专利名称：抗病毒杂环化合物的制作方法抗病毒杂环化合物本发明提供了式I的非核苷化合物及其某些衍生物，它们是RNA依赖性RNA病毒聚合酶的抑制剂。这些化合物对于治疗RNA依赖性RNA病毒感染有用。它们作为丙型肝炎病毒(HCV)NSSB聚合酶的抑制剂、作为HCV复制的抑制剂以及对于治疗丙型肝炎感染特别有用。丙型肝炎病毒是全世界慢性肝疾病的主要原因。(Boyer，N.等， J. Hepatol. 200032 :98-112)。感染HCV的患者有发生肝硬化以及随后发生肝细胞癌的风险，因此HCV感染是肝移植的主要指征。HCV已经被分类为黄病毒科病毒家族的成员，该病毒家族包括黄病毒属、瘟病毒属和包括丙型肝炎病毒的丙型肝炎病毒属(hapaceivirus) (Rice, C. Μ.，黄病毒科: 病毒禾口它们的复制(Flaviviridae :The viruses and their replication), Fields Virology,编辑B. N. Fields, D. M. Knipe 禾口 P. M. Howley, Lippincott-Raven Publishers, Philadelphia, Pa.，第 30 章，931-959，1996)。HCV 是一种包膜病毒，含有约 9. 4kb 的正义单链RNA基因组。该病毒基因组由一个高度保守的5’非翻译区(UTR)、一个编码约3011个氨基酸的多蛋白前体的长可读框和一个短3’ UTR组成。HCV的遗传学分析已经鉴定了 6种主要基因型，其DNA序列的30%以上不同。超过 30种亚型已被鉴别。在美国约70%的受感染个体具有Ia型和Ib型感染。Ib型是亚洲最为普遍的亚型。(X. Forns 和 J. Bukh，Clinics in Liver Disease 1999 3 :693-716 ;J. Bukh 等，Semin. Liv. Dis. 199515 :41-63)。不幸的是，1型感染比2型或3型基因型更难以治疗 (N. N. Zein, Clin.Microbiol. Rev.，200013 :223-235)。病毒结构蛋白包括一种核壳核心蛋白(C)和两种包膜糖蛋白-El和E2。HCV还编码两种蛋白酶一被NS2-NS3区编码的锌依赖性金属蛋白酶和在NS3区编码的丝氨酸蛋白酶。这些蛋白酶是前体多蛋白的特定区域裂解为成熟的肽所必需的。非结构蛋白5(NS5B) 的羧基半段含有RNA依赖性RNA聚合酶。其余非结构蛋白NS4A和NS4B的功能以及NS5A (非结构蛋白5的氨基端半段)的功能依然是未知的。人们认为HCV RNA基因组编码的大多数非结构蛋白参与RNA复制。目前，对于治疗HCV感染，可用的被认可的治疗数量有限。新的和现存的治疗 HCV感染和抑制HCV NS5B聚合酶活性的治疗方法已被综述R. G. Gish, Sem. Liver. Dis.， 199919 5 ；Di Besceglie, Α. M.和 Bacon, B. R.，Scientific American, 10 月199980-85 ； G. Lake-Bakaar，慢性丙型肝炎病毒肝疾病的目前的和将来的疗法(Current and Future Therapy for Chronic Hepatitis C Virus Liver Disease), Curr. Drug Targ. Infect. Dis. 20033(3) :247-253 ；P. Hoffmann等，最近的关于丙型肝炎病毒感染的实验性疗法的专利(1999-2002) (Recent patent on experimental therapy for hepatitis C virus infection(1999-2002)), Exp.Opin. Ther. Patents 2003 13(11) :1707-1723 ；M. P. Walker 等，治疗慢性丙型肝炎的有前景的候选物(Promising Candidates for the treatment of chronic hepatitis C),Exp. Opin. Investing. Drugs 200312(8) : 1269-1280 ;S. _L. Tan等， 丙型肝炎治疗目前的状况和新出现的策略Ofepatitis C Therapeutics =Current Statusand Emerging Strategies),Nature Rev. Drug Discov. 