性,在将间充质干细胞向梗塞心脏移植之前,可能需要对间充质干细胞的心因性特性进行调节,这会带来收缩功能和电机械稳定性的改善。从这一点着眼,本发明的发明人对能够诱导间充质干细胞向心源性细胞分化的方法持续地进行了研究。其结果,发现了蛋白酪氨酸激酶(Protein Tyrosine Kinase, PTK)抑制剂能够诱导间充质干细胞向心源性细胞分化。以下实施例中会与纯的间充质干细胞进行比较,示出在体外(ex vivo)能够通过PTK抑制剂诱导大鼠间充质干细胞向心源性细胞分化。从而,本发明提供用于诱导间充质干细胞向心源性细胞分化的PTK抑制剂的用途、包括用PTK抑制剂处理间充质干细胞使间充质干细胞向心源性细胞分化的诱导方法及含有PTK抑制剂的使间充质干细胞向心源性细胞分化的诱导用组合物。在本发明中,用于诱导间充质干细胞向心源性细胞分化的PTK抑制剂的种类不受特别的限制。根据,PTK抑制剂可以是化学式I的化合物。化学式I本发明涉及PTK抑制剂在诱导间充质干细胞向心源性细胞分化中的应用及含有通过PTK抑制剂诱导从间充质干细胞分化的心源性细胞的用于心脏病治疗的医药组合物。虽然间充质干细胞向心脏的移植能够带来免疫学及功能的改善,但是无法提供电稳定性。然而,用PTK抑制剂处理的间充质干细胞被诱导向心源性细胞分化,从而改善与宿主心脏组织的电机械融合,从而提供电稳定性,因此能够有效治疗心肌梗塞、心力衰竭及心律失常等心脏疾病。


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