专利名称：银杏萜类内酯单体及银杏总黄酮的制备方法
本发明的目的是提供一种制备工艺简单，成本低，生产速度高，所用试剂和助剂基本可重复利用，利用同种起始原料银杏提取物(E(ib761)能得到高纯度银杏总黄酮，也能得到各种银杏萜内酯单体的银杏萜内酯单体及银杏总黄酮的制备方法。本发明是这样实现的本发明银杏萜内酯单体及银杏总黄酮的其特征在于(1)银杏标准提取物EGB761使用体制积百分浓度10%—100%乙醇溶解，过聚酰胺树脂纯化处理，回收乙醇，0 — 5°C冷藏1 一 10天；(2)将步骤1中的冷藏液通过双层滤纸或微孔滤膜过滤，分别收集沉淀及滤液；(3)将步骤2中沉淀使用以下方法之一进行精制(a)将沉淀加纯化水加热溶解再使用有机溶剂萃取或直接使用有机溶剂提取，收集有机相，浓缩至干，再使用1一10倍量体积的体积百分比浓度15—50%乙醇加热溶解，常温放置或0—5°C冷藏1一2天，结晶，得到白色晶体，分离白色晶体，真空干燥，得到银杏内酯A、 B、C三种银杏内酯。含量在95%以上的白色粉末，母液减压浓缩至干，再使用1一10倍量体积的体积百分比浓度1 一 10%乙醇按加热溶解，放置或冷藏结晶，得白果内酯，真空干燥，得到纯度在95%以上白色粉末；(b)将沉淀加纯化水加热溶解再使用有机溶剂萃取或直接使用有机溶剂提取，收集有机相，浓缩至干，然后使用1/4一1/8倍量体积的乙酸乙酯或乙醇溶解完全，然后加入5_20 倍量体积正己烷或乙醚，常温放置或0 — 5°C冷藏，得到白色晶体，分离白色晶体，60°C真空干燥，得到银杏内酯A、B、C及白果内酯混合物总含量在95%以上的白色粉末；(c)将(a)中混合物结晶粉末或(b)中混合物结晶粉末通过中压制备柱纯化，使用有机溶剂洗脱，分段收集洗脱液，依次得到银杏内酯C、银杏内酯A、银杏内酯B或白果内酯、 银杏内酯C、银杏内酯A、银杏内酯B ；洗脱液分别合并后浓缩，干燥，即得，所得内酯单体纯度均在98%以上；(4)将步骤2中滤液及步骤3中(a)或(b)中结晶后母液合并，使用体积百分比浓度 1%—10%Na0H溶液或体积百分比浓度1% — 10%Na2C03溶液或体积百分比浓度1% — 10%NaHC03 溶液调PH至3—8，通过阴离子交换树脂吸附，先用纯化水洗涤，弃去洗脱液，然后使用碱液或盐溶液或醇溶液洗脱，洗脱液使用体积百分比浓度1 一 10%盐酸溶液调PH至3— 5得酸液；
(5)将步骤4中酸液使用分子量150—250道尔顿有机复合膜钠滤设备除去盐及小分子杂质，收集未透过液，最后浓缩、真空干燥得到含量在90%以上的银杏总黄酮；
步骤3中所述的有机溶剂是乙酸乙酯或正丁醇或2—丁醇。步骤3中(C)所述的中压制备柱为C18反相柱或MCI树脂柱。步骤3中(C)所述的洗脱溶剂为乙腈一水9 :1一4 :6，v/v或水一甲醇9 :1一5 :5，
v/vo步骤4中所述的阴离子交换树脂是D301大孔弱碱性苯乙烯系阴离子交换树脂或 D315大孔弱碱性丙烯酸系阴离子交换树脂或D280大孔强碱性苯乙烯系阴离子交换树脂或 201X7强酸性苯乙烯系阴离子交换树脂。步骤4中所述的碱液是PH值为8 —12的稀氨水或氢氧化钠溶液；盐溶液为0. lmol/L—2mol/L的氯化钠溶液；醇溶液为体积百分比浓度30%— 90%乙醇溶液。
本发明通过以下步骤实现
1、银杏叶通过常规方法提取制备银杏标准提取物(EGB761)
2、从银杏标准提取物(EGB761)制备银杏总黄酮 a.聚酰胺纯化处理
10% —100%乙醇聚酰胺树脂减压浓缩 -P -P-银杏标准提取物醇溶物


本发明为银杏萜类内酯单体及银杏总黄酮的制备方法，解决已有制备方法工艺复杂，生产效率低，成本高的问题。本发明以银杏标准提取物(EGB761)为起始原料。制备工艺包括银杏萜类内酯单体(银杏内酯A、B、C及白果内酯)的纯化和银杏总黄酮的纯化，本发明和公开的方法相比，增加了阴离子交换树脂、中压制备柱以及钠滤等现代分离纯化技术，提高了产品质量，而且更适合于生产应用。