20021 :867-881 ；J. Z. Wu禾口Z.Hong, 靶向于NS5B RNA依赖性RNA聚合酶的抗-HCV化学治疗(Targeting NS5B RNA-Dependent RNA Polymerase for Anti-HCV Chemotherapy),Curr. Drug Targ. -Infect. Dis. 20033 (3) 207-219。利巴韦林(1-G2R，3R，4S，5R)_3，4- 二羟基_5_羟甲基-四氢-呋喃-2-基)-IH-[1，2，4]三唑-3-甲酰胺；Virazole )是一种合成的非干扰素诱导的广谱抗病毒核苷类似物。利巴韦林具有对抗包括黄病毒科在内的多种DNA和RNA病毒的体外活性(Gary L. Davis. Gastroenterology 2000 118 :S104_S114)。尽管在单一药物治疗中利巴韦林在40%患者中将血清氨基转移酶降低至正常水平，但它不降低血清HCV-RNA水平。 利巴韦林还表现出显著的毒性并且已知会诱发贫血。Viramidine是利巴韦林的前药，在肝细胞中被腺苷脱氨酶转变为利巴韦林。(J. Z. ffu, Antivir. Chem. Chemother. 2006 17(1) 33-9)。在近十年干扰素(IFN)已经被用于治疗慢性肝炎。IFN是免疫细胞应答于病毒感染产生的糖蛋白。两种不同类型的干扰素得到确认1型包括多种干扰素α和一种干扰素 β，2型包括干扰素Y。1型干扰素主要由受感染的细胞产生并保护邻近细胞免受新感染。 IFN抑制包括HCV在内的许多病毒的病毒复制，并且当用作丙型肝炎感染的唯一治疗时， IFN抑制血清HCV-RNA至不能被检测到的水平。此外，IFN使血清氨基转移酶水平正常化。 不幸的是，IFN的作用是暂时性的。中止治疗造成70%复发率，仅10%-15%表现出持久的病毒学应答且和正常的血清丙氨酸转移酶水平。(Davis，Luke-Bakaar,同上)早期IFN治疗的一个局限是蛋白质从血液中迅速清除。用聚乙二醇(PEG)对IFN 的化学衍生化导致蛋白质具有大幅改善的药动学性质。PEGASYS 是轭合的干扰素α - 和 40kD分支单甲氧基PEG, PEG-INTR0N .是轭合的α -2b和12kD单甲氧基PEG。(B. A. Luxon 等，Clin. Therap. 2002 24(9) :13631383 ；A. Kozlowski 和 J. Μ. Harris, J. Control. Release 200172 :217-224)。
用利巴韦林和干扰素α组合治疗HCV目前是最佳的HCV疗法。组合利巴韦林和 PEG-IFN(infra)在-56%患有1型HCV的患者中产生持久的病毒应答(SVR)。对于2 型和3型HCV，SVR接近80%。(Walker，同上)不幸的是，组合治疗还产生副作用，其造成临床挑战。抑郁、流行性感冒样症状和皮肤反应与皮下注射INF-α相关，溶血性贫血与用利巴韦林持续治疗相关。
现在已经确定了许多潜在的分子靶标来进行抗HCV疗法的药物开发，包括但不限于NS2-NS3自体蛋白酶(autoprotease)、NS3蛋白酶、NS3解旋酶和NS5B聚合酶。RNA依赖性RNA聚合酶对于单链正义RNA基因组的复制是绝对必需的。该酶在药物化学工作者中已经引起了极大兴趣。
核苷抑制剂能用作链终止剂或用作干扰核苷酸与聚合酶结合的竞争性抑制剂。 为了作为链终止剂发挥作用，核苷类似物必须在体内被细胞摄取并在体内被转化为其三磷酸化形式，以便在聚合酶核苷酸结合位点作为底物进行竞争。这种向三磷酸化形式的转化通常由细胞激酶介导，所述细胞激酶造成了对任意核苷的另外的结构限制。此外，这种磷酸化的要求将核苷作为HCV复制的抑制剂的直接评价限制到了以细胞为基础的测定法上(J. A. Martin 等，美国专利 No. 6，846，810 ；C. Pierra 等，J. Med. Chem. 200649 (22)6614-6620 J. W. Tomassini Antimicrob. Agents and Chemother. 200549(5) 2050 ； J. L. Clark 等·，J. Med. Chem. 200548 (17) :2005)。
当彼此组合使用以及与其它生物活性剂组合使用时，本发明的化合物和它们的异构形式及其药学上可接受的盐还可用于治疗病毒感染，特别是丙型肝炎感染，以及活宿主的疾病，所述其它生物活性剂包括但不限于干扰素、聚乙二醇化的干扰素、利巴韦林、蛋白酶抑制剂、聚合酶抑制剂、干扰RNA的小化合物、反义化合物、核苷酸类似物、核苷类似物、 免疫球蛋白、免疫调节剂、肝保护剂(h印atoprotectant)、抗炎剂、抗生素、抗病毒剂和抗感染化合物。所述组合治疗还可以包括与其它药物或增效剂一起并行或相继提供本发明的化合物，所述其它药物或增效剂例如利巴韦林和相关的化合物、金刚烷胺和相关的化合物、各种干扰素如干扰素α、干扰素β、干扰素γ等，以及干扰素的替代形式如聚乙二醇化的干扰素。此外利巴韦林和干扰素的组合也可以作为另外的组合治疗与至少一种本发明的化合物一起施用。
目前正在开发的其它干扰素包括白蛋白干扰素-α -2b (Albuferon)、使用DUROS 的IFN-ω、L0CTER0NTM和干扰素-α-2b XL。因为这些干扰素和其它干扰素进入到了市场， 它们与本发明的化合物一起在组合治疗中的使用是可预期的。
HCV聚合酶抑制剂对于药物发现而言是另一个靶标，开发中的化合物包括R-16^、 R-7128、IDX184/IDX102、PF-868554 (Pfizer)、VCH-759 (ViroChem)、GS-9190 (Gilead)、 A-837093 禾口 A-848837 (Abbot)、MK-3281 (Merck)、GSK949614 禾口 GSK625433 (Glaxo)、 ANA598(Anadys)、VBY708(ViroBay)。
HCV NS3蛋白酶抑制剂也已被确定对于治疗HCV是潜在有用的。在临床试验中的蛋白酶抑制剂包括 VX-950 (Telaprevir，Vertex)、SCH503034 (Broceprevir, Schering)、 TMC435350 (Tibotec/Medivir)和 ITMN-191 Qntermune)。其它处于开发早期阶段的蛋白酶抑制剂包括 MK7009 (Merck)、BMS-790052 (Bristol Myers Squibb)、VBY-376 (Virobay)、 IDXSCA/IDXSCB(Idenix)、BI12202(Boehringer)、VX-500(Vertex)、PHX1766(Phenomix)。
在研究的抗HCV治疗的其它靶标包括抑制RNA与NS^3结合的亲环蛋白抑制剂、 硝唑沙奈、西戈韦(Migenix)、α-葡糖苷酶-1抑制剂、胱天蛋白酶抑制剂、Toll样受体 (Toll-like receptor)激动剂和免疫刺激剂如日达仙(SciClone) 0
目前没有丙型肝炎病毒(HCV)的预防性疗法，并且目前批准的仅对抗HCV的治疗是有限的。设计和开发新的药物化合物是必需的。
本发明提供了式I的化合物或其药学上可接受的盐，其中


本发明公开了抑制丙型肝炎病毒NS5b聚合酶抑制剂的式(I)的1-N-取代的-6-(杂)芳基-1H-噻吩并[3，2-d]嘧啶-4-酮衍生物，其中R1、R2、R3和R4如本文所定义。还公开了用于治疗HCV感染和抑制HCV复制的组合物和方法。